小麥?zhǔn)且环N在全球各地大量種植的谷類作物,為全世界超過四分之一的人口提供能量和蛋白質(zhì)。作為一種世界性病害,由病原真菌小麥白粉菌(Blumeria graminis f.sp.tritici)引發(fā)的小麥白粉病在近幾年來有日趨加重之勢。因此探究小麥白粉病抗病機(jī)理有重要意義。小麥白粉菌的侵染始于其分生孢子的萌發(fā),該過程受到植物角質(zhì)層蠟質(zhì)信號的調(diào)控。本研究利用同源克隆法獲得小麥3-酮基-CoA合酶的編碼基因TaKCS6。利用病毒介導(dǎo)的基因沉默技術(shù)在普通小麥葉片中沉默TaKCS6,導(dǎo)致小麥葉片角質(zhì)層蠟質(zhì)減少,同時小麥白粉菌分生孢子萌發(fā)受阻。利用小麥TaKCS6基因的自身啟動子作為誘餌通過酵母單雜交篩選小麥cDNA文庫獲得小麥轉(zhuǎn)錄因子TaKPAB1。酵母單雜交和染色質(zhì)免疫沉淀實驗證實TaKPAB1直接結(jié)合TaKCS6啟動子區(qū)域并激活TaKCS6基因轉(zhuǎn)錄。進(jìn)一步利用TaKPAB1為誘餌通過酵母雙雜交篩選小麥cDNA文庫獲得小麥CHD3蛋白TaCHR729。通過酵母雙雜交與免疫共沉淀實驗證實TaKPAB1和TaCHR729的相互作用。利用病毒介導(dǎo)的基因沉默技術(shù)在小麥葉片中沉默TaKPAB1和TaCHR7...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 小麥白粉病
        1.1.1 小麥白粉病的發(fā)生
        1.1.2 小麥白粉菌的防治
        1.1.3 小麥白粉病的研究進(jìn)展
    1.2 表觀遺傳學(xué)
    1.3 染色體重塑
        1.3.1 染色體重塑及其調(diào)控
        1.3.2 染色體重塑的方式
    1.4 CHD3蛋白的研究進(jìn)展
    1.5 組蛋白乙�；�
    1.6 組蛋白甲基化
    1.7 植物角質(zhì)層
        1.7.1 植物角質(zhì)層的結(jié)構(gòu)組成
        1.7.2 植物角質(zhì)層的生物學(xué)功能
    1.8 研究背景
    1.9 研究內(nèi)容
第二章 實驗材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 植物、真菌
        2.1.2 酵母物質(zhì)
    2.2 實驗方法
        2.2.1 實時定量PCR(q RT-PCR)
        2.2.2 BSMV介導(dǎo)的基因沉默和Bgt感染
        2.2.3 蠟成分分析
        2.2.4 酵母實驗
        2.2.5 GST pull-down實驗
        2.2.6 免疫共沉淀和免疫印跡測定
        2.2.7 染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)
        2.2.8 轉(zhuǎn)錄速率分析
        2.2.9 接觸角的測量
        2.2.10 小麥葉片蠟的處理和載玻片的涂層
第三章 實驗結(jié)果與分析
    3.1 在Ta KCS6 沉默的小麥葉片上,植物表皮蠟沉積和Bgt萌發(fā)受阻
    3.2 轉(zhuǎn)錄因子Ta KPAB1與Ta KCS6 啟動子直接結(jié)合
    3.3 Ta KPAB1 通過物理相互作用募集Ta CHR729至Ta KCS6 啟動子區(qū)域
    3.4 Ta CHR729在Ta KCS6 啟動子上促進(jìn)H3K4me3及Ta KCS6 的轉(zhuǎn)錄
    3.5 Ta CHR729或Ta KPAB1 沉默會降低蠟質(zhì)的積累并減少Bgt萌發(fā)
    3.6 噴施野生型角質(zhì)蠟或超長鏈醛可恢復(fù)白粉菌孢子萌發(fā)
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄
致謝



本文編號：3874235