不同柑橘品種對潰瘍病的抗性有明顯差異,臍橙高度感病,而寬皮橘類抗性較強。植物內(nèi)生細菌是一類生長在植物體內(nèi)而不引起任何癥狀的微生物類群。大量研究表明,內(nèi)生細菌對植物有多種有益的生物學作用。那么不同柑橘品種中內(nèi)生細菌菌群是否存在差異,是否直接影響潰瘍病的抗感性呢?為此,本研究以溫州蜜柑和紐荷爾臍橙為材料,通過富集柑橘中的內(nèi)生細菌、培養(yǎng)無菌苗以及采用Illumina測序?qū)?感潰瘍病柑橘的內(nèi)生細菌菌群進行相關研究和分析,并初步探究內(nèi)生細菌是否影響柑橘體內(nèi)防御素的產(chǎn)生。本研究取得以下結(jié)果:(1)柑橘內(nèi)生細菌菌群富集方法的篩選。樣品組織經(jīng)過溶液A(1.5%離析酶R-10+1.5%纖維素酶R-10+8.55%蔗糖)、溶液B(1.5%離析酶R-10+1.5%纖維素酶R-10+12.8%甘露醇+0.12%MES+0.36%CaCl₂·2H₂O+0.011%NaH₂PO₄)和溶液C(8.55%蔗糖)處理后,植物葉綠體DNA占宏基因組DNA的比例均有所減少,其中臍橙葉片和蜜柑果皮經(jīng)過溶液A處理最佳,分別為7.34%、7...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 柑橘潰瘍病概述
        1.1.1 柑橘潰瘍病的分布及危害
        1.1.2 柑橘潰瘍病的癥狀、病原及發(fā)病相關因素
        1.1.3 柑橘潰瘍病的防治
    1.2 內(nèi)生細菌概述
        1.2.1 內(nèi)生細菌的概念及生物學作用
        1.2.2 內(nèi)生細菌在植物病害方面的相關研究
        1.2.3 內(nèi)生細菌的富集
    1.3 Illumina高通量測序
        1.3.1 Illumina高通量測序概述
        1.3.2 Illumina高通量測序的技術應用
        1.3.3 Illumina高通量測序技術在微生物檢測中的應用
        1.3.4 Illumina高通量測序信息分析
    1.4 柑橘無菌苗的培育
        1.4.1 外植體的消毒方法
        1.4.2 外植體的激素配比
        1.4.3 嫁接存活率的影響因素
    1.5 植物防御素
    1.6 本研究的意義、內(nèi)容及技術路線
        1.6.1 研究背景及意義
        1.6.2 研究內(nèi)容
        1.6.3 技術路線
第二章 柑橘內(nèi)生細菌菌群富集方法的比較
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 實驗方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 宏基因組DNA提取質(zhì)量檢驗
        2.2.2 富集效果分析
        2.2.3 內(nèi)生細菌菌群分析
        2.2.4 OTU聚類分析
    2.3 結(jié)論與討論
第三章 柑橘內(nèi)生細菌菌群的差異性分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 主要儀器與試劑
        3.1.3 實驗方法
    3.2 結(jié)果分析
        3.2.1 OTU差異性分析
        3.2.2 細菌菌群分布及動態(tài)變化分析
        3.2.3 物種多樣性分析
        3.2.4 物種豐度聚類分析
    3.3 結(jié)論與討論
第四章 柑橘可培養(yǎng)內(nèi)生細菌與寄主品種抗?jié)儾≈g的分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 實驗方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 內(nèi)生細菌的分離
        4.2.2 內(nèi)生細菌對柑橘潰瘍病菌的抑菌效果
        4.2.3 拮抗內(nèi)生細菌對臍橙抗?jié)儾∧芰Φ挠绊?br>    4.3 結(jié)論與討論
第五章 柑橘無菌苗體系的構建
    5.1 材料與方法
        5.1.1 實驗材料
        5.1.2 實驗方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 溫州蜜柑和紐荷爾臍橙外植體消毒方法的篩選
        5.2.2 不同激素配比對外植體萌芽效果的影響
        5.2.3 不同消毒方法對砧木種子萌發(fā)的影響
        5.2.4 微芽嫁接結(jié)果
    5.3 結(jié)論與討論
第六章 拮抗內(nèi)生細菌在宿主抗?jié)儾≈械淖饔贸跆?br>    6.1 實驗與方法
        6.1.1 材料與試劑
        6.1.2 柑橘潰瘍病菌的分離及分子鑒定
        6.1.3 柑橘潰瘍病菌及內(nèi)生細菌的培養(yǎng)
        6.1.4 內(nèi)生細菌對柑橘潰瘍病發(fā)生的影響
        6.1.5 防御素基因PDF1.2表達量的檢測
    6.2 結(jié)果分析
        6.2.1 柑橘潰瘍病菌鑒定
        6.2.2 內(nèi)生細菌對柑橘潰瘍病發(fā)生的影響
        6.2.3 RNA質(zhì)量檢測
    6.3 結(jié)論與討論
參考文獻
致謝
作者簡介



本文編號：3857601