番茄黑環(huán)病毒（Tomato black ring virus, TBRV）是嚴(yán)重危害多種草本及木本植物的口岸檢疫性有害生物,加強(qiáng)口岸檢驗(yàn)檢疫是防止其入侵我國的關(guān)鍵。本研究以制備的抗TBRV特異性單克隆抗體（monoclonal antibody, MAb）建立TBRV的血清學(xué)檢測技術(shù),旨在為該病毒的檢測和口岸檢驗(yàn)檢疫提供技術(shù)支持。以提純的TBRV粒子為免疫抗原,利用雜交瘤細(xì)胞技術(shù)制備4株能分泌抗TBRV單抗的雜交瘤細(xì)胞（10A8, 21A8, 21B8和8D3）及其單抗腹水。4株單抗腹水的間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（indirect enzymelinked immunosorbent assay, indirect-ELISA）效價達(dá)到10-7。Western blot分析單抗特異性表明,4株單抗均與感染植物中的TBRV外殼蛋白亞基發(fā)生特異性免疫反應(yīng),而不與健康植物組織發(fā)生反應(yīng)。利用制備的單抗建立檢測TBRV的斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Dot-ELISA）和組織印跡酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Tissue printELISA） 2種血清學(xué)方法。建立的Dot-ELISA和Tissue print-ELI... 

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 番茄黑環(huán)病毒的提純
        1.2.2 雜交瘤細(xì)胞和單克隆抗體制備
        1.2.3 Western blot分析單克隆抗體的特異性
        1.2.4 檢測TBRV的Dot-ELISA方法及其靈敏度和特異性分析
        1.2.5 檢測TBRV的Tissue print-ELISA方法及其特異性分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 TBRV病毒粒子的提純與形態(tài)觀察
    2.2 雜交瘤細(xì)胞的篩選和克隆
    2.3 單克隆抗體腹水制備及抗體類型和效價鑒定
    2.4 單克隆抗體特異性的Western blot分析
    2.5 Dot-ELISA方法的建立及其特異性和靈敏度鑒定
    2.6 Tissue print-ELISA方法的建立及其特異性鑒定
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3720556