發(fā)布時(shí)間：2023-05-22 05:58

　　本課題組在前期工作中,開展了 Tn5轉(zhuǎn)座子對廣藿香青枯病菌的插入誘變研究。本文以前期獲得的廣藿香青枯菌菌株P(guān)RS-84的16個(gè)突變株為材料,分別進(jìn)行繼代培養(yǎng),每隔5代,觀察突變株繼代過程中菌落形態(tài)的變化,并對突變株Kanr基因進(jìn)行PCR驗(yàn)證,直至100代;利用Southern blot技術(shù)對繼代100代的突變株進(jìn)行鑒定;利用反向PCR技術(shù)對繼代100代突變株Tn5轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)的側(cè)翼序列進(jìn)行擴(kuò)增及序列測定。在此基礎(chǔ)上,對繼代100代突變株(PRS-84-6-13和PRS-84-10-69)進(jìn)行生物學(xué)特性研究,綜合考察廣藿香青枯病菌Tn5轉(zhuǎn)座子插入突變株的遺傳穩(wěn)定性及生物學(xué)特性的變化,為篩選遺傳穩(wěn)定的生防菌株奠定基礎(chǔ)。1.國內(nèi)外評述查閱了與本研究相關(guān)的國內(nèi)外文獻(xiàn),從種質(zhì)資源、栽培育種和病害防治三個(gè)方面論述了廣藿香的研究現(xiàn)狀;從青枯病病原菌的鑒定、青枯菌的致病機(jī)制及青枯病的防治方法概述了青枯病的研究現(xiàn)狀;從轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)及插入機(jī)制、轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)的鑒定方法、轉(zhuǎn)座子插入的遺傳穩(wěn)定性以及轉(zhuǎn)座子插入誘變的應(yīng)用方面綜述Tn5轉(zhuǎn)座子的相關(guān)研究現(xiàn)狀。2.繼代突變株的分子鑒定以廣藿香青枯菌菌株P(guān)RS-84...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第1章 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀和評述
    1.1 廣藿香的研究進(jìn)展
        1.1.1 種質(zhì)資源與鑒定
        1.1.2 栽培和育種
        1.1.3 病害防治
    1.2 植物青枯病的研究進(jìn)展
        1.2.1 青枯病病原菌的鑒定
        1.2.2 青枯菌的致病機(jī)制
        1.2.3 青枯病的防治研究
    1.3 Tn5轉(zhuǎn)座子插入誘變技術(shù)研究進(jìn)展
        1.3.1 Tn5轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)
        1.3.2 Tn5轉(zhuǎn)座子的誘變機(jī)制
        1.3.3 轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)的鑒定方法
    1.4 轉(zhuǎn)座子插入突變株的穩(wěn)定性研究
        1.4.1 生長特性研究
        1.4.2 生化特性研究
        1.4.3 基因水平研究
    1.5 轉(zhuǎn)座子插入突變技術(shù)的應(yīng)用
        1.5.1 基因功能的分析
        1.5.2 基因表達(dá)水平的研究
        1.5.3 無致病力菌株的篩選
第2章 繼代突變株的分子鑒定
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 繼代前后突變株kan^r基因的PCR驗(yàn)證
        2.2.2 探針標(biāo)記效率的檢測
        2.2.3 繼代前后突變株的Southern blot分析
    2.3 討論
第3章 繼代前后突變株Tn5轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)的序列測定及分析
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 繼代前后突變株Tn5轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)側(cè)翼序列的獲得及序列測定
        3.2.2 繼代前后突變株轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)側(cè)翼序列的比對
    3.3 討論
第4章 繼代突變株的生物學(xué)特性研究
    4.1 材料和方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 繼代前后突變株菌落形態(tài)觀察
        4.2.2 繼代前后突變株生長曲線的繪制
    4.3 討論
結(jié)論與展望
    結(jié)論
    展望
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄1 繼代前后突變株的Tn5轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)側(cè)翼序列及比對結(jié)果
    附錄2 繼代前后突變株在TTC平板上的菌落形態(tài)
    附錄3 英文縮略詞表
    附錄4 Biospin細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒說明書
    附錄5 Biospin膠回收試劑盒說明書
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
統(tǒng)計(jì)學(xué)審核證明



本文編號：3822144