麥長管蚜識(shí)別報(bào)警信息素EBF的嗅覺蛋白(SaveOBP3/7/9)表達(dá)定位
發(fā)布時(shí)間:2023-04-01 06:37
麥長管蚜Sitobion avenae Fabricius是小麥植株上重要的刺吸式害蟲。嗅覺系統(tǒng)在蚜蟲對(duì)周圍環(huán)境的感知、寄主植物定位及產(chǎn)卵地選擇等過程中發(fā)揮重要作用。外界氣味分子穿過觸角感器孔道進(jìn)入淋巴液與氣味結(jié)合蛋白(OBPs)結(jié)合,進(jìn)而開啟下游的信號(hào)傳遞。(E)-β-farnesene(EBF)是麥長管蚜等多種蚜蟲報(bào)警信息素的主要活性成分,EBF的釋放會(huì)引起周圍蚜蟲的忌避行為。與EBF強(qiáng)烈結(jié)合的麥長管蚜氣味結(jié)合蛋白主要是Save OBP3/7/9。目前,上述蛋白在蚜蟲觸角上的表達(dá)位置(感器)尚不清楚。本研究利用掃描電鏡對(duì)麥長管蚜觸角感器超顯微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了細(xì)致觀察;利用whole-mount原位雜交技術(shù)結(jié)合熒光定量技術(shù)觀察了Save OBP3/7/9在麥長管蚜羽化后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)定位和表達(dá)差異;實(shí)現(xiàn)了對(duì)Save OBP3/7/9在麥長管蚜成蚜觸角上亞細(xì)胞水平的表達(dá)定位。取得的主要結(jié)果如下:1.麥長管蚜成蚜觸角感器發(fā)育過程的超顯微結(jié)構(gòu)觀察和Save OBP3/7/9在羽化不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)的表達(dá)差異。結(jié)果如下:1)成蚜觸角感器包括原生感覺圈、次生感覺圈、Ⅰ型和Ⅱ型毛形感器、鐘形感器和腔錐狀感...
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
1.1 麥長管蚜
1.1.1 麥長管蚜的分布與危害
1.1.2 麥長管蚜的防治方法
1.2 昆蟲觸角感器
1.2.1 昆蟲觸角感器的感受機(jī)制
1.2.2 昆蟲觸角感器的類型及功能
1.2.3 蚜蟲觸角感器的研究
1.3 昆蟲OBPs的研究進(jìn)展
1.3.1 OBPs的種類
1.3.2 OBPs的表達(dá)分布
1.3.3 OBPs的功能研究
1.4 熒光原位雜交在OBPs研究中的有關(guān)應(yīng)用
1.5 研究目的和意義
1.6 研究內(nèi)容
第二章 麥長管蚜SaveOBP3/7/9 在觸角羽化后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量差異
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 供試蟲源
2.1.2 主要試劑和儀器
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 麥長管蚜觸角感器的顯微結(jié)構(gòu)觀察
2.2.2 熒光定量PCR分析
2.3 結(jié)果
2.3.1 麥長管蚜觸角感器觀察
2.3.2 SaveOBP3/7/9 不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)熒光定量結(jié)果
2.4 討論
第三章 麥長管蚜SaveOBP3/7/9 在觸角感器中的分布表達(dá)
3.1 材料與方法
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要儀器設(shè)備
3.1.4 總RNA樣本的提取
3.1.5 SaveOBP3/7/9 基因的克隆
3.1.6 探針合成
3.1.7 試劑制備
3.1.8 探針制備
3.1.9 原位雜交
3.2 結(jié)果
3.2.1 RNA質(zhì)量檢測
3.2.2 cDNA片段克隆
3.2.3 菌落PCR
3.2.4 序列分析
3.2.5 探針合成
3.2.6 SaveOBP3/7/9 在成蚜觸角中的表達(dá)定位
3.3 討論
第四章 全文總結(jié)
4.1 主要結(jié)論
4.2 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
本文編號(hào):3776634
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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摘要
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英文縮略表
第一章 引言
1.1 麥長管蚜
1.1.1 麥長管蚜的分布與危害
1.1.2 麥長管蚜的防治方法
1.2 昆蟲觸角感器
1.2.1 昆蟲觸角感器的感受機(jī)制
1.2.2 昆蟲觸角感器的類型及功能
1.2.3 蚜蟲觸角感器的研究
1.3 昆蟲OBPs的研究進(jìn)展
1.3.1 OBPs的種類
1.3.2 OBPs的表達(dá)分布
1.3.3 OBPs的功能研究
1.4 熒光原位雜交在OBPs研究中的有關(guān)應(yīng)用
1.5 研究目的和意義
1.6 研究內(nèi)容
第二章 麥長管蚜SaveOBP3/7/9 在觸角羽化后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量差異
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 供試蟲源
2.1.2 主要試劑和儀器
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 麥長管蚜觸角感器的顯微結(jié)構(gòu)觀察
2.2.2 熒光定量PCR分析
2.3 結(jié)果
2.3.1 麥長管蚜觸角感器觀察
2.3.2 SaveOBP3/7/9 不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)熒光定量結(jié)果
2.4 討論
第三章 麥長管蚜SaveOBP3/7/9 在觸角感器中的分布表達(dá)
3.1 材料與方法
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要儀器設(shè)備
3.1.4 總RNA樣本的提取
3.1.5 SaveOBP3/7/9 基因的克隆
3.1.6 探針合成
3.1.7 試劑制備
3.1.8 探針制備
3.1.9 原位雜交
3.2 結(jié)果
3.2.1 RNA質(zhì)量檢測
3.2.2 cDNA片段克隆
3.2.3 菌落PCR
3.2.4 序列分析
3.2.5 探針合成
3.2.6 SaveOBP3/7/9 在成蚜觸角中的表達(dá)定位
3.3 討論
第四章 全文總結(jié)
4.1 主要結(jié)論
4.2 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
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本文編號(hào):3776634
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