發(fā)布時(shí)間：2024-03-30 09:40

　　水稻是世界上最重要的糧食作物,為全球貢獻(xiàn)了約30%的能量攝入。由稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引發(fā)的稻癌瘟病對(duì)全球的稻谷產(chǎn)量帶來巨大的損失,每年的糧食損失可以養(yǎng)活6000萬的人口。稻瘟病菌的防治主要依賴于培育抗病品種和化學(xué)藥劑開發(fā),但該病菌易于發(fā)生變異,使抗病品種易喪失抗性。長(zhǎng)時(shí)間使用單一的化學(xué)藥劑使病原菌產(chǎn)生抗藥性,導(dǎo)致原有的藥劑因此失去藥效。因此,如何控制稻瘟病的發(fā)生和尋找有效的防治方法一直是糧食安全生產(chǎn)上的難題。通過分子實(shí)驗(yàn)深入的解析稻瘟病菌的致病機(jī)制,不但可以為抗病育種提供新的策略,同時(shí)也對(duì)具有特異性靶標(biāo)藥物的開發(fā)具有指導(dǎo)意義,為稻瘟病的總體防治提供新的思路。本論文主要對(duì)致病相關(guān)的bZIP轉(zhuǎn)錄因子MoAp1和MoBzip10的靶基因進(jìn)行鑒定,并對(duì)其在稻瘟病菌生長(zhǎng)、產(chǎn)孢和致病過程中的功能進(jìn)行分析,研究結(jié)果如下:本實(shí)驗(yàn)室前期的研究結(jié)果表明,轉(zhuǎn)錄因子MoAp1作為氧化應(yīng)答器參與清除活性氧的過程從而靶稻瘟病菌的致病力。本文從MoAp1的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中鑒定到了一個(gè)基因MoTRX2,該基因的起始密碼子上游500 bp的區(qū)域內(nèi)具有MoAp1的結(jié)合位點(diǎn)。在敲除MoTRX2后,突...

【文章頁數(shù)】：130 頁

【部分圖文】：

圖１－２?ＭｏＡｐｌ在Ｍｏ７７ＬＹ２啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合位點(diǎn)分析??Ｆｉｇ．?１－２?Ｂｉｎｄｉｎｇ?ｓｉｔｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＭｏＡＰｌ?ｉｎ?ＭｏＴＲＸ２?ｐｒｏｍｏｔｅｒ?ｒｅｇｉｏｎ．??

區(qū)具有ＭｏＡｐｌ的結(jié)合位點(diǎn)。通過熒光定量實(shí)驗(yàn)對(duì)Ｍｏ７７ＬＹ２在ＭｏＡｐｌ缺失突變體中的表??達(dá)水平進(jìn)行再驗(yàn)證，結(jié)果顯示在ＡＭｏｏｐ／突變體中Ｍｏ７７ＬＹ２表達(dá)量下降，這同前期轉(zhuǎn)錄??組數(shù)據(jù)相一致（圖１－２Ａ）。通過原核表達(dá)的方式獲得ＭｏＡｐｌ?：：ＧＳＴ蛋白，并利用ＧＳＴ?ｂｅａ....

圖１－５?ＭｏＴｒｘ２參與致病過程??－

?菌絲僅局限在單個(gè)水稻細(xì)胞內(nèi)，不能擴(kuò)展到相鄰細(xì)胞中，并且侵染菌絲分支明顯減少??（圖１－６Ｂ），這表明ＭｏＴｒｘ２參與侵染菌絲擴(kuò)展過程。??＾?＾１－０）?°?，?〇＞?＾?＾０５??＾?１?Ｈｉ?＾?１?１?＿?，?１?１?１｜??Ｉｌｌｉ?ＩＩ??翻，１?＿?ａＴ￣２?Ｓ?次....

圖１－７過表達(dá)Ｍ？７７＾Ｙ２不能回補(bǔ)ＡＡ／ｏａ；？／的致病性缺陷??

來觀察是否能夠回補(bǔ)ＡＭｏｏｐ／突變體的致病力缺陷。通過熒光定??量的方法對(duì)表達(dá)菌株進(jìn)行篩選，最終選擇ＡＭｏｏｐ／／Ｍｏ７７？Ｚ２＃２和ＡＭｏｏｐ／／Ｍｏ７７ＬＯ肋??兩個(gè)菌株進(jìn)行致病性實(shí)驗(yàn)（圖１－７Ａ）。將兩個(gè)過表達(dá)菌株、ＡＭｏａｐ／和Ｇｕｙｌｌ菌株進(jìn)行??兩天的搖培

圖１－８?Ａ／ｏ７７？Ｚ２缺失突變體的生長(zhǎng)速率減慢??

ＡＭｏ／ｒｘ２和回補(bǔ)菌株分別接種于ＣＭ和ＭＭ平板上，并放于２８?°Ｃ的培養(yǎng)箱中黑暗培??養(yǎng)７天，測(cè)量菌落直徑并拍照。數(shù)據(jù)顯示，當(dāng)ＭｏＩＸＯ基因缺失后，在ＣＭ上生長(zhǎng)速??度同野生相比顯著減慢（圖１－８），并且經(jīng)過統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)具有極顯著（尸＜?０．０１）差異（表??１－１）。在ＭＭ培....

本文編號(hào)：3942168