水稻黃單胞菌稻屬致病變種(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)是引起水稻白葉枯病的病原菌,導(dǎo)致水稻產(chǎn)量大幅下降。病原菌與植物的成功互作需要特定的營養(yǎng)環(huán)境,該環(huán)境應(yīng)允許病原菌生長,并可引發(fā)病原菌和宿主的反應(yīng),導(dǎo)致植物病害。研究表明氨基酸合成對于病原菌成功感染宿主很重要。但大部分氨基酸合成對病原菌致病性的影響尚不清楚,需要進(jìn)一步研究。本研究根據(jù)KEGG生物合成途徑篩選了編碼氨基酸生物合成關(guān)鍵酶的基因(leu B,leu C,leu D,ilv C,thr C,his D,trp C,arg H,met B和asp C),系統(tǒng)地敲除了這些基因。檢測野生型與相關(guān)氨基酸缺失突變體接種到含不同濃度的相應(yīng)氨基酸的M4N平板上的生長情況,結(jié)果表明leu B,thr C,his D,trp C,arg H和met B對于合成相應(yīng)的氨基酸必不可少。分析這些氨基酸營養(yǎng)型菌株對Xoo致病性的影響,結(jié)果表明亮氨酸,異亮氨酸,纈氨酸,蘇氨酸,組氨酸,色氨酸,精氨酸和半胱氨酸合成均對Xoo感染水稻至關(guān)重要。將突變體接種于添加了水稻葉片中氨基酸粗提取物的培養(yǎng)基上,結(jié)果表明水稻葉片中游離氨...

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1.前言
    1.1 氨基酸的調(diào)控功能
        1.1.1 動物中氨基酸的營養(yǎng)調(diào)控功能
        1.1.2 氨基酸在植物中的作用
        1.1.3 微生物中氨基酸的功能研究進(jìn)展
    1.2 水稻的主要病害
    1.3 水稻白葉枯病
    1.4 Xoo-水稻互作研究進(jìn)展
        1.4.1 植物對病原菌天然免疫的機(jī)制
        1.4.2 水稻-Xoo互作系統(tǒng)
        1.4.3 水稻-Xoo互作的環(huán)境條件
    1.5 氨基酸合成與黃單胞菌致病性的研究進(jìn)展
    1.6 本研究的目的意義
2.材料和方法
    2.1 材料與試劑
        2.1.1 質(zhì)粒及菌株
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
    2.2 方法與步驟
        2.2.1 Xoo的氨基酸敲除菌株的構(gòu)建
        2.2.2 Xoo的 leu B互補(bǔ)型菌株的構(gòu)建
        2.2.3 Xoo氨基酸突變體的生長情況分析
        2.2.4 Xoo的氨基酸缺失菌株的致病力分析
        2.2.5 稻葉中氨基酸的粗提取及細(xì)菌生長分析
        2.2.6 RNA Sequencing(RNA-Seq)和q PCR分析差異表達(dá)的基因
        2.2.7 β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)活力測定
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    3.1 Xoo中氨基酸合成必需基因缺失突變體與互補(bǔ)菌株的構(gòu)建
    3.2 氨基酸合成關(guān)鍵酶基因參與相關(guān)氨基酸的合成
    3.3 氨基酸合成與Xoo致病性的關(guān)系
    3.4 水稻葉片中游離氨基酸密切影響Xoo的生長
    3.5 Xoo利用各種氨基酸的能力不同
    3.6 亮氨酸調(diào)節(jié)與Xoo致病力有關(guān)的途徑
4.討論
    4.1 氨基酸合成與Xoo致病力的關(guān)系
    4.2 Xoo中的BCAA合成途徑
    4.3 亮氨酸調(diào)節(jié)Xoo致病性的可能機(jī)制
5.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號：3989846