微孢子蟲(Microsporidia)是一類專營寄生的的真核微生物,從脊椎動物到無脊椎動物都能被感染。到目前為止,雖然在微孢子蟲孢子發(fā)芽及侵染宿主細胞的研究上已取得了很大的進展,但對于微孢子蟲的發(fā)芽侵染機制仍沒有明確的解釋。家蠶微孢子蟲水通道蛋白(NbAQP)具有傳統(tǒng)水通道蛋白的兩個保守NPA基序(天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸),對稱分布的兩個NPA基序可以在通道中形成狹窄的口徑,形成沙漏的形狀。通常認為這種保守結(jié)構(gòu)決定了底物選擇的特異性。這兩個保守的NPA基序是水通道蛋白水滲透中起關鍵作用的重要的結(jié)構(gòu)域。所以,本研究希望通過對水通道蛋白的功能及其NPA基序的研究,來探究微孢子蟲孢子的發(fā)芽機制,為家蠶微粒子病的防治打下基礎。1.家蠶微孢子蟲水通道蛋白系統(tǒng)發(fā)育使用MEGA6繪制水通道蛋白(包括NbAQP蛋白)的系統(tǒng)發(fā)生樹,分析發(fā)現(xiàn)NbAQP和兔腦炎微孢子蟲水通道蛋白(EcAQP)聚在同一分支上,具有較近的親緣關系,表明這兩種蛋白可能在功能上相似。2.NbAQP及其突變體NbAQP_NPAs表達研究利用間接免疫熒光技術(IFA),經(jīng)多克隆抗體孵育成熟微孢子蟲,在家蠶微孢子蟲...

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【學位級別】：碩士

圖1.1微孢子蟲侵染模式圖(圖片引用文獻[1])

圖2.1家蠶微孢子蟲NbAQP和其他水通道蛋白的進化樹

圖2.3帶有不同酶切位點的家蠶微孢子蟲NbAQP及EGFP的PCR產(chǎn)物M:Marker；泳道1-3:帶有不同酶切位點的NbAQP產(chǎn)物；泳道4-6:帶有不同酶切位點的EGFP

圖2.4重組質(zhì)粒PCR鑒定

本文編號：3882718