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新疆草莓病毒病檢測及脫毒繁育體系建立

發(fā)布時間:2023-01-09 13:12
  本實驗在調(diào)查新疆草莓病毒病感染的基礎(chǔ)上,對新疆草莓主要病毒病進行分子檢測,并建立草莓主要病毒病原多重RT-PCR檢測體系,為新疆無病毒草莓生產(chǎn)提供理論和技術(shù)支持。同時本實驗采用‘紅顏’、‘甜查理’和‘京藏香’三種草莓品種的莖尖為試驗材料篩選其適合的初代、繼代和生根培養(yǎng)基配方;通過熱處理結(jié)合莖尖組培篩選出適合‘紅顏’、‘甜查理’和‘京藏香’三種草莓品種脫毒的溫度,研究內(nèi)容如下:1、新疆草莓主要病毒分子檢測利用已報道的4種草莓主要病毒病原4對特異性引物,分別對新疆主要草莓種植區(qū)隨機采集草莓樣品共450份樣品,采用單一反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)及多重PCR對采集的樣品進行檢測,分析新疆草莓病毒病的發(fā)生情況。檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)感染新疆草莓有3種主要病毒。所有樣品中病毒總檢出率為64.22%;其中,SVBV檢出率最高,為51.78%;SMoV檢出率為23.78%,SMYEV檢出率為9.33%,SCV沒有檢出。通過對復(fù)合侵染情況分析,病毒復(fù)合侵染率達18.45%,兩種病毒病復(fù)合侵染檢出率為16.67%,三種病毒病復(fù)合侵染檢出率為1.78%;所有樣品中對3種病毒的多重RT-PCR與單一RT-PCR檢測結(jié)... 

【文章頁數(shù)】:55 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞
引言
第一章 文獻綜述
    1.1 草莓生產(chǎn)狀況
        1.1.1 我國草莓生產(chǎn)狀況
        1.1.2 新疆草莓生產(chǎn)狀況
    1.2 草莓脫毒研究狀況
        1.2.1 草莓常用病毒病檢測方法
        1.2.2 草莓常用的脫毒方法
        1.2.3 草莓脫毒意義
第二章 新疆草莓主要病毒病分子檢測及調(diào)查分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試材料
        2.1.2 草莓總RNA提取和cDNA合成
        2.1.3 草莓病毒病單一RT-PCR檢測
        2.1.4 三種病毒多重PCR體系建立
        2.1.5 新疆草莓主栽區(qū)病毒病調(diào)查
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 草莓總RNA的提取和檢測
        2.2.2 單一RT-PCR檢測草莓病毒病
        2.2.3 多重RT-PCR檢測草莓病毒病檢測體系建立
        2.2.4 多重RT-PCR檢測結(jié)果
        2.2.5 新疆草莓主栽區(qū)草莓病毒病檢測結(jié)果
    2.3 討論與結(jié)論
第三章 新疆無病毒草莓快繁體系的建立
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 莖尖消毒及防褐化處理
        3.1.3 初代培養(yǎng)6-BA濃度的篩選
        3.1.4 初代培養(yǎng)與6-BA組合的最適激素篩選
        3.1.5 繼代培養(yǎng)6-BA濃度的篩選
        3.1.6 繼代培養(yǎng)與6-BA組合的最適激素篩選
        3.1.7 生根培養(yǎng)
        3.1.8 三個品種的脫毒效果檢測
        3.1.9 熱處理與莖尖消毒及防褐化處理
        3.1.10 三個品種的熱處理結(jié)合莖尖組培脫毒效果檢測
        3.1.11 三個品種無病毒植株煉苗
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 ‘紅顏’脫毒快繁
        3.2.2 ‘甜查理’脫毒快繁
        3.2.3 ‘京藏香’脫毒快繁
        3.2.4 三個品種熱處理和莖尖組培結(jié)合成活率
    3.3 討論與結(jié)論
        3.3.1 三個品種初代培養(yǎng)討論與結(jié)論
        3.3.2 三個品種繼代培養(yǎng)討論與結(jié)論
        3.3.3 三個品種生根培養(yǎng)討論與結(jié)論
        3.3.4 三個品種熱處理結(jié)合莖尖組培討論與結(jié)論
第四章 全文總結(jié)與展望
    4.1 全文總結(jié)
        4.1.1 RT-PCR檢測體系
        4.1.2 新疆草莓無病毒苗繁育體系建立
    4.2 展望
參考文獻
致謝
作者簡介
導(dǎo)師評閱表


【參考文獻】:
期刊論文
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[7]2015年全國各地蔬菜、西瓜、甜瓜、草莓、馬鈴薯播種面積和產(chǎn)量[J].   中國蔬菜. 2017(01)
[8]‘妙香7號’草莓莖尖培養(yǎng)及其效果評價[J]. 羅靜靜,張亞飛,彭福田.  中國果樹. 2016(05)
[9]新疆日光溫室促成栽培草莓品種對比研究[J]. 趙寶龍,杜發(fā)揚,楊波,孫軍利.  新疆農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(06)
[10]四季型草莓新品種——‘永麗’[J]. 李賀,高秀巖,代紅艷,劉月學(xué),馬躍,吳迪,張志宏.  果農(nóng)之友. 2016(04)

碩士論文
[1]樂都地區(qū)草莓品種篩選研究[D]. 劉麗娟.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015



本文編號:3729242

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