發(fā)布時間：2024-07-06 12:18

　　由柄銹菌(Puccinia helianthi Schw.)引起的向日葵銹病是發(fā)生在向日葵上重要的真菌病害之一,嚴(yán)重時會影響品質(zhì)及含油量。MicroRNA(miRNA)是植物體內(nèi)普遍存在的一種非編碼單鏈小RNA,參與調(diào)控植物生長發(fā)育及多種逆境脅迫響應(yīng)。針對向日葵抗病相關(guān)miRNA這一研究的空白,本試驗構(gòu)建銹病脅迫下向日葵small RNA文庫,通過Solexa高通量測序及生物信息學(xué)分析篩選與抗病顯著相關(guān)的miRNA;利用實時熒光定量(qRT-PCR)技術(shù)對10個抗病相關(guān)的miRNA進(jìn)行定量驗證,并利用miRanda軟件進(jìn)行靶基因預(yù)測;挑選其中的4個抗病相關(guān)的miRNA構(gòu)建miRNA的植物表達(dá)載體。這為深入研究向日葵miRNA抗病分子機(jī)制及進(jìn)一步研究向日葵抗病相關(guān)miRNA的功能奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.用高通量測序技術(shù)預(yù)測分析了向日葵miRNA,在其全基因組中共發(fā)現(xiàn)了 378個miRNA,其中373個是新發(fā)現(xiàn)的miRNA,新預(yù)測的miRNA中有13個miRNA是對照組(A)、抗病組(B)、感病組(C)三組材料中差異表達(dá)的。樣品A和樣品B之間共有8個差異表達(dá)基因,樣品B和樣品C之間...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１文庫構(gòu)建原理圖??Ｆｉｇ．?１?Ｔｈｅ?ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｌｉｂｒａｒｙ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ??

下向日葵ｓｍａｌｌ?ＲＮＡ文庫構(gòu)建及Ｓｏｌｅｘａ高通量測序??２．４．１文庫構(gòu)建及測序??檢測向日葵對照和病害處理葉片的總ＲＮＡ，質(zhì)量合格后用ｓｍａｌｌ?ＲＮＡ?Ｓａｍｐｌｅ??Ｐｒｅ?Ｋｉｔ來構(gòu)建其文庫，以總ＲＮＡ為起始樣品，ｓｍａｌｌ?ＲＮＡ的３’端加上接頭，添??加反轉(zhuǎn)錄引....

圖２向日蔡對照和病害脅迫下ｃｌｅａｎ?ｒｅａｄｓ和ｍｉＲＮＡ的長度分布??

ｗｎ?２０２１８３７?１６５５２５４?１８１５５５２?８８．１７?８７．６２?８７．５３??ｎｃＲＮＡ?５８８８?５０７２?７９８９９?２６?０．２７?３．８６??ｃｌｅａｎ?ｒｅａｄｓ?２２９３１３５?１８９１４４６?２０７３３５９?１００?１００?１００??３．２向日葵抗病相....

圖３向日葵已知和新預(yù)測ｍｉＲＮＡ各位點的堿基分布圖??

?向日葵銹病抗性相關(guān)ＭｉｃｒｏＲＮＡ的挖掘及表達(dá)載體的構(gòu)建???３．２．２基于ｍｉＲＮＡ成熟序列的堿基偏好性篩選??因為植物ｍｉＲＮＡ的前體在細(xì)胞核中形成，然后運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)中，由ＤＣＬ１??酶酶切處理后，形成成熟的ｍｉＲＮＡｓ，這種酶切位點的特異性使得ｍｉＲＮＡ序列??首位對Ｕ具....

圖５向日葵葉片的總ＲＮＡ凝膠電泳??Ｆｉ．５?Ｔｏｔａｌ?ＲＮＡｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ?ｌｅａｖｅｓ??

蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文???接上表９???３１?Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ?ｅｘｃｉｓｉｏｎ?ｒｅｐａｉｒ?０．２８４２６?ｋｏ０３４２０??３２?ｍＲＮＡ?ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ?ｐａｔｈｗａｙ?０．２９６０５?ｋｏ０３０１５??３３?Ｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ?０．４０７４６?ｋｏ....

本文編號：4002542