稻曲菌素A適配子的篩選及pH可視化核酸探針的構(gòu)建
發(fā)布時間:2024-01-25 18:28
稻曲病作為最主要的水稻真菌病害之一,嚴重威脅作物產(chǎn)量和食品安全。該病害能以真菌孢子的形式通過空氣在田間傳播,因此早期診斷對于稻曲病的有效控制至關重要。稻曲病的發(fā)生、發(fā)展過程中會伴隨真菌毒素Ustiloxins的產(chǎn)生,在發(fā)病早期以UstiloxinA為主。因此,UstiloxinA高靈敏檢測可能實現(xiàn)稻曲病的早期診斷。核酸適配子具有與靶標特異性結(jié)合的能力,已經(jīng)發(fā)展成為一類重要的檢測和診斷工具。SELEX篩選技術則是獲得靶標適配子的主要途徑,利用該方法已經(jīng)成功篩選得到大量包括真菌毒素在內(nèi)的適配子。以適配子為信號檢測元件設計基于滾環(huán)擴增技術(RCA)的可視化傳感器,能通過DNA擴增放大檢測信號,并得到直觀的測試結(jié)果。篩選UstiloxinA的適配子、設計高靈敏的可視化核酸傳感器,對于最終實現(xiàn)稻曲病的早期診斷具有重要意義。我們主要從以下兩個方面進行了系統(tǒng)研究:1.利用高純度的靶標化合物Ustiloxin A,通過基于磁珠的SELEX篩選技術(Mag-SELEX),經(jīng)14輪正篩、負篩與反篩(谷胱甘肽、甘氨酸和Ustiloxin D),我們獲得了與Ustiloxin A作用的motif序列;通過深入...
【文章頁數(shù)】:86 頁
【學位級別】:碩士
本文編號:3885336
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圖1.1?2008-2016年全國稻曲病發(fā)生情況[10]??,、、、
圖1.2稻曲。ǎ幔┡c稻曲菌(b)??
圖1.3稻曲病真菌孢子和植物花粉發(fā)生的季節(jié)變化[12]??
圖1.4?Ustiloxin?A,B,?C,D的化學結(jié)構(gòu)式??
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