小菜蛾（Plutella xylostella）是一種世界性害蟲(chóng),主要危害十字花科植物。不僅危害嚴(yán)重,而且由于化學(xué)農(nóng)藥的大量使用,已發(fā)現(xiàn)該蟲(chóng)對(duì)多種化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生了較強(qiáng)的抗藥性。開(kāi)發(fā)新型有效的生物農(nóng)藥是解決當(dāng)前小菜蛾防治難題的有效途徑之一。球孢白僵菌（Beauveria bassiana）是當(dāng)前研究和應(yīng)用最廣泛的真菌類生物農(nóng)藥之一,篩選對(duì)小菜蛾具有高毒力的球孢白僵菌菌株,并分析球孢白僵菌與小菜蛾之間的互作相關(guān)基因,是進(jìn)一步提高球孢白僵菌對(duì)小菜蛾防治效果的重要基礎(chǔ)。本研究首先通過(guò)對(duì)不同地區(qū)采集的球孢白僵菌菌株進(jìn)行初步篩選,獲得對(duì)小菜蛾致病力最強(qiáng)的高毒力菌株。其次,以此高毒力菌株為研究對(duì)象,將純培養(yǎng)的球孢白僵菌、未受感染的小菜蛾幼蟲(chóng)和球孢白僵菌侵染小菜蛾48h的蟲(chóng)菌混合樣品分別進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,篩選侵染及致病過(guò)程中真菌和昆蟲(chóng)差異表達(dá)的基因,并分析相關(guān)基因的功能,探討球孢白僵菌與小菜蛾之間互作的相關(guān)基因,為球孢白僵菌菌株的基因改良奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.球孢白僵菌對(duì)小菜蛾高毒力菌株的篩選:選擇分離自鱗翅目昆蟲(chóng)的球孢白僵菌菌株20株,對(duì)小菜蛾2齡幼蟲(chóng)進(jìn)行生物測(cè)定,初步篩選出對(duì)小菜蛾2齡幼蟲(chóng)毒... 

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
縮寫和符號(hào)清單
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 小菜蛾的生物學(xué)特性及防控措施
        1.1.1 形態(tài)特征
        1.1.2 生活史及習(xí)性
        1.1.3 小菜蛾的發(fā)生及危害特點(diǎn)
        1.1.4 小菜蛾的防控措施
    1.2 球孢白僵菌的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 球孢白僵菌的生物學(xué)特性
        1.2.2 球孢白僵菌的安全性
        1.2.3 球孢白僵菌的致病性
        1.2.4 溫度和濕度對(duì)球孢白僵菌的致病性影響
    1.3 昆蟲(chóng)病原真菌致病機(jī)理及相關(guān)基因研究進(jìn)展
        1.3.1 昆蟲(chóng)病原真菌對(duì)昆蟲(chóng)致病機(jī)理
        1.3.2 昆蟲(chóng)病原真菌致病相關(guān)基因研究進(jìn)展
    1.4 昆蟲(chóng)對(duì)病原真菌的免疫應(yīng)答機(jī)制及免疫應(yīng)答相關(guān)基因研究進(jìn)展..
        1.4.1 昆蟲(chóng)對(duì)病原真菌的免疫反應(yīng)機(jī)制
        1.4.2 昆蟲(chóng)對(duì)病原真菌的免疫應(yīng)答相關(guān)基因研究進(jìn)展
2 引言
    2.1 研究的目的和意義
    2.2 研究?jī)?nèi)容
    2.3 技術(shù)路線圖
3 材料與方法
    3.1 供試菌株和昆蟲(chóng)
        3.1.1 供試菌株
        3.1.2 供試?yán)ハx(chóng)
        3.1.3 培養(yǎng)基
        3.1.4 試驗(yàn)儀器
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 供試菌株培養(yǎng)
        3.2.2 孢子懸浮液制備
        3.2.3 同濃度條件下高致病力菌株的初步篩選
        3.2.4 球孢白僵菌與小菜蛾互作相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄組分析
4 結(jié)果與分析
    4.1 小菜蛾的孵化率、化蛹率、羽化率及全周期與溫度的關(guān)系
    4.2 室內(nèi)致病力測(cè)定
        4.2.1 感染菌株的癥狀
        4.2.2 相同濃度條件下高致病力菌株的初步篩選
        4.2.3 不同濃度條件下高毒力菌株對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的毒力測(cè)定
        4.2.4 高毒力菌株在不同溫度下對(duì)小菜蛾2齡幼蟲(chóng)的毒力測(cè)定.
    4.3 侵染小菜蛾48h的球孢白僵菌轉(zhuǎn)錄組分析
        4.3.1 數(shù)字基因表達(dá)譜文庫(kù)
        4.3.2 顯著差異表達(dá)基因的篩選
        4.3.3 差異基因的GO功能顯著性富集分析
        4.3.4 差異基因的Pathway顯著性富集分析
        4.3.5 差異表達(dá)基因中與侵染相關(guān)基因的分析
        4.3.6 熒光定量PCR結(jié)果分析
    4.4 感染球孢白僵菌的小菜蛾幼蟲(chóng)免疫應(yīng)答轉(zhuǎn)錄組分析
        4.4.1 數(shù)字基因表達(dá)譜文庫(kù)
        4.4.2 顯著差異表達(dá)基因的篩選
        4.4.3 差異基因的GO功能顯著性富集分析
        4.4.4 差異基因的Pathway顯著性富集分析
        4.4.5 差異表達(dá)基因中與免疫應(yīng)答相關(guān)基因分析
        4.4.6 熒光定量PCR結(jié)果分析
5 討論
    5.1 溫度對(duì)小菜蛾生長(zhǎng)發(fā)育的影響
    5.2 小菜蛾高致病力球孢白僵菌菌株的篩選
    5.3 侵染小菜蛾48h的球孢白僵菌的相關(guān)基因分析
    5.4 感染球孢球孢白僵菌48h的小菜蛾免疫應(yīng)答相關(guān)基因分析
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]赤擬谷盜海藻糖酶基因調(diào)控幾丁質(zhì)合成及能量代謝的功能研究[D]. 魏蘋.杭州師范大學(xué) 2013
[3]家蠶絲氨酸蛋白酶抑制劑serpin6基因轉(zhuǎn)錄特異性分析及多克隆抗體制備[D]. 王彥云.蘇州大學(xué) 2013
[4]不同寄主飼養(yǎng)的小菜蛾對(duì)菜蛾嚙小蜂生物學(xué)和適應(yīng)性的影響[D]. 李先偉.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[5]家蠶絲氨酸蛋白酶抑制劑Serpin5多克隆抗體制備及組織表達(dá)分析[D]. 李國(guó)勝.蘇州大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3728989