激活植物免疫系統(tǒng)、提高植物自身抗性是植物病害綠色防控的重要途徑之一。促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）是植物免疫系統(tǒng)的重要防御信號傳導(dǎo)途徑。為了探討大麗輪枝菌蛋白激發(fā)子PevD1誘導(dǎo)植物廣譜抗病性的分子機制,前期利用轉(zhuǎn)錄組測序（RNA-Seq）技術(shù)獲得了本生煙響應(yīng)PevD1誘導(dǎo)的差異表達基因,其中大量基因顯著富集在MAPK通路上。本研究對這些差異表達基因進行了功能分類并進一步分析,發(fā)現(xiàn)這些基因涉及的功能十分廣泛,包括參與植物識別的蛋白激酶（LRR-RLK）、調(diào)控基因表達的轉(zhuǎn)錄因子家族（WRKY和ERF）、與抗病相關(guān)的幾丁質(zhì)酶基因、參與鈣離子信號傳遞的鈣調(diào)蛋白（Calmodulin）、調(diào)控活性氧（Reactive oxygen species,ROS）產(chǎn)生的呼吸爆發(fā)氧化酶（Rboh）和清除ROS的過氧化氫酶（Catalase）等。從富集在MAPK通路中的差異表達基因中選出10個基因進行了qPCR驗證,轉(zhuǎn)錄表達模式與轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果一致。用特異性磷酸化位點抗體雜交技術(shù)驗證了PevD1激活了本生煙的MAPK,即水楊酸誘導(dǎo)的蛋白激酶SIPK和傷誘導(dǎo)的WIPK被激活。 

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 蛋白激發(fā)子PevD1表達純化及本生煙培養(yǎng)
    1.2 PevD1處理本生煙
    1.3 差異表達基因的篩選
    1.4 差異表達基因qRT-PCR檢測
    1.5 PevD1誘導(dǎo)MAPK級聯(lián)反應(yīng)的激活檢測
2 結(jié)果
    2.1 富集在MAPK通路上基因參與植物免疫多種防御反應(yīng)
        2.1.1 PevD1誘導(dǎo)LRR-RLK基因上調(diào)表達
        2.1.2 PevD1誘導(dǎo)WRKY轉(zhuǎn)錄因子基因上調(diào)表達
        2.1.3 PevD1誘導(dǎo)ERF轉(zhuǎn)錄因子基因上調(diào)表達
        2.1.4 PevD1誘導(dǎo)呼吸爆發(fā)氧化酶基因Rboh上調(diào)表達
    2.2 MAPK通路差異表達基因的表達模式
    2.3 PevD1快速激活MAPKs
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]植物Rboh基因功能及其活性調(diào)節(jié)機制的研究進展[J]. 劉秋圓,賀浩華,胡麗芳.  生物技術(shù)通報. 2013(11)
[2]OsRboh基因家族在水稻免疫應(yīng)答中的表達及功能分析[J]. 李業(yè),陳銀華,吳家和,何朝族.  生物工程學(xué)報. 2011(11)



本文編號：3729543