二斑葉螨Tetranychus urticae Koch是一種世界性的重要農(nóng)業(yè)害螨,其寄主范圍廣泛,可以危害至少1100種作物,常見的寄主植物包括蔬菜、果樹、花卉、棉花、玉米等。二斑葉螨常以成螨和幼若螨群集在植物葉背進(jìn)行為害,通過口針穿破植物葉片的表皮細(xì)胞來刺吸植物汁液,最終致使植物葉片干枯、脫落,從而影響作物的質(zhì)量和產(chǎn)量。化學(xué)藥劑是目前防控二斑葉螨的主要措施之一,但生產(chǎn)上常存在施藥隨意、不科學(xué)不合理的選擇施藥、或單一使用某類化學(xué)藥劑等問題,由此導(dǎo)致二斑葉螨對(duì)多種化學(xué)藥劑均產(chǎn)生了不同程度的抗藥性。靶標(biāo)抗性是葉螨抗藥性最重要的抗性機(jī)制之一,近年來已有研究報(bào)道葉螨抗性靶標(biāo)基因的點(diǎn)突變可導(dǎo)致葉螨產(chǎn)生抗藥性。在本研究中,首先采用優(yōu)化的瓊脂浸葉法監(jiān)測(cè)了我國二斑葉螨不同田間種群對(duì)12種殺蟲殺螨劑的抗性水平,明確了不同地區(qū)田間二斑葉螨的抗藥性現(xiàn)狀;針對(duì)二斑葉螨的阿維菌素抗性田間種群,建立了二斑葉螨對(duì)阿維菌素抗性相關(guān)的酶切擴(kuò)增多態(tài)性序列(Cleaved Amplified Polymorphic Sequence,簡稱CAPS)和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法(Loop-Mediated Isothermal Am...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 二斑葉螨基本概況
        1.1.1 二斑葉螨基礎(chǔ)生物學(xué)
        1.1.2 二斑葉螨的發(fā)生危害
        1.1.3 二斑葉螨防控措施
    1.2 二斑葉螨抗藥性現(xiàn)狀及抗性機(jī)制
        1.2.1 二斑葉螨抗藥性現(xiàn)狀
        1.2.2 二斑葉螨抗藥性機(jī)制
    1.3 二斑葉螨的抗藥性監(jiān)測(cè)技術(shù)研究
    1.4 二斑葉螨抗藥性分子檢測(cè)技術(shù)研究
        1.4.1 等位基因特異性PCR技術(shù)(PASA)
        1.4.2 酶切擴(kuò)增多態(tài)性序列標(biāo)記技術(shù)(CAPS)
        1.4.3 TaqMan分子檢測(cè)技術(shù)
        1.4.4 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)
        1.4.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR法
    1.5 本研究的試驗(yàn)內(nèi)容、目的和意義
        1.5.1 本研究的試驗(yàn)內(nèi)容
        1.5.2 本研究的目的和意義
第二章 二斑葉螨田間種群的抗藥性監(jiān)測(cè)
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 供試葉螨
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)藥劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 數(shù)據(jù)分析
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 二斑葉螨雌成螨對(duì)12 種殺蟲殺螨劑的敏感基線
        2.4.2 二斑葉螨7 個(gè)田間種群對(duì)12 種殺蟲殺螨劑的抗藥性監(jiān)測(cè)
    2.5 討論
第三章 二斑葉螨抗阿維菌素相關(guān)基因的快速檢測(cè)技術(shù)
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 供試葉螨
        3.1.2 試劑和儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 二斑葉螨GluCl3 基因的PCR擴(kuò)增
        3.2.2 二斑葉螨CAPS標(biāo)記方法的建立
        3.2.3 二斑葉螨LAMP檢測(cè)技術(shù)的建立
        3.2.4 田間種群的生物測(cè)定及突變頻率檢測(cè)
    3.3 數(shù)據(jù)分析
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 二斑葉螨CAPS抗性檢測(cè)技術(shù)的建立
        3.4.2 二斑葉螨抗性與敏感種群的LAMP檢測(cè)方法
        3.4.3 田間種群的生物測(cè)定及突變頻率檢測(cè)
    3.5 討論
第四章 二斑葉螨靶標(biāo)基因突變頻率檢測(cè)
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 供試葉螨
        4.1.2 試劑和儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 二斑葉螨基因組DNA提取
        4.2.2 二斑葉螨GluCl1 基因片段的克隆及點(diǎn)突變檢測(cè)
        4.2.3 二斑葉螨GluCl3 基因片段的克隆及點(diǎn)突變檢測(cè)
        4.2.4 二斑葉螨VGSC、Ace和 Cytb基因片段的克隆及點(diǎn)突變檢測(cè)
    4.3 數(shù)據(jù)分析
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 二斑葉螨靶標(biāo)基因突變位點(diǎn)的檢測(cè)
        4.4.2 二斑葉螨抗性點(diǎn)突變與種群抗性的相關(guān)性分析
    4.5 討論
第五章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號(hào)：3738143