盾殼霉(Coniothyrium minitans)作為防治菌核病的生物制劑已經(jīng)被大量研究。本論文主要研究盾殼霉與田間兩種滅生型除草劑草甘膦和草銨膦共同施用問題,并針對試驗過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象,主要研究了除草劑草銨膦的靶標(biāo)基因在盾殼霉生長過程中的功能。試驗結(jié)果如下:1.盾殼霉對兩種除草劑敏感性評價:草甘膦和草銨膦對盾殼霉菌絲均有較強抑制作用,EC₅₀分別為714.3μg/mL和574.5μg/mL;對孢子抑制作用相對較弱,草甘膦EC₅₀為1019.8μg/mL,而草銨膦對盾殼霉孢子的萌發(fā)基本沒有抑制作用;對核盤菌菌絲均有較強的抑制作用,EC₅₀分別為1695.8μg/mL和223.5μg/mL,草銨膦較草甘膦抑制作用更為顯著;兩種除草劑存在下會延遲盾殼霉孢子的萌發(fā)時間,但是對盾殼霉孢子沒有殺滅作用;兩種除草劑存在下,會影響盾殼霉對核盤菌菌核的寄生,草銨膦較草甘膦抑制作用更為顯著。但結(jié)合兩種除草劑的性質(zhì),草銨膦在田間能快速被降解且不能殺滅孢子,草甘膦也不能殺滅孢子且在較高濃度下仍對盾殼霉寄生核盤菌菌核沒有太大影響。所以,在田間...

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 菌核病的研究進(jìn)展
        1.1.1 菌核病的危害
        1.1.2 菌核病的防治
    1.2 盾殼霉的研究
        1.2.1 盾殼霉的生物學(xué)特性和生防機制
        1.2.2 盾殼霉生物制劑及對菌核病的防治
        1.2.3 盾殼霉對除草劑敏感性
    1.3 草甘膦與草銨膦概述
        1.3.1 草甘膦概述
        1.3.2 草銨膦綜述
    1.4 研究目的及意義
第二章 盾殼霉對兩種除草劑的敏感性評價
    2.1 試驗材料
        2.1.1 供試菌株和試劑
        2.1.2 盾殼霉分生孢子、除草劑母液的配制
    2.2 試驗方法
        2.2.1 草甘膦和草銨膦原藥對盾殼霉菌絲生長和分生孢子萌發(fā)的影響
        2.2.2 草甘膦和草銨膦原藥對核盤菌1980菌絲生長的影響
        2.2.3 草甘膦和草銨膦商品制劑對盾殼霉孢子致死或抑制的研究
        2.2.4 草甘膦和草銨膦商品制劑對盾殼霉寄生核盤菌菌核的影響
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 草甘膦和草銨膦原藥對盾殼霉菌絲孢子的影響
        2.3.2 草甘膦和草銨膦原藥對核盤菌菌絲生長的影響
        2.3.3 草甘膦和草銨膦商品藥劑對盾殼霉孢子萌發(fā)的影響
        2.3.4 草甘膦和草銨膦商品制劑對盾殼霉寄生核盤菌菌核的影響
    2.4 小結(jié)與討論
第三章 盾殼霉谷氨酰胺合成酶基因功能研究
    3.1 試驗材料
        3.1.1 菌株
        3.1.2 載體
        3.1.3 培養(yǎng)基
        3.1.4 試劑
        3.1.5 生物酶
        3.1.6 主要儀器
    3.2 試驗方法
        3.2.1 盾殼霉谷氨酰胺合成酶基因的獲得
        3.2.2 總RNA的提取
        3.2.3 cDNA的合成
        3.2.4 盾殼霉谷氨酰胺合成酶基因的末端克隆
        3.2.5 盾殼霉谷氨酰胺合成酶基因在盾殼霉中表達(dá)動態(tài)
        3.2.6 同源重組方法敲除盾殼霉中GlnA1和GlnA2基因
        3.2.7 GlnA1互補轉(zhuǎn)化子的獲得與驗證
        3.2.8 不同濃度谷氨酰胺下GlnA1敲除轉(zhuǎn)化子的菌落形態(tài)、生長及產(chǎn)孢統(tǒng)計
        3.2.9 其他物質(zhì)對GlnA1基因敲除轉(zhuǎn)化子生長恢復(fù)情況
        3.2.10 GlnA1敲除轉(zhuǎn)化子孢子在PDA中的萌發(fā)率
        3.2.11 GlnA1敲除轉(zhuǎn)化子寄生核盤菌能力
        3.2.12 GlnA1敲除轉(zhuǎn)化子對草銨膦的敏感性研究
        3.2.13 GlnA1互補轉(zhuǎn)化子的生物學(xué)性狀統(tǒng)計
        3.2.14 GlnA1轉(zhuǎn)化子中ROS含量
        3.2.15 GlnA2敲除轉(zhuǎn)化子的生物學(xué)特性分析
        3.2.16 GlnA2敲除轉(zhuǎn)化子對草銨膦的敏感性研究
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 盾殼霉在含草銨膦的PDA平板上生長異常
        3.3.2 盾殼霉谷氨酰胺合成酶基因的全長克隆與分析
        3.3.3 盾殼霉谷氨酰胺合成酶基因的表達(dá)動態(tài)
        3.3.4 GlnA1和GlnA2敲除轉(zhuǎn)化子的獲得與驗證
        3.3.5 GlnA1互補轉(zhuǎn)化子PCR驗證
        3.3.6 不同濃度Gln下GlnA1敲除轉(zhuǎn)化子的菌落形態(tài)、生長及產(chǎn)孢量
        3.3.7 僅谷氨酰胺可以恢復(fù)GlnA1敲除轉(zhuǎn)化子生長
        3.3.8 GlnA1敲除轉(zhuǎn)化子孢子在PDA中的萌發(fā)率
        3.3.9 GlnA1敲除轉(zhuǎn)化子寄生核盤菌能力
        3.3.10 GlnA1敲除轉(zhuǎn)化子對草銨膦不敏感
        3.3.11 GlnA1互補轉(zhuǎn)化子生物學(xué)性狀測定
        3.3.12 GlnA1轉(zhuǎn)化子中ROS含量
        3.3.13 GlnA2敲除轉(zhuǎn)化子生物學(xué)特性測定
        3.3.14 GlnA2敲除轉(zhuǎn)化子對草銨膦敏感
    3.4 小結(jié)與討論
第四章 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
附錄一
附錄二
致謝



本文編號：3739710