轉(zhuǎn)基因水稻所表達(dá)的Bt(Bacillus thuringiensis)蛋白對(duì)靶標(biāo)害蟲(chóng)表現(xiàn)出高度抗性的同時(shí),其對(duì)非靶標(biāo)生物的安全性也受到公眾的廣泛關(guān)注。在稻田生態(tài)系統(tǒng)中,轉(zhuǎn)Bt基因水稻所表達(dá)的Bt蛋白可能通過(guò)食物鏈從轉(zhuǎn)基因水稻傳遞到植食性昆蟲(chóng),再?gòu)闹彩承岳ハx(chóng)傳遞給寄生性天敵�；谵D(zhuǎn)Bt基因水稻—靶標(biāo)害蟲(chóng)—寄生性天敵三級(jí)營(yíng)養(yǎng)關(guān)系來(lái)評(píng)價(jià)Bt蛋白對(duì)靶標(biāo)害蟲(chóng)安全性時(shí),由于靶標(biāo)害蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育受到Bt蛋白的負(fù)面影響,可能導(dǎo)致寄生蜂寄主質(zhì)量下降,最終導(dǎo)致寄生蜂發(fā)育也受到不利影響,即“寄主質(zhì)量介導(dǎo)效應(yīng)”。由于“寄主質(zhì)量介導(dǎo)效應(yīng)”的存在降低了寄生性天敵安全性評(píng)價(jià)的準(zhǔn)確性。利用抗Bt蛋白的靶標(biāo)害蟲(chóng)抗性品系可以規(guī)避這種效應(yīng)產(chǎn)生的不良影響,但獲得抗性品系存在周期長(zhǎng)、費(fèi)時(shí)費(fèi)力、效率低等問(wèn)題。麥蛾柔繭蜂是印度谷螟的主要寄生性天敵,在轉(zhuǎn)基因水稻儲(chǔ)存時(shí),Bt蛋白可能通過(guò)印度谷螟的血淋巴傳遞給麥蛾柔繭蜂。因此,需要評(píng)價(jià)Bt蛋白對(duì)麥蛾柔繭蜂的安全性。本研究通過(guò)顯微注射的方法將Cry2Aa蛋白注射到印度谷螟的血淋巴中,將印度谷螟的血淋巴作為載體把Cry2Aa蛋白傳遞給麥蛾柔繭蜂。從而規(guī)避了“寄主質(zhì)量介導(dǎo)效應(yīng)”,準(zhǔn)確評(píng)價(jià)Cry...

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1.前言
    1.1 轉(zhuǎn)基因作物的發(fā)展歷程及現(xiàn)狀
    1.2 轉(zhuǎn)基因水稻現(xiàn)狀
        1.2.1 轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)水稻
        1.2.2 轉(zhuǎn)其他外源基因的抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因水稻
    1.3 轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)作物對(duì)非靶標(biāo)生物的安全性評(píng)價(jià)
        1.3.1 非靶標(biāo)節(jié)肢動(dòng)物指示生物的選擇
        1.3.2 分段評(píng)價(jià)體系和程序
    1.4 轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)非靶標(biāo)生物的影響
        1.4.1 轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)植食性昆蟲(chóng)的影響
        1.4.2 轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)水稻對(duì)捕食性天敵的影響
        1.4.3 轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)水稻對(duì)寄生性天敵的影響
        1.4.4 轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)水稻對(duì)其他昆蟲(chóng)的影響
    1.5 寄主質(zhì)量介導(dǎo)效應(yīng)
    1.6 麥蛾柔繭蜂概況
    1.7 Meta分析(Meta-analysis)
    1.8 研究目的與意義
2.材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 供試水稻
        2.1.2 供試?yán)ハx(chóng)
        2.1.3 供試蛋白以及主要試劑
        2.1.4 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 Bt蛋白的ELISA檢測(cè)
        2.2.2 購(gòu)買(mǎi)的Cry2Aa蛋白殺蟲(chóng)活性檢測(cè)
        2.2.3 取食T2A-1轉(zhuǎn)基因水稻后印度谷螟血淋巴中Bt蛋白的濃度
        2.2.4 Cry2Aa蛋白注射量及注射體積的確定
        2.2.5 注射Cry2Aa蛋白后在印度谷螟血淋巴中的分布情況
        2.2.6 寄主不同狀態(tài)下Cry2Aa蛋白在印度谷螟幼蟲(chóng)血淋巴中的降解動(dòng)態(tài)
        2.2.7 不同處理下Cry2Aa蛋白的Western Blot分析
        2.2.8 Cry2Aa蛋白在印度谷螟血淋巴中的生物活性
        2.2.9 高劑量Cry2Aa蛋白對(duì)麥蛾柔繭蜂重要生命表參數(shù)的影響
        2.2.10 高劑量的Cry2Aa蛋白對(duì)麥蛾柔繭蜂酶活的影響
        2.2.11 Cry2Aa蛋白在印度谷螟血淋巴-麥蛾柔繭蜂體內(nèi)的傳遞規(guī)律
        2.2.12 Bt蛋白對(duì)靶標(biāo)害蟲(chóng)寄生性天敵安全性的Meta分析
    2.3 數(shù)據(jù)處理
3.結(jié)果與分析
    3.1 購(gòu)買(mǎi)的Cry2Aa蛋白殺蟲(chóng)活性檢測(cè)
    3.2 取食T2A-1轉(zhuǎn)基因水稻后印度谷螟血淋巴中Bt蛋白的濃度
    3.3 顯微注射最佳體積的確定
    3.4 注射Cry2Aa蛋白后在印度谷螟血淋巴中的分布情況
    3.5 寄主不同狀態(tài)下Cry2Aa蛋白在印度谷螟幼蟲(chóng)血淋巴中的降解動(dòng)態(tài)
    3.6 不同處理下Cry2Aa蛋白的Western Blot分析
    3.7 Cry2Aa蛋白在印度谷螟血淋巴中的生物活性
    3.8 高劑量的Cry2Aa蛋白對(duì)麥蛾柔繭蜂重要生命表參數(shù)的影響
    3.9 高劑量的Cry2Aa蛋白對(duì)麥蛾柔繭蜂酶活的影響
    3.10 Cry2Aa蛋白在印度谷螟血淋巴-麥蛾柔繭蜂體內(nèi)的傳遞規(guī)律
    3.11 Bt蛋白對(duì)靶標(biāo)害蟲(chóng)寄生性天敵安全性的Meta分析
4.討論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào)：3777301