觀賞煙草赤星病菌毒力蛋白基因AlPep1的功能研究
發(fā)布時(shí)間:2023-06-08 20:30
煙草是茄科煙草屬,一年生或有限多年生草本植物,其成熟葉片主要用于卷煙生產(chǎn),具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。煙草原產(chǎn)于南美洲,目前在國內(nèi)廣泛種植,經(jīng)過多年選育,品系較多,其中’紅花大金元’具有適應(yīng)性廣、產(chǎn)出品質(zhì)高等特點(diǎn),其葉片綠色,花序集中,花冠深紅色,花期較長,外觀較其他煙草品種更具有觀賞價(jià)值,可作為觀賞煙草種植。煙草赤星病是煙草成熟時(shí)期發(fā)生的一種由煙草赤星病菌(Alternaria longipes)侵染引起的真菌病害,嚴(yán)重制約煙草栽培,造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。煙草’紅花大金元’對赤星病抗性較弱,易感性強(qiáng),葉片被病菌侵染后,極易形成大面積病斑,嚴(yán)重降低經(jīng)濟(jì)價(jià)值和整體觀賞效果。在前期對煙草赤星病菌致病機(jī)制研究中發(fā)現(xiàn),AlPep1基因缺失型菌株致病能力降低。為了進(jìn)一步探究AlPep1基因在鏈格孢菌(A.longipes)致病機(jī)制中的作用,本研究以該基因?yàn)榍腥朦c(diǎn)進(jìn)行研究,為煙草赤星病菌致病機(jī)制研究及特異性抗菌劑開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。本研究主要結(jié)果如下:1、對A.longipes 野生型菌株C-00和組氨酸激酶AlHK1基因缺失型菌株HK△4轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)AlPep1基因在HK△4中相對表達(dá)量高于野生型...
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
1.1 煙草與煙草品種'紅花大金元'
1.2 煙草赤星病
1.2.1 煙草赤星病的病理性狀
1.2.2 煙草赤星病菌
1.2.3 '紅花大金元'與煙草赤星病菌
1.2.4 煙草赤星病的控制策略
1.3 鏈格孢屬真菌致病機(jī)制研究進(jìn)展
1.3.1 附著胞等細(xì)胞器的機(jī)械穿透作用
1.3.2 降解酶
1.3.3 毒素
1.3.4 鏈格孢真菌致病過程中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制
1.4 天冬氨酸蛋白酶
1.4.1 天冬氨酸蛋白酶的分類
1.4.2 天冬氨酸蛋白酶的作用
1.5 驗(yàn)證基因和蛋白質(zhì)功能常用的試驗(yàn)方法
1.5.1 基因敲除與回補(bǔ)
1.5.2 RNA-seq
1.5.3 亞細(xì)胞定位
1.6 創(chuàng)新點(diǎn)
第二章 AlPep1基因表達(dá)及序列分析
2.1 材料和方法
2.1.1 試驗(yàn)材料
2.1.2 試驗(yàn)方法
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)AlPep1基因表達(dá)水平分析
2.2.2 天冬氨酸蛋白酶氨序列分析
2.3 討論
2.4 本章小結(jié)
第三章 煙草赤星病菌毒力蛋白基因AlPep1功能研究
3.1 材料和方法
3.1.1 試驗(yàn)材料
3.1.2 試驗(yàn)方法
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 目的基因克隆
3.3.2 構(gòu)建回補(bǔ)載體與定位載體
3.3.3 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
3.3.4 含回補(bǔ)載體農(nóng)桿菌AGL-1介導(dǎo)的孢子及原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
3.3.5 含定位載體農(nóng)桿菌AGL-1介導(dǎo)的C-00轉(zhuǎn)化孢子轉(zhuǎn)化子及驗(yàn)證
3.4 討論
3.4.1 構(gòu)建回補(bǔ)載體及敲除載體
3.4.2 含回補(bǔ)載體農(nóng)桿菌介導(dǎo)的AlPep1缺失型菌株轉(zhuǎn)化
3.4.3 含定位載體農(nóng)桿菌介導(dǎo)的野生型菌株C-00轉(zhuǎn)化
3.5 本章小結(jié)
第四章 實(shí)踐意義與展望
4.1 實(shí)踐意義
4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
研究生期間發(fā)表論文
致謝
本文編號:3832440
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
1.1 煙草與煙草品種'紅花大金元'
1.2 煙草赤星病
1.2.1 煙草赤星病的病理性狀
1.2.2 煙草赤星病菌
1.2.3 '紅花大金元'與煙草赤星病菌
1.2.4 煙草赤星病的控制策略
1.3 鏈格孢屬真菌致病機(jī)制研究進(jìn)展
1.3.1 附著胞等細(xì)胞器的機(jī)械穿透作用
1.3.2 降解酶
1.3.3 毒素
1.3.4 鏈格孢真菌致病過程中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制
1.4 天冬氨酸蛋白酶
1.4.1 天冬氨酸蛋白酶的分類
1.4.2 天冬氨酸蛋白酶的作用
1.5 驗(yàn)證基因和蛋白質(zhì)功能常用的試驗(yàn)方法
1.5.1 基因敲除與回補(bǔ)
1.5.2 RNA-seq
1.5.3 亞細(xì)胞定位
1.6 創(chuàng)新點(diǎn)
第二章 AlPep1基因表達(dá)及序列分析
2.1 材料和方法
2.1.1 試驗(yàn)材料
2.1.2 試驗(yàn)方法
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)AlPep1基因表達(dá)水平分析
2.2.2 天冬氨酸蛋白酶氨序列分析
2.3 討論
2.4 本章小結(jié)
第三章 煙草赤星病菌毒力蛋白基因AlPep1功能研究
3.1 材料和方法
3.1.1 試驗(yàn)材料
3.1.2 試驗(yàn)方法
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 目的基因克隆
3.3.2 構(gòu)建回補(bǔ)載體與定位載體
3.3.3 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
3.3.4 含回補(bǔ)載體農(nóng)桿菌AGL-1介導(dǎo)的孢子及原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
3.3.5 含定位載體農(nóng)桿菌AGL-1介導(dǎo)的C-00轉(zhuǎn)化孢子轉(zhuǎn)化子及驗(yàn)證
3.4 討論
3.4.1 構(gòu)建回補(bǔ)載體及敲除載體
3.4.2 含回補(bǔ)載體農(nóng)桿菌介導(dǎo)的AlPep1缺失型菌株轉(zhuǎn)化
3.4.3 含定位載體農(nóng)桿菌介導(dǎo)的野生型菌株C-00轉(zhuǎn)化
3.5 本章小結(jié)
第四章 實(shí)踐意義與展望
4.1 實(shí)踐意義
4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
研究生期間發(fā)表論文
致謝
本文編號:3832440
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