蚜蟲屬于刺吸式昆蟲,種類繁多,危害嚴重,是植物病毒的媒介。豌豆蚜(Acyrhosiphon pisum)基因組測序為豌豆蚜和其他蚜蟲的研究提供了基礎。令人驚訝的是,豌豆蚜基因組中缺失了一些在其它昆蟲中保守的基因,這些缺失的基因在昆蟲的免疫反應中起關鍵作用�；钚匝�(Reactive oxygen species,ROS)作為信號分子,參與多種細胞信號通路和免疫反應。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)催化超氧陰離子(O₂^-)轉化為過氧化氫(H₂O₂)和分子氧(O₂),H₂O₂可與氯離子(Cl^-)生成次氯酸(HOCl)。H₂O₂和HOCl被認為是參與宿主防御反應的主要ROS,因此SOD可能也調控宿主的免疫反應。本研究利用RNA干擾技術沉默豌豆蚜超氧化物歧化酶-2(SOD-2)基因,檢測豌豆蚜體內H₂O₂

【文章頁數】：50 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 蚜蟲概述
    1.2 昆蟲免疫簡介
        1.2.1 細胞免疫
        1.2.2 體液免疫
    1.3 ROS防御系統(tǒng)
        1.3.1 ROS的來源和抗氧化系統(tǒng)
        1.3.2 依賴ROS的免疫反應
    1.4 超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)
        1.4.1 Cu/ZnSOD結構特征與分布
        1.4.2 Cu/ZnSOD的功能
    1.5 研究內容和意義
    1.6 研究技術路線
第二章 材料和方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 供試昆蟲
        2.1.2 實驗菌株
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 設計引物
        2.2.2 實時熒光定量PCR
        2.2.3 樣品總RNA的抽提及反轉錄
        2.2.4 合成dsRNA
        2.2.5 注射dsRNA并檢測干擾效率
        2.2.6 病原菌感染豌豆蚜
        2.2.7 目的基因表達檢測
        2.2.8 豌豆蚜存活率統(tǒng)計
        2.2.9 豌豆蚜體內細菌菌落數和真菌孢子數的統(tǒng)計
        2.2.10 測定H₂O₂的含量
第三章 結果與分析
    3.1 SOD-2基因序列分析
    3.2 細菌、真菌感染誘導豌豆蚜體內H₂O₂濃度升高
    3.3 細菌、真菌感染后豌豆蚜SOD-2基因表達變化
    3.4 干擾SOD-2引起豌豆蚜體內H₂O₂水平的下降
    3.5 干擾SOD-2對細菌或真菌感染的豌豆蚜體內H₂O₂水平的影響
    3.6 干擾SOD-2對感染細菌或真菌的豌豆蚜體內細菌或真菌增殖的影響
    3.7 干擾SOD-2對感染細菌或真菌的豌豆蚜存活率的影響
第四章 討論
參考文獻
致謝
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