發(fā)布時間：2024-04-24 22:19

　　家蠶(Bombyx mori)是鱗翅目的重要經(jīng)濟昆蟲,馴養(yǎng)歷史已有8500余年。蠶絲業(yè)是中國的傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè),我國生絲產(chǎn)量占世界生絲總產(chǎn)量的78%以上,是全球絲綢原料的重要原產(chǎn)地。增加蠶絲的產(chǎn)量,提高蠶絲的品質(zhì)是發(fā)展蠶絲業(yè)的的核心問題,如何進一步提高家蠶生絲是蠶絲產(chǎn)業(yè)發(fā)展的面對的主要問題,運用分子生物學(xué)的手段提高蠶絲的產(chǎn)量是目前提高蠶絲產(chǎn)量新手段。近來的研究主要圍繞家蠶絲蛋白編碼基因、轉(zhuǎn)錄因子間的相互作用和絲蛋白基因的組織特異性表達,家蠶絲蛋白合成的信號調(diào)節(jié)機制還沒有解明。隨著時代的進步和科技的發(fā)展,納米生物技術(shù)的發(fā)展取得了長足的進步,在眾多領(lǐng)域獲得的了重大的成果。納米型飼料添加劑在畜牧業(yè)生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用,效果顯著。納米二氧化鈦(TiO₂ NPs)是一種典型的納米材料,因其表面效應(yīng)、體積效應(yīng)、量子尺寸效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng)等特點,被廣泛的應(yīng)用于生物學(xué)領(lǐng)域。TiO₂ NPs的生物學(xué)效應(yīng)與其濃度相關(guān),高濃度的TiO₂ NPs對生物有毒害作用,低濃度的TiO₂ NPs作為添加劑使用可促進牲畜的生長及蛋白的合成。...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
前言
    1.研究背景
    2.研究目的
    3.研究方法
    4.研究意義
    5.預(yù)期結(jié)果
    附：技術(shù)路線
第一章 文獻綜述
    第一節(jié) 家蠶絲蛋白的研究進展
        1.家蠶絲腺的結(jié)構(gòu)和功能
        2.絲蛋白的研究現(xiàn)狀
        3.TiO₂ NPs對家蠶絲蛋白合成的影響
    第二節(jié) PI3K/AKT信號通路的研究進展
        1.PI3K/AKT信號通路的概述
        2.家蠶PI3K/AKT信號通路的相關(guān)研究
    第三節(jié) 總結(jié)與展望
第二章 家蠶后部絲腺差異表達基因分析
    第一節(jié) 前言
    第二節(jié) 材料與方法
        1.實驗昆蟲
        2.TiO₂ NPs的制備及添食
        3.家蠶飼養(yǎng)及取材
        4.總RNA抽提
        5.RNA純化
        6.反轉(zhuǎn)錄
        7.內(nèi)參基因檢驗cDNA質(zhì)量
        8.Digital gene expression(DGE)測序
        9.引物設(shè)計
        10.實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測mRNA表達
    第三節(jié) 實驗結(jié)果
        1.DGE文庫的整體分析
        2.標簽映射的分析
        3.差異表達基因的鑒定
        4.Gene Ontology功能顯著性富集和KEGGPathway顯著性富集分析
        5.QRT-PCR驗證差異表達的基因
    第四節(jié) 討論
    第五節(jié) 小結(jié)
第三章 TiO₂ NPs對家蠶絲腺AKT/TOR信號通路的影響
    第一節(jié) 前言
    第二節(jié) 材料與方法
        1.實驗昆蟲
        2.TiO₂ NPs的制備及添食
        3.家蠶飼養(yǎng)及取材
        4.總RNA抽提
        5.RNA純化
        6.反轉(zhuǎn)錄
        7.內(nèi)參基因檢驗cDNA質(zhì)量
        8.引物設(shè)計
        9.qRT-PCR檢測mRNA表達
        10.Westernblot檢測蛋白表達
    第三節(jié) 實驗結(jié)果
        1.外源物質(zhì)處理對Akt/Tor信號通路相關(guān)基因的mRNA表達的影響
        2.外源物質(zhì)對Akt/Tor信號通路蛋白表達水平的影響
        3.Akt/Tor信號通路對絲蛋白基因表達的影響
    第四節(jié) 討論
    第五節(jié) 小結(jié)
第四章 絲蛋白合成轉(zhuǎn)錄因子對絲蛋白合成的調(diào)控
    第一節(jié) 前言
    第二節(jié) 材料與方法
        1.實驗昆蟲
        2.TiO₂ NPs的制備及添食
        3.家蠶飼養(yǎng)及取材
        4.總RNA抽提
        5.RNA純化
        6.反轉(zhuǎn)錄
        7.內(nèi)參基因檢驗cDNA質(zhì)量
        8.引物設(shè)計
        9.qRT-PCR檢測mRNA表達
        10.Westernblot檢測蛋白表達
        11.絲腺中總蛋白含量的測定
    第三節(jié) 實驗結(jié)果
        1.LY294002處理對家蠶絲蛋白相關(guān)基因的影響
        2.雷帕霉素處理對家蠶絲蛋白相關(guān)基因的影響
        3.LY294002和雷帕霉素處理對家蠶絲蛋白相關(guān)蛋白的影響
        4.LY294002和雷帕霉素處理對家蠶后部絲腺蛋白含量的影響
    第四節(jié) 討論
    第五節(jié) 小結(jié)
總結(jié)
參考文獻
攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3963583