研究生防菌木霉菌(Trichoderma)的信號傳遞和調控機制,對探索木霉菌生防機制、提高生防效果有重要的意義。G蛋白是一種GTP結合蛋白,介導的細胞跨膜信號傳遞系統(tǒng)在調控真菌的生長、產孢、代謝、致病性等過程中發(fā)揮了重要的作用。典型的絲狀真菌G蛋白由α、β和γ3個亞基組成,其中Gα亞基包括GαⅠ、GαⅡ、GαⅢ三個類群。一般認為,GαⅢ亞基的功能主要表現(xiàn)為影響細胞壁結構相關酶的活性、細胞壁結構、菌株致病力等,并可能負調控真菌的產孢。本研究采用基因敲除、回復突變技術,結合轉錄組測序和分析,研究了哈茨木霉GαⅢ亞基的功能。從哈茨木霉Th-33全基因組序列獲得GαⅢ亞基基因thga3序列信息,在基因組中的序列編號為Tha₀8474,通過PCR擴增獲得thga3基因片段并進行生物信息學分析,完整thga3基因的開放閱讀框為1068bp,共編碼355個氨基酸,GenBank登錄號為KY937956。與綠木霉(T.virens XP₀13955540.1)GαⅢ亞基的相似性為99%,與深綠木霉(T.atroviride XP₀139...

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1G蛋白信號途徑的基本組成部分Fig.1ThebasiccomponentsoftheGproteinsignalingsystem

游效應因子(Effector)、以及G蛋白信號調控蛋白(RgulatorsofGproteinsignaling,RGS)(Laal.,2006;劉增亮等，2014)如圖1.1(李利等，2013)。G蛋白信號調控蛋白是一種GTPase激白(GTPas....

圖1.2G蛋白循環(huán)Fig.1.2TheGproteincycle

cAMP-PKA途徑影響致病因子黑色素和多糖莢膜的產生以及交配virens）作用于酸苷類，對細胞和亞細胞的移動有重要的作用，對產孢的影響未知KH.atroviridis）負調控產孢，影響抗菌肽的形成KT.reesei）參與了細胞壁降解酶的產生，參與重寄生過程，調控細....

圖2.1thga3基因的全長DNA以及cDNA的擴增M:250bpDNALadderMarker，1、Th-33基因組DNA，2、Th-33cDNA

第二息學分析，以及NCBI在線工具，ORFfinle分析編碼蛋白質的疏水性；利用signal4.1分析翻譯后信號肽；用MEGA6.0構建系統(tǒng)進化樹�？寺為引物，以Th-33基因組DN野生菌哈茨木霉Th-33總RNAPCR擴增，目的片段大小為1....

圖2.3thga3基因編碼氨基酸序列的疏水性預測

NAMAN軟件以及NCBI在線工具，ORFfinder分析thga3的開放閱讀長度為1068bp的完整的開放閱讀框。將thga3基因的DNA序列與軟件中進行序列比對，結果顯示thga3基因序列中共有6個外顯子，5長度為1068bp，6個外....

本文編號：3972814