草莓是經(jīng)濟價值較高的漿果作物。目前我國是世界上草莓栽培面積最大、產(chǎn)量最高的國家。我國草莓病毒病發(fā)生普遍,生產(chǎn)上亦無有效的防治方法,草莓病毒病的發(fā)生嚴重影響了我國草莓產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。福建省各地均有草莓種植,但對于草莓病毒病的種類、地理分布及發(fā)病程度尚缺乏全面系統(tǒng)的研究,為此,我們選取了 4種在我國發(fā)生較為廣泛且危害嚴重的草莓病毒（SMoV、SMYEV、SVBV和SCV）以及在我國尚未報道的5種病毒（SPaV、SCrV-3、SCrV-4、BPYV和SPV1）作為研究對象,利用RT-PCR和高通量測序技術(shù)檢測各病毒在福建省草莓主栽區(qū)的發(fā)生情況,結(jié)果表明,在待測草莓樣品中共檢出 SMoV、SMYEV、SVBV、SPaV、SCrV-3、SCrV-4 共 6 種病毒,SMoV的檢出率為19.3%（18/93）,其中檢出SMoV的樣品分別來自福州、漳州、三明和南平,各地檢出率分別為福州69.2%（9/13）、漳州 40%（4/10）、三明 20%（2/10）和南平 30%（3/10）。SMYEV的檢出率為3.2%（3/93）,其中檢出SMYEV的樣品來自寧德,SMYEV在寧德的檢出率為15%（3/20）... 

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1 草莓病毒病
        1.1 草莓病毒病的地理分布
        1.2 草莓病毒病的危害和癥狀
        1.3 主要的草莓病毒
        1.4 國內(nèi)草莓病毒主要種類特性的研究現(xiàn)狀
            1.4.1 草莓輕型黃邊病毒(SMYEV)
            1.4.2 草莓皺縮病毒(SCV)
            1.4.3 草莓鑲脈病毒(SVBV)
            1.4.4 草莓斑駁病毒(SMoV)
        1.5 非國內(nèi)草莓病毒主要種類特性的研究現(xiàn)狀
            1.5.1 草莓輕型黃邊伴隨病毒(SMYEaV)
            1.5.2 草莓潛隱環(huán)斑病毒(SLRSV)
        1.6 五種國內(nèi)尚未報道的草莓病毒
    2 草莓病毒病的檢測方法
        2.1 指示植物檢測
        2.2 血清學(xué)檢測法
        2.3 分子生物學(xué)檢測法
    3 高通量測序技術(shù)
        3.1 高通量測序技術(shù)原理
            3.1.1 Solexa測序技術(shù)
            3.1.2 SOLiD測序技術(shù)
            3.1.3 454測序技術(shù)
        3.2 高通量技術(shù)的應(yīng)用
            3.2.1 高通量技術(shù)在DNA甲基化分析的應(yīng)用
            3.2.2 高通量技術(shù)在DNA水平上的應(yīng)用
            3.2.3 高通量技術(shù)在基因和轉(zhuǎn)錄組表達調(diào)控的應(yīng)用
            3.2.4 高通量技術(shù)在植物病毒檢測上的應(yīng)用
    4 草莓病毒病的防控方法
        4.1 選育抗性草莓品種
        4.2 培育無病毒苗木
        4.3 應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得抗病毒植株
    5 本項目的目的和意義
第二章 三種病毒(SCrV-3、SCrV-4和SPaV)在我國的首次報道和SPaV全基因組序列測定
    1 材料和方法
        1.1 材料
            1.1.1 供試植物
            1.1.2 供試菌株及載體
            1.1.3 主要儀器和試劑
        1.2 方法
            1.2.1 草莓病葉樣本總RNA的提取
            1.2.2 反轉(zhuǎn)錄和各基因cDNA第一條鏈的合成
            1.2.3 病毒基因片段的PCR擴增
            1.2.4 PCR反應(yīng)產(chǎn)物的電泳檢測
            1.2.5 PCR產(chǎn)物的回收
            1.2.6 膠回收產(chǎn)物與克隆載體的連接
            1.2.7 連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化
            1.2.8 篩選陽性克隆
            1.2.9 Small RNA提取
            1.2.10 NGS數(shù)據(jù)分析
            1.2.11 RT-PCR和RACE獲取目的病毒基因組全序列
            1.2.12 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 SCrV-3和SCrV-4在我國的首次報道
        2.2 SPaV在我國的首次報道
        2.3 SPaV的全基因組序列
    3 討論
第三章 草莓病毒病在福建省的發(fā)生和分布情況
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
            1.2.1 總RNA提取
            1.2.2 RT-PCR檢測和各基因cDNA第一條鏈的合成
            1.2.3 克隆及測序分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 福建地區(qū)九種草莓病毒的PCR檢測
        2.2 福建省九種草莓病毒的發(fā)生和地理分布
        2.3 草莓病毒病的復(fù)合侵染和田間癥狀
    3 討論
第四章 全文總結(jié)與展望
參考文獻
附錄：已發(fā)表或接受的文章
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3723112