稻瘟病是影響水稻生產(chǎn)的三大水稻病害之一,利用抗病基因?qū)Σ『M行控制已經(jīng)成為最主要且最經(jīng)濟環(huán)保的解決途徑。因此,挖掘并利用新的抗病基因?qū)λ居N至關重要。前期本研究室在水稻骨干品種粵晶絲苗2號的8號染色體上定位了稻瘟病隱性抗病基因pi55。為了對pi55進行克隆以及功能驗證,本研究開展以下幾方面的工作,獲得的主要結果如下:1、pi55的精細定位及物理圖譜的構建在前期的研究中,已經(jīng)將pi55界定在標記H2^H66之間1.9 cM的遺傳區(qū)域內(nèi),二者間的物理距離約為152 kb。為了對其進行精細定位,本研究在此區(qū)域內(nèi)開發(fā)了一系列分子標記,并進行連鎖分析,最終將pi55定位于L11-10^Y12之間約20 kb區(qū)域。將與目的基因緊密連鎖的分子標記錨定在參考品種日本晴和Zhenshan 97上,構建了pi55的電子物理圖譜。2、候選基因的預測及序列分析利用基因預測軟件對參考品種日本晴及ZS97進行候選基因的預測。結果表明,在目標區(qū)域內(nèi)共有5個候選基因分別為pi55-1、pi55-2、pi55-3、pi55-4、pi55-5。隨后對抗病親本R9-1及感病親本Q...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
縮寫詞及其英漢對照
1 前言
    1.1 稻瘟病抗病基因的研究意義
    1.2 稻瘟病抗病基因的定位與克隆
        1.2.1 稻瘟病抗病基因的定位研究
        1.2.2 稻瘟病抗病基因的克隆
    1.3 稻瘟病隱性抗病基因的研究現(xiàn)狀
    1.4 本研究的目的及主要內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 植物材料與菌物材料
        2.1.2 菌株和載體
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器設備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 植物DNA的抽提
        2.2.2 分子標記的開發(fā)及利用
        2.2.3 連鎖分析及物理圖譜的構建
        2.2.4 候選基因預測及序列分析
        2.2.5 候選基因的克隆
        2.2.6 候選基因的遺傳轉(zhuǎn)化
3 結果
    3.1 隱性抗病基因pi55的精細定位
        3.1.1 隱性抗病基因pi55的精細定位
        3.1.2 pi55的物理圖譜的構建
    3.2 候選基因的預測及序列分析
        3.2.1 候選基因的預測
        3.2.2 候選基因的序列分析
    3.3 候選基因的克隆
        3.3.1 候選基因功能獲得性載體的構建
        3.3.2 候選基因功能喪失性載體的構建
    3.4 候選基因的功能獲得性、缺失遺傳轉(zhuǎn)化
        3.4.1 轉(zhuǎn)化質(zhì)粒在農(nóng)桿菌中的穩(wěn)定性鑒定
        3.4.2 候選基因的遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因植株的獲得
        3.4.3 T0代轉(zhuǎn)化植物的鑒定
4 討論
    4.1 稻瘟病抗病基因的快速定位策略
    4.2 稻瘟病抗病基因的克隆與抗病基因的分類
    4.3 隱性稻瘟病抗病基因pi55的功能預測及應用
    4.4 下一步研究的設想
致謝
參考文獻
附錄A
附錄B 本研究所構建載體總表



本文編號：3797168