RNAi是研究真核生物基因功能的重要方法,也被認(rèn)為是農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)防控的潛在技術(shù)。豌豆蚜Acyrthosiphon pisum是重要農(nóng)業(yè)害蟲(chóng),同時(shí)也是重要的模式生物,除了可以通過(guò)直接刺吸的方式掠取植物營(yíng)養(yǎng),分泌蜜露引起煤煙病,還是多種植物病毒的重要傳播媒介。目前普遍認(rèn)為,蚜蟲(chóng)的RNAi效率存在不穩(wěn)定性。因此,研究針對(duì)蚜蟲(chóng)的dsRNA遞送體系、RNAi效率及dsRNA攝取機(jī)制具有重要的科學(xué)意義。本學(xué)位論文通過(guò)比較研究豌豆蚜的兩種dsRNA遞送體系,多層面地評(píng)價(jià)這兩種體系處理的RNAi效率;檢測(cè)dsRNA處理后siRNA通路關(guān)鍵基因的誘導(dǎo)活性;評(píng)價(jià)豌豆蚜不同種群在兩種技術(shù)體系處理下的RNAi效率,明確點(diǎn)滴法和注射法RNAi效率的差異,更深層次地探索蚜蟲(chóng)體型大小、病毒侵染、血淋巴對(duì)dsRNA降解速率與豌豆蚜種群間RNAi效率的差異間的關(guān)系;最后,利用“RNAi of RNAi”報(bào)告系統(tǒng)揭示Apsid–1與內(nèi)吞作用參與豌豆蚜dsRNA攝取的分子機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:1點(diǎn)滴法RNAi優(yōu)于注射法RNAi通過(guò)研究構(gòu)建注射法RNAi和點(diǎn)滴法RNAi技術(shù)體系,以Aphb為指示基因,分別評(píng)價(jià)兩種技術(shù)體系下ds...

【文章頁(yè)數(shù)】：170 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 昆蟲(chóng)RNAi的機(jī)制及影響其效率的因素
    2 dsRNA的不同遞送方式
    3 細(xì)胞攝取外源dsRNA的機(jī)制研究現(xiàn)狀
    4 蚜蟲(chóng)RNAi的研究現(xiàn)狀
    5 學(xué)位論文研究的目的與意義
    6 研究?jī)?nèi)容與技術(shù)路線(xiàn)
第二章 注射法與點(diǎn)滴法介導(dǎo)的豌豆蚜RNAi效率評(píng)價(jià)
    第一節(jié) 豌豆蚜RNAi的劑量效應(yīng)和時(shí)間效應(yīng)
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    第二節(jié) 豌豆蚜不同靶基因RNAi效率的比較
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    第三節(jié) dsRNA在蚜蟲(chóng)體內(nèi)的熒光定位分析
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    本章討論
第三章 不同dsRNA遞送方式對(duì)豌豆蚜siRNA通路關(guān)鍵基因表達(dá)的影響
    第一節(jié) 豌豆蚜siRNA通路關(guān)鍵基因鑒定及空間表達(dá)分析
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    第二節(jié) 豌豆蚜siRNA通路關(guān)鍵基因的誘導(dǎo)活性
        1 材料與方法
        2 結(jié)果分析
        3 小結(jié)
    本章討論
第四章 豌豆蚜不同種群RNAi效率差異及影響因素分析
    第一節(jié) 豌豆蚜不同種群RNAi效率評(píng)價(jià)
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    第二節(jié) 豌豆蚜RNA病毒的鑒定及在不同種群中的感染頻率
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    第三節(jié) 豌豆蚜不同種群體型參數(shù)測(cè)定
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    第四節(jié) 豌豆蚜DNA/RNA非特異性降解酶基因鑒定
        1 材料與方法
        2.結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    本章討論
第五章 豌豆蚜細(xì)胞攝取外源dsRNA的機(jī)制研究
    第一節(jié) 豌豆蚜Apsid–1 基因與內(nèi)吞作用關(guān)鍵基因的鑒定及時(shí)空表達(dá)模式分析
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    第二節(jié) dsRNA點(diǎn)滴對(duì)Apsid–1 和內(nèi)吞作用相關(guān)基因表達(dá)的影響
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    第三節(jié) 利用RNAi of RNAi報(bào)告系統(tǒng)解析Apsid–1 和內(nèi)吞作用關(guān)鍵基因的功能
        1 材料與方法
        2 結(jié)果與分析
        3 小結(jié)
    本章討論
第六章 主要結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)及研究展望
    1 主要結(jié)論
    2 創(chuàng)新點(diǎn)
    3 研究展望
參考文獻(xiàn)
博士在讀期間發(fā)表的論文及參加科研項(xiàng)目情況
致謝



本文編號(hào)：3865465