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疆夜蛾P(guān)lus-C氣味結(jié)合蛋白PsauOBP7的組織表達(dá)譜及配體結(jié)合特性分析

發(fā)布時(shí)間:2022-12-22 21:26
  【目的】明確疆夜蛾P(guān)eridroma saucia Plus-C氣味結(jié)合蛋白PsauOBP7在不同化學(xué)感受器官中的表達(dá)譜,解析PsauOBP7重組蛋白的氣味結(jié)合特異性!痉椒ā客ㄟ^(guò)qRT-PCR檢測(cè)PsauOBP7在疆夜蛾雌蛾和雄蛾的觸角、口器、足和翅中的表達(dá)譜。原核表達(dá)并純化PsauOBP7重組蛋白,利用Western blot檢測(cè)PsauOBP7在疆夜蛾不同齡期幼蟲(chóng)頭部及成蟲(chóng)不同組織中的表達(dá)情況;通過(guò)熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PsauOBP7重組蛋白對(duì)39種氣味化合物的結(jié)合能力。【結(jié)果】成功表達(dá)并純化PsauOBP7重組蛋白。qRT-PCR及Western blot檢測(cè)顯示PsauOBP7表達(dá)于4-6齡幼蟲(chóng)頭部及雌雄成蟲(chóng)的觸角、口器、足和翅中。熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)顯示PsauOBP7與反-2-己烯醛的結(jié)合能力最強(qiáng),Ki=1.4μmol/L。此外,PsauOBP7與5種酯類(lèi)化合物乙酸月桂酯、順-3-己烯乙酸酯、乙酸苯乙酯、苯甲酸己酯和肉桂酸甲酯有一定的結(jié)合能力,Ki值分別為5.7, 6.5, 8.9, 9.5和10.2μmol/L。PsauOBP7與... 

【文章頁(yè)數(shù)】:10 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 供試?yán)ハx(chóng)
    1.2 PsauOBP7的克隆
    1.3 PsauOBP7的序列分析
    1.4 PsauOBP7在疆夜蛾成蟲(chóng)中的組織表達(dá)譜qRT-PCR分析
    1.5 PsauOBP7的原核表達(dá)及純化
    1.6 PsauOBP7在疆夜蛾成蟲(chóng)各組織中表達(dá)的Western blot檢測(cè)
    1.7 熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)
    1.8 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果
    2.1 PsauOBP7基因的克隆及序列分析
    2.2 PsauOBP7在疆夜蛾成蟲(chóng)中的組織表達(dá)譜
    2.3 PsauOBP7的重組表達(dá)及純化
    2.4 PsauOBP7在疆夜蛾成蟲(chóng)不同化學(xué)感受器官中的表達(dá)
    2.5 PsauOBP7在疆夜蛾幼蟲(chóng)頭部中的表達(dá)
    2.6 熒光競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合實(shí)驗(yàn)分析重組蛋白PsauOBP7的配體結(jié)合特性
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3724071

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