發(fā)布時(shí)間：2021-06-20 18:01

　　本研究以愈創(chuàng)木酚培養(yǎng)基和苯胺藍(lán)培養(yǎng)基從吉林省不同經(jīng)緯度的自然朽木及腐朽玉米秸稈土壤樣品中分離、篩選得到高效降解木質(zhì)素的菌株,并對(duì)其形態(tài)學(xué)鑒定,通過ITS序列分析構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,分析菌株的分類地位。通過秸稈固體發(fā)酵過程產(chǎn)生的胞外木質(zhì)素酶的活性分析,選出高效秸稈降解菌。目的在于篩選出一株高效降解木質(zhì)素的菌株,并研究其以玉米秸稈為底物時(shí)木素降解酶活性,以及木質(zhì)纖維素的降解情況,對(duì)木質(zhì)素酶活性對(duì)秸稈組分變化情況的關(guān)系進(jìn)行分析,并對(duì)佳培養(yǎng)基配方進(jìn)行正交試驗(yàn)優(yōu)化分析,使其在低成本下達(dá)到最佳酶活力。1.篩選出1株高效降解秸稈的真菌,經(jīng)過形態(tài)學(xué)特征和ITS序列分析,命名白囊耙齒菌W2（Irpex lacteus W2）,2.該菌株在4–8 d內(nèi)產(chǎn)生的錳過氧化物酶（Manganese peroxidase）呈上升趨勢(shì),并且在8 d達(dá)到峰值86.31 U/mL,與黃孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium）的最高酶活力45.86 U/mL相比,高出了88.20%（P<0.01）;該菌株的漆酶（Laccase）活力8 d時(shí)達(dá)到20.60 U/mL,比對(duì)照高40.76%（P&... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

選擇培養(yǎng)基上顯色的菌株Fig.3.1Thefungalstrainsonthemediumwereselected.A:Phanerochaetechrysosporium;B:StrainW2;C:StrainF8-5;D:StrainF4-6;E:StrainBai11;F:StrainF5-1.

control.3.2 形態(tài)學(xué)鑒定對(duì)W2、Bai11、 F8-5、F4-6、F5-1進(jìn)行菌種鑒定：結(jié)合真菌形態(tài)(圖3.3)及在40×倒置顯微鏡下其分生孢子區(qū)形態(tài)(圖3.4)，根據(jù)《真菌鑒定手冊(cè)》[121]得出結(jié)論：W2：菌落白色致密絲絨質(zhì)，環(huán)形放射延伸，擔(dān)子生孢子4個(gè)，初步鑒定為耙齒菌屬；Bai11：菌落淡黃色且絲絨稀疏，頂毛分支少且屈曲，子囊殼壁先黃后黑，四周有毛，頂毛無隔膜，初步鑒定為毛殼菌屬；F8-5：菌落白色致密，偶有疣狀凸起，分生孢子梗較長(zhǎng)，孢子較少，初步鑒定為半知菌；F4-6和F5-1：菌落由白圓形向四周擴(kuò)展

20圖 3.4 400×倒置顯微鏡下孢子形態(tài)Fig. 3.4 Spore morphology under 400× inverted microscope. A: Strain W2; B: Strain Bai11; C:Strain F8-5; D: Strain F5-1; E: Strain F4-6.3.3 ITS 序列分析提取其總DNA，選用真菌通用引物序列進(jìn)行擴(kuò)增菌株的ITS序列，再到GenBank中比對(duì)。選取與實(shí)驗(yàn)菌株親緣關(guān)系較近的菌株及模式對(duì)照菌株進(jìn)行序列比對(duì)，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(圖3.5)。菌株W2的rDNA-ITS序列與Irpex lacteus strainKUC8958(JX311924.1)序列相似性均為99%，且位于系統(tǒng)發(fā)育樹同一分支，結(jié)合形態(tài)學(xué)特征將其鑒定為白囊耙齒菌(Irpex lacteus)。菌株Bai11的rDNA-ITS序列與Chaetomium globosum isolate OTU470(GU934507.1)、Chaetomium elatum strainP10-17a(KT354986.1)相似性均達(dá)99%，且與其在系統(tǒng)發(fā)育樹同一分支，結(jié)合形態(tài)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]木質(zhì)素降解菌株的分離及其降解玉米秸稈過程中產(chǎn)酶特點(diǎn)[J]. 郭曉威,王秀然,解長(zhǎng)睿,孫丹,陳歡,高紅桃,張超,李明堂,李海燕.  微生物學(xué)報(bào). 2017(12)
[2]不同木質(zhì)底物誘導(dǎo)下白囊耙齒菌胞外木質(zhì)纖維素酶活性和胞內(nèi)蛋白質(zhì)組的差異[J]. 吳柯軍,閆紹鵬,盧宏,李海峰,王秋玉.  林業(yè)科學(xué). 2016(08)
[3]玉米秸稈真菌降解液生產(chǎn)燃料乙醇的發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 姜慶宏,姜月,張鐵軍,胡慶凱.  可再生能源. 2015(12)
[4]不同地區(qū)取樣點(diǎn)土壤中木質(zhì)素降解優(yōu)勢(shì)菌株的篩選及生長(zhǎng)特性比較[J]. 別春雨,姜濤,蔣曉云,章世元.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2013(07)
[5]中國(guó)各省大田作物田間秸稈資源量及其時(shí)間分布[J]. 韋茂貴,王曉玉,謝光輝.  中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(06)
[6]木質(zhì)纖維素種類對(duì)白腐菌降解選擇性的影響[J]. 劉波,黃慧艷,余洪波,張曉昱.  中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(08)
[7]高效木質(zhì)素降解菌株的分離篩選[J]. 燕紅,蘇俊,于彩蓮,艾恒雨,張曉甜.  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2011(03)
[8]蒸汽爆破預(yù)處理和微生物發(fā)酵對(duì)玉米秸稈降解率的影響[J]. 常娟,尹清強(qiáng),任天寶,張百良,宋安東,左瑞雨,盧敏,劉俊熙.  農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào). 2011(04)
[9]白腐菌降解木質(zhì)素研究進(jìn)展[J]. 王敏.  衡水學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(01)
[10]吉林省玉米秸稈可利用資源評(píng)價(jià)分析[J]. 那偉,趙新穎,黃梟.  中國(guó)農(nóng)業(yè)資源與區(qū)劃. 2010(06)

博士論文
[1]中國(guó)大田作物茬高—茬重模型的建立及東北、華北和西北地區(qū)秸稈能源利用可獲得性[D]. 楊璐.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]白腐菌預(yù)處理與酶解轉(zhuǎn)化楊木研究[D]. 王偉.北京林業(yè)大學(xué) 2014

碩士論文
[1]白耙齒菌的篩選鑒定及其產(chǎn)酶與降解秸稈條件的優(yōu)化[D]. 別春雨.揚(yáng)州大學(xué) 2014
[2]降解秸稈的白腐真菌的篩選、優(yōu)化及混菌發(fā)酵研究[D]. 韋麗敏.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]中國(guó)生物質(zhì)能的地區(qū)分布及開發(fā)利用評(píng)價(jià)[D]. 賀仁飛.蘭州大學(xué) 2013
[4]遼寧省秸稈能源化利用對(duì)策研究[D]. 于彬.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
[5]豬苓液體發(fā)酵及其多糖活性的研究[D]. 張新亮.福建農(nóng)林大學(xué) 2010
[6]白囊耙齒菌胞外漆酶的純化及酶學(xué)性質(zhì)的研究[D]. 李超.東北林業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3239670