試驗以T₅、T₆代轉(zhuǎn)基因株系JN-hrpZ_Psta-2004-30-384為試驗材料,運用常規(guī)PCR、Southern雜交及qRT-PCR技術(shù)對T₅、T₆代大豆株系進行分子檢測和穩(wěn)定性鑒定,然后通過室內(nèi)人工接灰斑病菌CsJ-1的生理小種對其進行抗病性分析。結(jié)果表明:在轉(zhuǎn)基因株系的T₅、T₆代株系中均檢測到轉(zhuǎn)化的目的基因的啟動子35S、終止子Nos、目的條帶和篩選標(biāo)記Bar,表明目的基因得到了穩(wěn)定的遺傳;Southern雜交結(jié)果顯示目的基因均是以多拷貝的形式整合到大豆基因組中,且整合位點不同; qRT-PCR檢測結(jié)果表明目的基因在植株的根、莖、葉中均有表達,T₅代株系的根、莖、葉相對表達量均值分別為2.871,1.363,7.743,T₆代株系的根、莖、葉相對表達量均值分別為3.577,1.664,8.589,目的基因在葉中的表達量最高,在莖中表達量最低。按照相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)進行抗病性鑒定,結(jié)果顯示...

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 植物材料
        1.1.2 供試質(zhì)粒
        1.1.3 試劑和藥品
        1.1.4 儀器
        1.1.5 病原菌
    1.2 方法
        1.2.1 目的基因的PCR檢測
        1.2.2 目的基因的Southern blot分析
        1.2.3 目的基因的qRT-PCR檢測
        1.2.4 轉(zhuǎn)基因株系的抗病性鑒定
            (1)試驗設(shè)計。
            (2)菌種的培養(yǎng)與保存。
            (3)接菌方法。
2 結(jié)果與分析
    2.1 目的基因的PCR檢測結(jié)果
    2.2 Southern blot檢測結(jié)果
    2.3 qRT-PCR檢測結(jié)果
    2.4 抗病性鑒定結(jié)果
3 討 論



本文編號：3841617