研究生防菌木霉菌(Trichoderma)的信號(hào)傳遞和調(diào)控機(jī)制,對(duì)探索木霉菌生防機(jī)制、提高生防效果有重要的意義。G蛋白是一種GTP結(jié)合蛋白,介導(dǎo)的細(xì)胞跨膜信號(hào)傳遞系統(tǒng)在調(diào)控真菌的生長(zhǎng)、產(chǎn)孢、代謝、致病性等過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用。典型的絲狀真菌G蛋白由α、β和γ3個(gè)亞基組成,其中Gα亞基包括GαⅠ、GαⅡ、GαⅢ三個(gè)類群。一般認(rèn)為,GαⅢ亞基的功能主要表現(xiàn)為影響細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)相關(guān)酶的活性、細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)、菌株致病力等,并可能負(fù)調(diào)控真菌的產(chǎn)孢。本研究采用基因敲除、回復(fù)突變技術(shù),結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測(cè)序和分析,研究了哈茨木霉GαⅢ亞基的功能。從哈茨木霉Th-33全基因組序列獲得GαⅢ亞基基因thga3序列信息,在基因組中的序列編號(hào)為T(mén)ha₀8474,通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得thga3基因片段并進(jìn)行生物信息學(xué)分析,完整thga3基因的開(kāi)放閱讀框?yàn)?068bp,共編碼355個(gè)氨基酸,GenBank登錄號(hào)為KY937956。與綠木霉(T.virens XP₀13955540.1)GαⅢ亞基的相似性為99%,與深綠木霉(T.atroviride XP₀139...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1G蛋白信號(hào)途徑的基本組成部分Fig.1ThebasiccomponentsoftheGproteinsignalingsystem

游效應(yīng)因子(Effector)、以及G蛋白信號(hào)調(diào)控蛋白(RgulatorsofGproteinsignaling,RGS)(Laal.,2006;劉增亮等，2014)如圖1.1(李利等，2013)。G蛋白信號(hào)調(diào)控蛋白是一種GTPase激白(GTPas....

圖1.2G蛋白循環(huán)Fig.1.2TheGproteincycle

cAMP-PKA途徑影響致病因子黑色素和多糖莢膜的產(chǎn)生以及交配virens）作用于酸苷類，對(duì)細(xì)胞和亞細(xì)胞的移動(dòng)有重要的作用，對(duì)產(chǎn)孢的影響未知KH.atroviridis）負(fù)調(diào)控產(chǎn)孢，影響抗菌肽的形成KT.reesei）參與了細(xì)胞壁降解酶的產(chǎn)生，參與重寄生過(guò)程，調(diào)控細(xì)....

圖2.1thga3基因的全長(zhǎng)DNA以及cDNA的擴(kuò)增M:250bpDNALadderMarker，1、Th-33基因組DNA，2、Th-33cDNA

第二息學(xué)分析，以及NCBI在線工具，ORFfinle分析編碼蛋白質(zhì)的疏水性；利用signal4.1分析翻譯后信號(hào)肽；用MEGA6.0構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)�？寺為引物，以Th-33基因組DN野生菌哈茨木霉Th-33總RNAPCR擴(kuò)增，目的片段大小為1....

圖2.3thga3基因編碼氨基酸序列的疏水性預(yù)測(cè)

NAMAN軟件以及NCBI在線工具，ORFfinder分析thga3的開(kāi)放閱讀長(zhǎng)度為1068bp的完整的開(kāi)放閱讀框。將thga3基因的DNA序列與軟件中進(jìn)行序列比對(duì)，結(jié)果顯示thga3基因序列中共有6個(gè)外顯子，5長(zhǎng)度為1068bp，6個(gè)外....

本文編號(hào)：3972814