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家蠶微粒子誘導(dǎo)型Cas9編輯系統(tǒng)的構(gòu)建

發(fā)布時(shí)間:2024-04-13 05:17
  微孢子蟲(chóng)(Microsporidia)作為一類單細(xì)胞的專性寄生真菌,廣泛存在于自然界中,具有廣闊的宿主域,能夠感染脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物。家蠶微粒子(Nosema bombycis)作為第一種被人類所熟知的微孢子蟲(chóng),引起家蠶微粒子病(Pébrine)是蠶絲產(chǎn)業(yè)的毀滅性病害,嚴(yán)重威脅蠶絲業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。因此,迫切需要?jiǎng)?chuàng)制家蠶微粒子病抗性素材,培育抗性品種,為家蠶微粒子病的綠色防控提供重要保障。當(dāng)前家蠶微粒子病防控還是沿用巴斯德博士提出的母蛾鏡檢法對(duì)蠶種進(jìn)行檢疫,控制病原垂直傳播;用嚴(yán)格的環(huán)境消毒、桑葉消毒等措施控制病原水平傳播。這些防控措施不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)力,勞動(dòng)強(qiáng)度大,而且大量漂白粉等消毒藥劑的使用,環(huán)境污染嚴(yán)重,嚴(yán)重制約了蠶絲產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展,迫切需要家蠶微粒子病抗性品種。目前家蠶資源中未發(fā)現(xiàn)家蠶微粒子病的抗性素材,創(chuàng)制家蠶微粒子病抗性素材尤為迫切。由于家蠶微粒子特異性誘導(dǎo)型啟動(dòng)子是創(chuàng)制家蠶微粒子病抗性素材的必要條件,而目前又未篩選到該類啟動(dòng)子。根據(jù)家蠶微粒子的生活史特征,家蠶微粒子的分泌蛋白可作為構(gòu)建家蠶微粒子誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的核心元件。因此,基于分泌型蛋白構(gòu)建一套家蠶微粒子誘導(dǎo)型基因編輯系統(tǒng)...

【文章頁(yè)數(shù)】:86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1微孢子蟲(chóng)超微結(jié)構(gòu)示意圖

圖1.1微孢子蟲(chóng)超微結(jié)構(gòu)示意圖

圖1.1微孢子蟲(chóng)超微結(jié)構(gòu)示意圖[45]Figure1.1Diagramofamicrosporidiansporeultrastructure[45].e);孢子內(nèi)壁(Endospore);原生質(zhì)膜(Plasmamembrane);極管(Pol定盤(Ancho....


圖1.2微孢子蟲(chóng)侵染宿主方式假說(shuō)[52]

圖1.2微孢子蟲(chóng)侵染宿主方式假說(shuō)[52]

而是將宿主細(xì)胞膜向內(nèi)擠壓出一個(gè)內(nèi)陷結(jié)構(gòu),將孢原質(zhì)釋放于內(nèi)陷結(jié)構(gòu)內(nèi)部,進(jìn)而形成侵染泡[46](圖1.2)。腦炎微孢子蟲(chóng)的極管可利用宿主細(xì)胞的吞噬作用進(jìn)入其體內(nèi),此外發(fā)現(xiàn)一些極管在進(jìn)入宿主細(xì)胞時(shí),細(xì)胞表面相應(yīng)部位形成了內(nèi)陷結(jié)構(gòu)。但目前仍未有直接證據(jù)表明極管是否可以通過(guò)細(xì)胞吞噬進(jìn)入宿主....


圖1.3微孢子蟲(chóng)生活史示意圖

圖1.3微孢子蟲(chóng)生活史示意圖

圖1.3微孢子蟲(chóng)生活史示意圖[52]Figure1.3Thelifecycleofmicrosporidian[52].外感染階段;Proliferativephase:裂殖增殖階段(前體階泌蛋白種胞內(nèi)寄生單細(xì)胞真核生物,其在獲取宿定程度上還會(huì)抵抗逃避宿主的免疫....


圖1.4CRISPR/Cas9基因編輯原理示意圖

圖1.4CRISPR/Cas9基因編輯原理示意圖

細(xì)菌等微生物可將相關(guān)外源基因切除,這是細(xì)菌中,CRISPR系統(tǒng)共分成3類,其中Ⅰ類和Ⅲ類需白)共同發(fā)揮作用,而Ⅱ類系統(tǒng)只需要一種Cas蛋泛應(yīng)用提供了便利條件[62-63]。兩個(gè)核酸酶結(jié)構(gòu)域,包括N端的類Ruc核酸酶[62]。通過(guò)一段RNA堿基互補(bǔ)配對(duì)識(shí)別DNA,....



本文編號(hào):3952537

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