二化螟Chilo suppressalis和稻縱卷葉螟Cnaphalocrocis medinalis是亞洲地區(qū)最重要的兩種水稻害蟲,對我國及東南亞地區(qū)的水稻生產(chǎn)造成嚴重的經(jīng)濟損失。長期以來,對二化螟和稻縱卷葉螟的防治主要依靠化學(xué)農(nóng)藥,但無選擇性地使用殺蟲劑,給二化螟和稻縱卷葉螟造成了一定的選擇壓力,使這兩種害蟲對殺蟲劑的敏感性降低,導(dǎo)致防治更為困難。目前對于二化螟和稻縱卷葉螟對殺蟲劑敏感性降低的研究主要集中于殺蟲劑靶標位點的突變和解毒酶活性的改變。谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶（glutathione-S-transferase,GST）作為一類重要的解毒酶,在昆蟲對內(nèi)源和外源有毒物質(zhì)的代謝過程中起非常重要的作用。GST催化有害物質(zhì)與還原型谷胱甘肽（GSH）結(jié)合,增加其水溶性,從而能被更容易地排出體外,降低殺蟲劑對昆蟲的毒性。目前,關(guān)于二化螟和稻縱卷葉螟GST的報道比較有限。因此,本論文針對二化螟和稻縱卷葉螟GST的編碼基因開展研究,從這兩種害蟲的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫里鑒定GST編碼基因,明確GST在各組織中的表達模式,并研究了在亞致死劑量殺蟲劑脅迫下GST基因表達水平的變化。本研究結(jié)果可為探索二化螟... 

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
文獻綜述
引言
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
        1.1.1 供試昆蟲
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 生物信息學(xué)分析工具
        1.1.4 主要儀器設(shè)備
    1.2 實驗方法
        1.2.1 從二化螟和稻縱卷葉螟轉(zhuǎn)錄組中鑒定CsGSTs和CmGSTs基因
        1.2.2 核酸提取
        1.2.3 cDNA第一鏈的合成
    1.3 CsGSTs和CmGSTs基因的克隆
        1.3.1 引物設(shè)計
        1.3.2 GST片段的PCR擴增
        1.3.3 PCR產(chǎn)物回收純化
        1.3.4 產(chǎn)物連接克隆載體
        1.3.5 連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化
        1.3.6 陽性克隆篩選和驗證
        1.3.7 菌落PCR
        1.3.8 測序鑒定
    1.4 不同組織表達譜
    1.5 應(yīng)對殺蟲劑脅迫的表達模式分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 二化螟和稻縱卷葉螟GSTs基因鑒定和序列分析
    2.2 二化螟和稻縱卷葉螟GSTs的生物信息學(xué)分析
    2.3 二化螟和稻縱卷葉螟GSTs的系統(tǒng)進化分析
    2.4 二化螟和稻縱卷葉螟GSTs序列多重對比
    2.5 GSTs的表達模式分析
        2.5.1 二化螟GST在幼蟲不同組織的表達模式
        2.5.2 稻縱卷葉螟GST基因在幼蟲不同組織中的表達模式
    2.6 二化螟和稻縱卷葉螟GST基因應(yīng)對殺蟲劑脅迫的表達模式分析
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻
個人簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]9種殺蟲劑防治稻縱卷葉螟的效果[J]. 袁林澤,耿躍,周奮啟,康曉霞,陳銀鳳,徐蕾.  浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(07)
[2]稻縱卷葉螟羧酸酯酶基因的鑒定與表達譜分析[J]. 劉蘇,馮明峰,何夢竹.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2015(03)
[3]有機磷類殺蟲劑代謝機制研究進展[J]. 王志超,康志嬌,史雪巖,高希武.  農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 2015(01)
[4]水稻主要害蟲發(fā)生區(qū)劃研究[J]. 何忠全,陳德西,封傳紅,陸明紅,向運佳,劉萬才.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2014(05)
[5]2003年我國稻縱卷葉螟特大發(fā)生的氣候背景[J]. 陳曉,劉萬才,朱建生,張孝羲,翟保平.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2013(03)
[6]水稻二化螟抗藥性監(jiān)測方法[J]. 吳敏,張真真,高聰芬.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2013(02)
[7]昆蟲抗藥性機制研究進展[J]. 阮成龍,米智,朱勇.  蠶業(yè)科學(xué). 2012(02)
[8]殺蟲劑對昆蟲的亞致死效應(yīng)的研究進展[J]. 韓文素,王麗紅,孫婳婳,高希武.  中國植保導(dǎo)刊. 2011(11)
[9]水稻二化螟的危害對產(chǎn)量的影響及防治對策[J]. 閆學(xué)凱,梁瑞鳳.  農(nóng)業(yè)科技與信息. 2011(09)
[10]昆蟲谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的基因組學(xué)研究及其介導(dǎo)的抗藥性[J]. 房守敏.  蠶學(xué)通訊. 2010(04)

博士論文
[1]稻飛虱化合物感覺系統(tǒng)和代謝酶的分子解析[D]. 周文武.浙江大學(xué) 2013
[2]桔小實蠅GSTs生化及分子毒理學(xué)特性研究[D]. 胡飛.西南大學(xué) 2012
[3]二化螟的抗藥性及綜合防治研究[D]. 姜衛(wèi)華.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]棉鈴蟲谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的誘導(dǎo)表達及其基因克隆[D]. 陳鳳菊.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003

碩士論文
[1]稻縱卷葉螟的抗性監(jiān)測及人工飼料優(yōu)化[D]. 張樹坤.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]二化螟和大螟的抗藥性監(jiān)測及二化螟對氟苯蟲酰胺的敏感基線[D]. 吳敏.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]二化螟抗藥性監(jiān)測及其對氯蟲苯甲酰胺敏感基線的建立[D]. 張真真.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[4]氯蟲苯甲酰胺對稻縱卷葉螟防效評價及其對水稻生長發(fā)育的影響[D]. 季正文.揚州大學(xué) 2010
[5]稻縱卷葉螟及二化螟人工飼養(yǎng)技術(shù)的研究[D]. 雷妍圓.廣西大學(xué) 2007
[6]水稻二化螟對氟蟲腈等藥劑的抗藥性監(jiān)測及其防治研究[D]. 應(yīng)志龍.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號：3708433