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家蠶微粒子誘導(dǎo)型Cas9編輯系統(tǒng)的構(gòu)建

發(fā)布時間:2024-04-13 05:17
  微孢子蟲(Microsporidia)作為一類單細(xì)胞的專性寄生真菌,廣泛存在于自然界中,具有廣闊的宿主域,能夠感染脊椎動物和無脊椎動物。家蠶微粒子(Nosema bombycis)作為第一種被人類所熟知的微孢子蟲,引起家蠶微粒子病(Pébrine)是蠶絲產(chǎn)業(yè)的毀滅性病害,嚴(yán)重威脅蠶絲業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。因此,迫切需要創(chuàng)制家蠶微粒子病抗性素材,培育抗性品種,為家蠶微粒子病的綠色防控提供重要保障。當(dāng)前家蠶微粒子病防控還是沿用巴斯德博士提出的母蛾鏡檢法對蠶種進(jìn)行檢疫,控制病原垂直傳播;用嚴(yán)格的環(huán)境消毒、桑葉消毒等措施控制病原水平傳播。這些防控措施不僅費(fèi)時費(fèi)力,勞動強(qiáng)度大,而且大量漂白粉等消毒藥劑的使用,環(huán)境污染嚴(yán)重,嚴(yán)重制約了蠶絲產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展,迫切需要家蠶微粒子病抗性品種。目前家蠶資源中未發(fā)現(xiàn)家蠶微粒子病的抗性素材,創(chuàng)制家蠶微粒子病抗性素材尤為迫切。由于家蠶微粒子特異性誘導(dǎo)型啟動子是創(chuàng)制家蠶微粒子病抗性素材的必要條件,而目前又未篩選到該類啟動子。根據(jù)家蠶微粒子的生活史特征,家蠶微粒子的分泌蛋白可作為構(gòu)建家蠶微粒子誘導(dǎo)型啟動子的核心元件。因此,基于分泌型蛋白構(gòu)建一套家蠶微粒子誘導(dǎo)型基因編輯系統(tǒng)...

【文章頁數(shù)】:86 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1微孢子蟲超微結(jié)構(gòu)示意圖

圖1.1微孢子蟲超微結(jié)構(gòu)示意圖

圖1.1微孢子蟲超微結(jié)構(gòu)示意圖[45]Figure1.1Diagramofamicrosporidiansporeultrastructure[45].e);孢子內(nèi)壁(Endospore);原生質(zhì)膜(Plasmamembrane);極管(Pol定盤(Ancho....


圖1.2微孢子蟲侵染宿主方式假說[52]

圖1.2微孢子蟲侵染宿主方式假說[52]

而是將宿主細(xì)胞膜向內(nèi)擠壓出一個內(nèi)陷結(jié)構(gòu),將孢原質(zhì)釋放于內(nèi)陷結(jié)構(gòu)內(nèi)部,進(jìn)而形成侵染泡[46](圖1.2)。腦炎微孢子蟲的極管可利用宿主細(xì)胞的吞噬作用進(jìn)入其體內(nèi),此外發(fā)現(xiàn)一些極管在進(jìn)入宿主細(xì)胞時,細(xì)胞表面相應(yīng)部位形成了內(nèi)陷結(jié)構(gòu)。但目前仍未有直接證據(jù)表明極管是否可以通過細(xì)胞吞噬進(jìn)入宿主....


圖1.3微孢子蟲生活史示意圖

圖1.3微孢子蟲生活史示意圖

圖1.3微孢子蟲生活史示意圖[52]Figure1.3Thelifecycleofmicrosporidian[52].外感染階段;Proliferativephase:裂殖增殖階段(前體階泌蛋白種胞內(nèi)寄生單細(xì)胞真核生物,其在獲取宿定程度上還會抵抗逃避宿主的免疫....


圖1.4CRISPR/Cas9基因編輯原理示意圖

圖1.4CRISPR/Cas9基因編輯原理示意圖

細(xì)菌等微生物可將相關(guān)外源基因切除,這是細(xì)菌中,CRISPR系統(tǒng)共分成3類,其中Ⅰ類和Ⅲ類需白)共同發(fā)揮作用,而Ⅱ類系統(tǒng)只需要一種Cas蛋泛應(yīng)用提供了便利條件[62-63]。兩個核酸酶結(jié)構(gòu)域,包括N端的類Ruc核酸酶[62]。通過一段RNA堿基互補(bǔ)配對識別DNA,....



本文編號:3952537

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