紫花苜蓿鐮刀菌根腐病是一種慢性的潛在的世界性病害,在大多數(shù)產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生。紫花苜蓿感染根腐病初期維管束變成褐色或紅褐色,嚴(yán)重時(shí)整個(gè)主根內(nèi)部腐爛,分枝減少,側(cè)根大量死亡,固氮能力降低,壽命和利用年限縮短,草產(chǎn)量和品質(zhì)急劇下降。已報(bào)道紫花苜蓿鐮刀菌根腐病的病原主要為腐皮鐮刀菌（F.Solani）、尖孢鐮刀菌（F.oxysporum）和銳頂鐮刀菌（F.acuminatum）等菌種,鐮刀菌屬的其他致病性菌種報(bào)道較少。為查明是否有我國或世界上未發(fā)現(xiàn)的可引起紫花苜蓿根腐病的鐮刀菌菌種以及探討紫花苜蓿響應(yīng)鐮刀菌侵染的機(jī)制,本研究于2012-2013年對河北廊坊、內(nèi)蒙古臨河和山西陽高縣的大面積栽培紫花苜蓿進(jìn)行田間調(diào)查,采集疑似感染鐮刀菌根腐病的紫花苜蓿病株,在PSA和MGA等培養(yǎng)基上分離純化,觀察菌落形態(tài)、顏色及分生孢子的大小、形態(tài)等指標(biāo),并克隆其ITS和TEF-1α序列進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定。通過在NCBI和Fusarium-ID鐮刀菌屬數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對,結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察確定菌種名稱,然后通過回接試驗(yàn)確定其致病性。根據(jù)以上試驗(yàn)結(jié)果,利用致病性較強(qiáng)的菌株對14個(gè)紫花苜蓿品種進(jìn)行抗病性評(píng)價(jià),并通過透射電鏡觀察接種... 

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 紫花苜蓿鐮刀菌根腐病的概況
    1.2 鐮刀菌的分類及鑒定
        1.2.1 鐮刀菌的分類
        1.2.2 鐮刀菌的鑒定
    1.3 紫花苜蓿鐮刀菌根腐病病原菌的研究
        1.3.1 國內(nèi)紫花苜蓿鐮刀菌根腐病病原
        1.3.2 國外紫花苜蓿鐮刀菌根腐病病原
    1.4 紫花苜蓿鐮刀菌根腐病的防治
        1.4.1 農(nóng)業(yè)措施防治
        1.4.2 生物防治
        1.4.3 化學(xué)防治
        1.4.4 抗病品種的應(yīng)用
    1.5 蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展及應(yīng)用
        1.5.1 蛋白質(zhì)組學(xué)的概念及研究內(nèi)容
        1.5.2 蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究進(jìn)展
        1.5.3 蛋白質(zhì)組學(xué)在紫花苜蓿中的應(yīng)用
    1.6 研究內(nèi)容及目的意義
第二章 紫花苜蓿鐮刀菌根腐病病原菌的分離與鑒定
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料來源
        2.1.2 病原菌的分離純化
        2.1.3 病原菌形態(tài)學(xué)觀察
        2.1.4 分子生物學(xué)鑒定
        2.1.5 進(jìn)化樹的構(gòu)建
        2.1.6 致病性鑒定
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 病原的形態(tài)學(xué)鑒定
        2.2.2 鐮刀菌的分子生物學(xué)鑒定
        2.2.3 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
        2.2.4 不同病原分離物的致病性分析
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 紫花苜蓿鐮刀菌根腐病抗病品種的篩選
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試品種
        3.1.2 供試菌種
        3.1.3 水培接種方法
        3.1.4 土培接種方法
        3.1.5 病情統(tǒng)計(jì)及反應(yīng)型劃分標(biāo)準(zhǔn)
        3.1.6 透射電鏡觀察 (TEM)
        3.1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 病害的形態(tài)學(xué)觀察及TEM觀察
        3.2.2 病害嚴(yán)重指數(shù)及發(fā)病率的統(tǒng)計(jì)分析
        3.2.3 接種病原菌對紫花苜蓿生長發(fā)育的的影響
        3.2.4 水培接種方法與土培接種法的相關(guān)性分析
    3.3 討論
第四章 紫花苜蓿接種鐮刀菌后根部和葉部的蛋白質(zhì)組學(xué)研究
    4.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
    4.2 試驗(yàn)材料
        4.2.1 試驗(yàn)儀器
        4.2.2 試驗(yàn)試劑
        4.2.3 試驗(yàn)主要試劑配方
    4.3 試驗(yàn)方法
        4.3.1 植物材料準(zhǔn)備
        4.3.2 根部和葉部蛋白質(zhì)的提取
        4.3.3 蛋白質(zhì)的溶解
        4.3.4 蛋白質(zhì)的定量
        4.3.5 雙向電泳分析 (2-DE)
        4.3.6 凝膠染色
        4.3.7 凝膠掃描及圖像分析
        4.3.8 蛋白質(zhì)譜鑒定
        4.3.9 熒光定量PCR
        4.3.10 蛋白功能分析及數(shù)據(jù)分析
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 接種后試驗(yàn)材料的表型比較
        4.4.2 蛋白凝膠圖像分析
        4.4.3 差異蛋白點(diǎn)的質(zhì)譜分析
        4.4.4 差異蛋白質(zhì)的功能分析
        4.4.5 轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)分析
    4.5 討論
        4.5.1 紫花苜蓿基因型和病原侵染對蛋白表達(dá)的影響
        4.5.2 參與新陳代謝的蛋白
        4.5.3 參與蛋白合成、修飾和折疊
        4.5.4 參與脅迫應(yīng)激或防御的蛋白
        4.5.5 參與能量和光合作用的蛋白
        4.5.6 其他未分類蛋白
    4.6 小結(jié)
第五章 全文總結(jié)
    5.1 結(jié)論
    5.2 本論文創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 下一步研究展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[2]紫花苜蓿根瘤菌共生對干旱及鹽脅迫的響應(yīng)機(jī)制研究[D]. 楊培志.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
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[4]苜蓿根和根頸腐爛病的病原及種質(zhì)抗病性研究[D]. 李敏權(quán).甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2002

碩士論文
[1]甘肅省紫花苜蓿根腐病的病原研究[D]. 安歡樂.蘭州大學(xué) 2016
[2]共生根瘤菌提高紫花苜�？购的芰Φ牡鞍捉M分析[D]. 王衛(wèi)棟.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[3]利用病原菌毒素篩選抗根腐病苜蓿（Medicago sativa L.）的研究[D]. 劉海波.西南大學(xué) 2006
[4]黃土高原草田輪作系統(tǒng)中苜蓿與小麥的根部入侵真菌[D]. 郭玉霞.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3704997