發(fā)布時間：2023-05-22 05:58

　　本課題組在前期工作中,開展了 Tn5轉座子對廣藿香青枯病菌的插入誘變研究。本文以前期獲得的廣藿香青枯菌菌株PRS-84的16個突變株為材料,分別進行繼代培養(yǎng),每隔5代,觀察突變株繼代過程中菌落形態(tài)的變化,并對突變株Kanr基因進行PCR驗證,直至100代;利用Southern blot技術對繼代100代的突變株進行鑒定;利用反向PCR技術對繼代100代突變株Tn5轉座子插入位點的側翼序列進行擴增及序列測定。在此基礎上,對繼代100代突變株(PRS-84-6-13和PRS-84-10-69)進行生物學特性研究,綜合考察廣藿香青枯病菌Tn5轉座子插入突變株的遺傳穩(wěn)定性及生物學特性的變化,為篩選遺傳穩(wěn)定的生防菌株奠定基礎。1.國內外評述查閱了與本研究相關的國內外文獻,從種質資源、栽培育種和病害防治三個方面論述了廣藿香的研究現狀;從青枯病病原菌的鑒定、青枯菌的致病機制及青枯病的防治方法概述了青枯病的研究現狀;從轉座子的結構及插入機制、轉座子插入位點的鑒定方法、轉座子插入的遺傳穩(wěn)定性以及轉座子插入誘變的應用方面綜述Tn5轉座子的相關研究現狀。2.繼代突變株的分子鑒定以廣藿香青枯菌菌株PRS-84...

【文章頁數】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第1章 國內外研究現狀和評述
    1.1 廣藿香的研究進展
        1.1.1 種質資源與鑒定
        1.1.2 栽培和育種
        1.1.3 病害防治
    1.2 植物青枯病的研究進展
        1.2.1 青枯病病原菌的鑒定
        1.2.2 青枯菌的致病機制
        1.2.3 青枯病的防治研究
    1.3 Tn5轉座子插入誘變技術研究進展
        1.3.1 Tn5轉座子的結構
        1.3.2 Tn5轉座子的誘變機制
        1.3.3 轉座子插入位點的鑒定方法
    1.4 轉座子插入突變株的穩(wěn)定性研究
        1.4.1 生長特性研究
        1.4.2 生化特性研究
        1.4.3 基因水平研究
    1.5 轉座子插入突變技術的應用
        1.5.1 基因功能的分析
        1.5.2 基因表達水平的研究
        1.5.3 無致病力菌株的篩選
第2章 繼代突變株的分子鑒定
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結果與分析
        2.2.1 繼代前后突變株kan^r基因的PCR驗證
        2.2.2 探針標記效率的檢測
        2.2.3 繼代前后突變株的Southern blot分析
    2.3 討論
第3章 繼代前后突變株Tn5轉座子插入位點的序列測定及分析
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結果與分析
        3.2.1 繼代前后突變株Tn5轉座子插入位點側翼序列的獲得及序列測定
        3.2.2 繼代前后突變株轉座子插入位點側翼序列的比對
    3.3 討論
第4章 繼代突變株的生物學特性研究
    4.1 材料和方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結果與分析
        4.2.1 繼代前后突變株菌落形態(tài)觀察
        4.2.2 繼代前后突變株生長曲線的繪制
    4.3 討論
結論與展望
    結論
    展望
參考文獻
附錄
    附錄1 繼代前后突變株的Tn5轉座子插入位點側翼序列及比對結果
    附錄2 繼代前后突變株在TTC平板上的菌落形態(tài)
    附錄3 英文縮略詞表
    附錄4 Biospin細菌基因組DNA提取試劑盒說明書
    附錄5 Biospin膠回收試劑盒說明書
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
統(tǒng)計學審核證明



本文編號：3822144