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二穗短柄草—銹菌互作中WRKY轉(zhuǎn)錄因子的鑒定及功能分析

發(fā)布時間:2024-04-20 18:50
  小麥條銹病是影響我國小麥安全生產(chǎn)的重大病害之一。條銹菌致病性頻繁變異,導(dǎo)致品種抗銹性不斷“喪失”,常常引發(fā)病害流行,造成巨大損失。因而,開展小麥抗條銹機理研究,尋找條銹病可持續(xù)控制新策略,對條銹病可持續(xù)控制具有重要意義。WRKY作為一類超級家族轉(zhuǎn)錄因子,在調(diào)控植物防衛(wèi)反應(yīng)基因的表達,從而抵御病原菌中發(fā)揮重要作用。然而,參與小麥抗條銹病過程的關(guān)鍵WRKY轉(zhuǎn)錄因子及其轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制并不明確。由于小麥基因組龐大、遺傳轉(zhuǎn)化效率低,不利于抗銹基因的功能驗證及其完整的遺傳特性研究。因而,選擇和利用模式植物研究銹菌與其抗病互作的分子機理,對深入快速揭示小麥抗條銹機理意義重大。為此,本研究以建立的二穗短柄草和及其銹菌互作體系為對象,系統(tǒng)研究短柄草銹菌侵染二穗短柄草的組織學(xué)特征,解析二穗短柄草與其銹菌互作過程的基因表達特征,篩選受短柄草銹菌誘導(dǎo)的BdWRKY轉(zhuǎn)錄因子,通過RNAi技術(shù)沉默候選轉(zhuǎn)錄因子,通過表型及組織學(xué)觀察短柄草銹菌接種沉默突變體后病菌侵染及寄主應(yīng)答情況,分析目標(biāo)基因的功能。本研究對揭示Bd21-3對短柄草銹菌的作用機制,挖掘小麥持久抗病新機制提供重要的理論依據(jù)和技術(shù)支撐。本研究的主要內(nèi)容和...

【文章頁數(shù)】:127 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

圖2-1二穗短柄草自交系Bd21-3接種短柄草銹菌分離菌系F-CO和H-KI后的不同反應(yīng)型

圖2-1二穗短柄草自交系Bd21-3接種短柄草銹菌分離菌系F-CO和H-KI后的不同反應(yīng)型

14二穗短柄草-短柄草銹菌互作中WRKY轉(zhuǎn)錄因子的鑒定及功能分析2.3結(jié)果與分析2.3.1短柄草接種短柄草銹菌后的表型觀察二穗短柄草自交系Bd21-3接種短柄草銹菌分離菌系F-CO和K-KI后,在第14天進行表型觀察。觀....


圖2-2短柄草銹菌侵染短柄草30d后其不同組織部位的癥狀

圖2-2短柄草銹菌侵染短柄草30d后其不同組織部位的癥狀

第二章短柄草與短柄草銹互作的組織學(xué)觀察15圖2-2短柄草銹菌侵染短柄草30d后其不同組織部位的癥狀。A、整株的癥狀;B、穗部癥狀;C、莖稈部癥狀;D、穗柄癥狀。Fig.2-2DiseasesymptomsandsignsofdifferenttissuesofBd21-3inoc....


圖2-5微分干涉觀察受短柄草銹侵染24h后的苗期短柄草植株葉片

圖2-5微分干涉觀察受短柄草銹侵染24h后的苗期短柄草植株葉片

第二章短柄草與短柄草銹互作的組織學(xué)觀察19接種后時間Hoursafterinoculation(h)吸器母細(xì)胞個數(shù)aNumberofHMCa吸器個數(shù)bNumberofHbBd21-3+F-COBd21-3+H-KIBd21-3+F-COBd21-3+H-KI122.18±1.10....


圖3-1轉(zhuǎn)錄激活作用驗證實驗cDNA缺失片段示意圖(Wangetal.,2013)

圖3-1轉(zhuǎn)錄激活作用驗證實驗cDNA缺失片段示意圖(Wangetal.,2013)

?锨澹??0ml的MgCL2(10mM)洗滌沉淀(菌體)3次,然后用MgCL2(10mM)懸浮菌體,測OD值,用相同的MgCL2將懸浮菌液稀釋OD600至0.3。將懸浮菌液注射到煙草葉片(生長4-6周)中,pK7WGF空載體作為陰性對照,注射后2-3d觀察癥狀。3.2.6.5顯微....



本文編號:3959825

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