【目的】植物病原細(xì)菌通過Ⅲ型分泌系統(tǒng)(type Ⅲ secretion system,T3SS)將Ⅲ型效應(yīng)物(type Ⅲ secreted effectors,T3SEs)分泌轉(zhuǎn)運(yùn)到宿主細(xì)胞的不同位點(diǎn)上,進(jìn)而行使不同的致病功能。本研究旨在確定Xcc 8004 Ⅲ型效應(yīng)物中分子量最大的蛋白XopXccR1在植物中的亞細(xì)胞定位�！痉椒ā坷蒙镄畔W(xué)方法分析XopXccR1的跨膜信息。通過同源重組方法將XopXccR1全長(zhǎng)、N端(1–1220aa)和C端(1221–2030 aa)分別克隆到植物表達(dá)載體pCAMBIA-2300-35S::EGFP上,利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的瞬時(shí)表達(dá)浸染本生煙,通過激光共聚焦顯微鏡觀察亞細(xì)胞定位結(jié)果�！窘Y(jié)果】XopXccR1全長(zhǎng)和N端定位在本生煙細(xì)胞膜上,而C端定位在細(xì)胞質(zhì)中。【結(jié)論】XopXccR1的N端與C端可能分別存在定位信號(hào),N端信號(hào)主導(dǎo)全長(zhǎng)蛋白的最終定位。

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 植物材料：
        1.1.2 菌株、質(zhì)粒和培養(yǎng)條件：
        1.1.3 引物與試劑：
    1.2 生物信息學(xué)分析
    1.3 Xcc 8004總DNA提取
    1.4 同源重組
    1.5 重組載體轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)桿菌及鑒定
    1.6 根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的瞬時(shí)表達(dá)轉(zhuǎn)化本生煙
    1.7 轉(zhuǎn)化煙草的激光掃描共聚焦顯微鏡的觀察
2 結(jié)果和分析
    2.1 生物信息學(xué)分析顯示Xop Xcc R1可能是膜蛋白
    2.2 效應(yīng)物蛋白亞細(xì)胞定位表達(dá)載體的構(gòu)建與驗(yàn)證
    2.3 根癌農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化和驗(yàn)證
    2.4 Xop Xcc R1全長(zhǎng)定位與分段蛋白定位
3 結(jié)論和討論



本文編號(hào)：3783218