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印楝內(nèi)生放線菌的次生代謝產(chǎn)物分離鑒定及生物活性研究

發(fā)布時間:2024-03-18 18:51
  本論文以從印楝中分離出的放線菌菌株R6為研究對象,系統(tǒng)的研究了該菌株的分類地位和發(fā)酵液抑菌活性,菌株R6的發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件優(yōu)化,發(fā)酵液中抑菌活性物質(zhì)的提取、分離和純化,對分離純化出的單體化合物進行結構鑒定及解析,以及單體化合物抑菌活性測定和對作物安全性的測定。主要研究成果如下:1.從印楝中分離篩選具高抑菌活性的內(nèi)生放線菌R6。采用組織法和標準法從印楝葉片和果仁中分離純化內(nèi)生真菌114株,內(nèi)生細菌26株,內(nèi)生放線菌85株。采用平板對峙法,測試85株內(nèi)生放線菌對13種植物病原真菌的抑菌活性,試驗結果表明24株放線菌具有殺真菌活性。采用平板對峙法和噴霧法分別對24株放線菌進行細菌抑菌活性和殺蟲活性測定,試驗結果表明,抑菌活性較強的菌株G20、G27、G49、G60和R6 5株菌株殺蟲活性較弱。采用薄層色譜法對抑菌活性較強的5株菌株進行化學初篩,綜合抑菌活性和化學篩選的試驗結果,確定具有高殺菌活性,產(chǎn)生豐富物質(zhì)的菌株R6為目標菌株。2.通過傳統(tǒng)分類學和生物學鑒定菌株R6為密旋鏈霉菌。對放線菌菌株R6的形態(tài)學特征和培養(yǎng)特征進行觀察,對生理生化特性進行測定,對16S r DNA序列進行分析比對...

【文章頁數(shù)】:157 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 植物內(nèi)生放線菌研究進展(文獻綜述)
    1.1 放線菌的分類概況
    1.2 植物內(nèi)生放線菌的研究概況
    1.3 植物內(nèi)生放線菌次生代謝產(chǎn)物研究概況
    1.4 印楝的研究進展
    1.5 本論文的立題依據(jù)和設計思路
第二章 印楝內(nèi)生放線菌篩選及菌株R6的分類鑒定
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試材料
        2.1.2 試驗方法
    2.2 結果與分析
        2.2.1 印楝內(nèi)生菌的分離、純化和保藏
        2.2.2 放線菌菌株初篩結果
        2.2.3 化學初篩
        2.2.4 放線菌菌株R6的形態(tài)學特征觀察
        2.2.5 放線菌菌株R6的培養(yǎng)特征觀察
        2.2.6 放線菌菌株R6的生理生化特征測定結果
        2.2.7 放線菌菌株R6的16SrDNA序列分析結果
    2.3 本章小結
第三章 印楝內(nèi)生放線菌菌株R6發(fā)酵條件和發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試材料
        3.1.2 試驗方法
    3.2 結果與分析
        3.2.1 發(fā)酵條件的優(yōu)化結果
        3.2.2 不同發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化結果
    3.3 本章小結
第四章 放線菌菌株R6次生代謝產(chǎn)物的分離純化
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試材料
        4.1.2 試驗方法
    4.2 結果與分析
        4.2.1 放線菌菌株R6粗提物的制備及抑制作用結果
        4.2.2 放線菌菌株R6粗提物的薄層層析檢測結果
        4.2.3 菌株R6粗提物一級硅膠柱層析各餾分純化及抑菌結果
        4.2.4 菌株R6-C1餾分分離純化結果與分析
        4.2.5 菌株R6-C2餾分分離純化結果與分析
    4.3 本章小結
第五章 放線菌菌株R6次生代謝產(chǎn)物的結構鑒定及活性檢測
    5.1 材料與方法
        5.1.1 供試材料
        5.1.2 試驗方法
    5.2 結果與分析
        5.2.1 聚酮類化合物Y1、Y2結構鑒定
        5.2.2 大環(huán)內(nèi)酯類化合物Y3結構鑒定
        5.2.3 單體化合物對植物病原菌抑制作用結果
    5.3 本章小結
第六章 聚酮類化合物Y1對番茄灰霉病的生物活性測定及安全性評價
    6.1 材料與方法
        6.1.1 供試材料
        6.1.2 試驗方法
    6.2 結果與分析
        6.2.1 聚酮類化合物Y1對番茄灰霉病菌菌絲生長的影響
        6.2.2 聚酮類化合物Y1對番茄灰霉病菌孢子萌發(fā)的影響
        6.2.3 聚酮類化合物Y1對番茄灰霉病菌分生孢子產(chǎn)生的影響
        6.2.4 聚酮類化合物Y1對番茄灰霉病菌菌核產(chǎn)量的影響
        6.2.5 聚酮類化合物Y1對番茄灰霉病菌菌絲生物量的影響
        6.2.6 聚酮類化合物Y1對番茄灰霉病活體生物活性的測定
        6.2.7 聚酮類化合物Y1對盆栽番茄的安全性測定結果
    6.3 本章小結
第七章 結論與討論
    7.1 印楝內(nèi)生放線菌篩選及菌株R6的分類鑒定
    7.2 放線菌菌株R6發(fā)酵工藝優(yōu)化
    7.3 放線菌菌株R6中次生代謝產(chǎn)物的分離和鑒定
    7.4 聚酮類化合物Y1對番茄灰霉病的生物活性測定及安全性評價
    7.5 本論文的創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
致謝
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本文編號:3931659

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