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小爪象甲寄生中國菟絲子相關(guān)分子機(jī)理的研究

發(fā)布時(shí)間:2022-12-11 16:00
  小爪象甲(Smicronyx)是一類寄生昆蟲,寄主范圍狹窄,主要寄生菟絲子(Cuscuta)。小爪象甲的寄生會導(dǎo)致中國菟絲子(Cuscuta Chinensis)的莖段部位產(chǎn)生膨大形成蟲癭,小爪象甲與菟絲子相互作用的分子機(jī)理目前尚不清楚。為了探究蟲癭的形成機(jī)制,本研究觀察了小爪象甲寄生菟絲子的生活史,通過高效液相色譜技術(shù),明確小爪象甲寄生前后菟絲子莖段激素的含量變化,然后利用轉(zhuǎn)錄組測序分析菟絲子蟲癭與菟絲子莖段與激素相關(guān)的差異轉(zhuǎn)錄本,最后通過qRT-PCR驗(yàn)證相關(guān)基因在菟絲子蟲癭和菟絲子莖段中的差異表達(dá)情況。本研究的主要研究結(jié)果如下:1.對小爪象甲寄生菟絲子的生活史進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)小爪象甲屬于卵-幼蟲-蛹寄生昆蟲。2.利用高效液相色譜法對小爪象甲寄生于菟絲子莖段所形成的蟲癭及相鄰菟絲子莖段的茉莉酸(Jasmonic acid,JA)、水楊酸(Salicylic acid,SA)、生長素(Auxin)和細(xì)胞分裂素(Cytokinin,CTK)的含量進(jìn)行測定。結(jié)果發(fā)現(xiàn),菟絲子蟲癭中茉莉酸、生長素和細(xì)胞分裂素的含量均高于相鄰菟絲子莖段。而菟絲子蟲癭中沒有檢測到水楊酸。這些結(jié)果說明,小爪象甲的寄... 

【文章頁數(shù)】:64 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略語及英文對照
1 前言
    1.1 菟絲子的危害
    1.2 寄生昆蟲的概述
        1.2.1 寄生昆蟲的定義及分類
        1.2.2 寄生昆蟲的應(yīng)用
    1.3 寄生昆蟲與寄主植物的相互作用
        1.3.1 寄生昆蟲與寄主植物的相互識別
        1.3.2 寄生昆蟲對植物生長發(fā)育的影響
        1.3.3 小爪象甲寄生菟絲子的研究進(jìn)展
    1.4 寄生昆蟲影響寄主植物激素的合成及信號傳導(dǎo)
        1.4.1 植物茉莉酸(JA)的合成及其信號傳導(dǎo)途徑
        1.4.2 植物水楊酸(SA)的合成及其信號傳導(dǎo)途徑
        1.4.3 植物生長素(Auxin)的合成及其信號傳導(dǎo)途徑
        1.4.4 植物細(xì)胞分裂素(CTK)的合成及其信號傳導(dǎo)途徑
    1.5 轉(zhuǎn)錄組測序在寄生研究中的應(yīng)用
    1.6 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 供試實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 qRT-PCR擴(kuò)增引物
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
        2.1.4 主要藥品與試劑
        2.1.5 主要溶液配方
        2.1.6 主要使用軟件
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 RNA的提取
        2.2.2 RNA文庫構(gòu)建及測序
        2.2.3 轉(zhuǎn)錄組測序組裝方案
        2.2.4 轉(zhuǎn)錄組組裝分析
        2.2.5 轉(zhuǎn)錄組注釋和差異表達(dá)分析
        2.2.6 反轉(zhuǎn)錄cDNA第一鏈的合成
        2.2.7 qRT-PCR相對定量分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 小爪象甲寄生中國菟絲子導(dǎo)致蟲癭發(fā)生的過程
    3.2 菟絲子蟲癭和菟絲子莖段激素含量的測定
        3.2.1 茉莉酸(JA)和水楊酸(SA)含量的測定
        3.2.2 生長素(IAA)和細(xì)胞分裂素(tZ)含量的測定
    3.3 菟絲子蟲癭轉(zhuǎn)錄組測序
        3.3.1 轉(zhuǎn)錄組測序樣品RNA質(zhì)量檢測
        3.3.2 Clean reads質(zhì)量檢測
        3.3.3 轉(zhuǎn)錄組的組裝
        3.3.4 轉(zhuǎn)錄組功能注釋
    3.4 差異表達(dá)基因的分析
    3.5 與蟲癭形成相關(guān)的激素差異表達(dá)轉(zhuǎn)錄本分析
        3.5.1 茉莉酸(JA)相關(guān)差異表達(dá)轉(zhuǎn)錄本分析
        3.5.2 水楊酸(SA)相關(guān)差異表達(dá)基因分析
        3.5.3 生長素(Auxin)相關(guān)差異表達(dá)基因分析
        3.5.4 細(xì)胞分裂素(CTK)相關(guān)差異表達(dá)基因分析
4 結(jié)論與討論
    4.1 結(jié)論
    4.2 討論
        4.2.1 小爪象甲對菟絲子的生物防治作用
        4.2.2 小爪象甲通過影響茉莉酸和水楊酸的信號傳導(dǎo)影響菟絲子免疫反應(yīng)
        4.2.3 小爪象甲通過影響生長素和細(xì)胞分裂素影響菟絲子蟲癭生長
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄A:茉莉酸相關(guān)候選基因
附錄B:水楊酸相關(guān)候選基因
附錄C:生長素相關(guān)候選基因
附錄D:細(xì)胞分裂素相關(guān)候選基因


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[9]不同程度南方菟絲子寄生對入侵植物三葉鬼針草生長的影響[J]. 張靜,閆明,李鈞敏.  生態(tài)學(xué)報(bào). 2012(10)
[10]加強(qiáng)雜草生物防除的研究和應(yīng)用[J]. 馬曉淵.  雜草科學(xué). 2007(03)



本文編號:3719076

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