普通小麥(Triticum aestivum)是世界上總產(chǎn)量和栽培面積最大的三大糧食作物之一。小麥銹病是由擔(dān)子菌亞門真菌引起的真菌性氣傳病害,是一種世界性重要病害。小麥感染銹病后,產(chǎn)量和品質(zhì)均會下降。目前,小麥抗銹病品種的選育已經(jīng)成為減少病害損失的主要途徑,探索利用外源基因提高銹病抗性對小麥生產(chǎn)具有重要意義。本研究利用農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化法將杜仲幾丁質(zhì)酶基因(Eucommia ulmoides chitodextrinase gene,EuCHIT1)遺傳轉(zhuǎn)化小麥品種“貴紫3”、“AVS”、“銘賢169”和“SY95-71”,通過?葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)組織化學(xué)染色和PCR鑒定篩選轉(zhuǎn)基因植株,對轉(zhuǎn)基因植株和野生型的農(nóng)藝性狀、幾丁質(zhì)酶活性、保護(hù)性酶活性、銹病抗性和病程相關(guān)蛋白基因相對表達(dá)量比較分析,取得以下研究結(jié)果:1、農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥遺傳轉(zhuǎn)化本研究利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥莖尖遺傳轉(zhuǎn)化法,將杜仲幾丁質(zhì)酶基因35S:EuCHIT1導(dǎo)入4個(gè)小麥品種(“貴紫3號”、“SY95-71”、“銘賢169”和“AVS”),篩選鑒定出...

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 小麥銹病研究進(jìn)展
        1.1 小麥銹菌生理學(xué)特性
        1.2 小麥條銹病
        1.3 小麥葉銹病
        1.4 小麥銹病的防治措施
    2 小麥轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究進(jìn)展
        2.1 小麥遺傳轉(zhuǎn)化法研究進(jìn)展
        2.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化的分子機(jī)制
        2.3 農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展
    3 植物幾丁質(zhì)酶基因及其在植物抗病基因工程中的應(yīng)用
        3.1 幾丁質(zhì)酶分子特性及分類
        3.2 幾丁質(zhì)酶的酶特異性
        3.3 幾丁質(zhì)酶的生物功能
        3.4 幾丁質(zhì)酶在植物抗真菌病害基因工程中的應(yīng)用
    4 杜仲抗真菌蛋白
    5 本研究的目的和意義
第二章 EuCHIT1基因?qū)π←湹倪z傳轉(zhuǎn)化
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 主要試劑及配方
        1.3 主要儀器及設(shè)備
    2 方法
        2.1 質(zhì)粒提取
        2.2 農(nóng)桿菌感受態(tài)制備及轉(zhuǎn)化
        2.3 農(nóng)桿菌菌液PCR鑒定及菌種保存
        2.4 農(nóng)桿菌的培養(yǎng)及活化
        2.5 受體材料的準(zhǔn)備獲得
        2.6 小麥莖尖遺傳轉(zhuǎn)化法
        2.7 轉(zhuǎn)基因植株篩選鑒定
        2.8 轉(zhuǎn)基因植株農(nóng)藝性狀測定
    3 結(jié)果與分析
        3.1 農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥莖尖遺傳轉(zhuǎn)化及鑒定
        3.2 EuCHIT1基因的表達(dá)對小麥農(nóng)藝性狀的影響
    4 討論
第三章 轉(zhuǎn)EuCHIT1小麥抗病性檢測
    1 材料
        1.1 主要試劑及配方
        1.2 主要儀器及設(shè)備
    2 方法
        2.1 轉(zhuǎn)基因植株幾丁質(zhì)酶活性的測定
        2.2 轉(zhuǎn)基因植株條銹菌接種及抗性鑒定
        2.3 轉(zhuǎn)基因植株保護(hù)性酶活性的測定
        2.4 病程相關(guān)蛋白基因表達(dá)分析
        2.5 轉(zhuǎn)基因植株葉銹菌接種及抗性鑒定
    3 結(jié)果與分析
        3.1 EuCHIT1基因表達(dá)對小麥幾丁質(zhì)酶活性的影響
        3.2 EuCHIT1基因表達(dá)對小麥條銹病抗性的影響
        3.3 EuCHIT1基因表達(dá)對小麥保護(hù)性酶活性的影響
        3.4 EuCHIT1基因表達(dá)對小麥病程相關(guān)蛋白基因表達(dá)的影響
        3.5 EuCHIT1基因表達(dá)對小麥葉銹病抗性的影響
    4 討論
第四章 結(jié)論、創(chuàng)新與展望
    1 研究結(jié)論
    2 研究創(chuàng)新
    3 研究展望
參考文獻(xiàn)
縮略詞
附錄
致謝



本文編號：3872834