二斑葉螨Tetranychus urticae Koch是一種世界性的重要農(nóng)業(yè)害螨,其寄主范圍廣泛,可以危害至少1100種作物,常見的寄主植物包括蔬菜、果樹、花卉、棉花、玉米等。二斑葉螨常以成螨和幼若螨群集在植物葉背進行為害,通過口針穿破植物葉片的表皮細胞來刺吸植物汁液,最終致使植物葉片干枯、脫落,從而影響作物的質(zhì)量和產(chǎn)量。化學藥劑是目前防控二斑葉螨的主要措施之一,但生產(chǎn)上常存在施藥隨意、不科學不合理的選擇施藥、或單一使用某類化學藥劑等問題,由此導致二斑葉螨對多種化學藥劑均產(chǎn)生了不同程度的抗藥性。靶標抗性是葉螨抗藥性最重要的抗性機制之一,近年來已有研究報道葉螨抗性靶標基因的點突變可導致葉螨產(chǎn)生抗藥性。在本研究中,首先采用優(yōu)化的瓊脂浸葉法監(jiān)測了我國二斑葉螨不同田間種群對12種殺蟲殺螨劑的抗性水平,明確了不同地區(qū)田間二斑葉螨的抗藥性現(xiàn)狀;針對二斑葉螨的阿維菌素抗性田間種群,建立了二斑葉螨對阿維菌素抗性相關(guān)的酶切擴增多態(tài)性序列(Cleaved Amplified Polymorphic Sequence,簡稱CAPS)和環(huán)介導等溫擴增法(Loop-Mediated Isothermal Am...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 二斑葉螨基本概況
        1.1.1 二斑葉螨基礎(chǔ)生物學
        1.1.2 二斑葉螨的發(fā)生危害
        1.1.3 二斑葉螨防控措施
    1.2 二斑葉螨抗藥性現(xiàn)狀及抗性機制
        1.2.1 二斑葉螨抗藥性現(xiàn)狀
        1.2.2 二斑葉螨抗藥性機制
    1.3 二斑葉螨的抗藥性監(jiān)測技術(shù)研究
    1.4 二斑葉螨抗藥性分子檢測技術(shù)研究
        1.4.1 等位基因特異性PCR技術(shù)(PASA)
        1.4.2 酶切擴增多態(tài)性序列標記技術(shù)(CAPS)
        1.4.3 TaqMan分子檢測技術(shù)
        1.4.4 環(huán)介導等溫擴增技術(shù)(LAMP)
        1.4.5 實時熒光定量PCR法
    1.5 本研究的試驗內(nèi)容、目的和意義
        1.5.1 本研究的試驗內(nèi)容
        1.5.2 本研究的目的和意義
第二章 二斑葉螨田間種群的抗藥性監(jiān)測
    2.1 實驗材料
        2.1.1 供試葉螨
        2.1.2 實驗藥劑
        2.1.3 實驗儀器
    2.2 實驗方法
    2.3 數(shù)據(jù)分析
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 二斑葉螨雌成螨對12 種殺蟲殺螨劑的敏感基線
        2.4.2 二斑葉螨7 個田間種群對12 種殺蟲殺螨劑的抗藥性監(jiān)測
    2.5 討論
第三章 二斑葉螨抗阿維菌素相關(guān)基因的快速檢測技術(shù)
    3.1 實驗材料
        3.1.1 供試葉螨
        3.1.2 試劑和儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 二斑葉螨GluCl3 基因的PCR擴增
        3.2.2 二斑葉螨CAPS標記方法的建立
        3.2.3 二斑葉螨LAMP檢測技術(shù)的建立
        3.2.4 田間種群的生物測定及突變頻率檢測
    3.3 數(shù)據(jù)分析
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 二斑葉螨CAPS抗性檢測技術(shù)的建立
        3.4.2 二斑葉螨抗性與敏感種群的LAMP檢測方法
        3.4.3 田間種群的生物測定及突變頻率檢測
    3.5 討論
第四章 二斑葉螨靶標基因突變頻率檢測
    4.1 實驗材料
        4.1.1 供試葉螨
        4.1.2 試劑和儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 二斑葉螨基因組DNA提取
        4.2.2 二斑葉螨GluCl1 基因片段的克隆及點突變檢測
        4.2.3 二斑葉螨GluCl3 基因片段的克隆及點突變檢測
        4.2.4 二斑葉螨VGSC、Ace和 Cytb基因片段的克隆及點突變檢測
    4.3 數(shù)據(jù)分析
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 二斑葉螨靶標基因突變位點的檢測
        4.4.2 二斑葉螨抗性點突變與種群抗性的相關(guān)性分析
    4.5 討論
第五章 全文結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡歷



本文編號：3738143