染色體由遺傳物質(zhì)DNA與組蛋白組成,其中核心組蛋白包括H2A,H2B,H3和H4。這4種核心組蛋白的N末端氨基酸殘基可以進(jìn)行一系列的翻譯后修飾進(jìn)而參與不同的生物學(xué)功能,這些修飾包括磷酸化、泛素化、甲基化、乙酰化和SUMO化等。這些修飾可以改變組蛋白氨基酸末端的電荷基本性質(zhì),從而影響組蛋白與DNA以及非組蛋白之間的相互作用。染色質(zhì)凝縮是正確執(zhí)行各種細(xì)胞活動(dòng)所必需的過程。在有絲分裂過程中,諸多因子共同參與調(diào)控染色質(zhì)的凝縮,而染色質(zhì)的松弛是DNA復(fù)制、修復(fù)、重組和基因轉(zhuǎn)錄所必需的。有絲分裂是動(dòng)植物細(xì)胞進(jìn)行增殖的主要方式。染色體也隨著有絲分裂周期的進(jìn)行發(fā)生動(dòng)態(tài)變化:從間期高度無序的染色質(zhì)絲狀態(tài)到中期高度凝縮的在顯微鏡下清晰可見的染色體狀態(tài)再到后期染色體解凝縮重新變成染色質(zhì)絲的狀態(tài),許多基因參與該過程中染色質(zhì)凝縮的調(diào)控。組蛋白H3 N末端存在諸多可以發(fā)生磷酸化的位點(diǎn),例如Thr3、Ser10、Thr11和Ser28等。有趣的是,H3在Ser10、Thr11和Ser28位點(diǎn)磷酸化的現(xiàn)象已經(jīng)在轉(zhuǎn)錄活性基因的基因組區(qū)域被觀察到。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂中的研究表明,組蛋白H3 Ser10磷酸化的信號在晚... 

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 組蛋白密碼
    1.2 有絲分裂周期調(diào)控機(jī)制
        1.2.1 染色單體分離的機(jī)制
        1.2.2 紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)
    1.3.組蛋白H3 Ser10磷酸化與有絲分裂
    1.4 組蛋白H3 Thr3磷酸化與有絲分裂
    1.5 昆蟲細(xì)胞有絲分裂研究進(jìn)展
第二章 材料與方法
    2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑及溶液的配制
        2.3.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.3.2 主要實(shí)驗(yàn)溶液的配制
    2.4 主要實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 細(xì)胞的培養(yǎng)及裂解
        2.4.2 總蛋白的提取
        2.4.3 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳步驟
        2.4.4 Western blot檢測組蛋白H3 Ser10 以及H3 Thr3磷酸化抗體的特異性
        2.4.5 ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對抗體效價(jià)的檢測
        2.4.6 ZEISS激光共聚焦顯微鏡觀察熒光信號
        2.4.7 DAPI染色
        2.4.8 Sf9細(xì)胞的免疫熒光標(biāo)記
        2.4.9 Dot-Blot分析實(shí)驗(yàn)
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 組蛋白H3 Ser10磷酸化抗體的效價(jià)檢測及特異性分析
    3.2 組蛋白H3 Ser10磷酸化抗體的特異性分析
    3.3 組蛋白H3 Ser10磷酸化在Sf9細(xì)胞有絲分裂中的動(dòng)態(tài)分布
    3.4 組蛋白H3 Thr3磷酸化抗體的效價(jià)檢測
    3.5 組蛋白H3 Thr3磷酸化抗體的特異性分析
    3.6 組蛋白H3 Thr3磷酸化在Sf9細(xì)胞有絲分裂中的動(dòng)態(tài)分布
第四章 結(jié)論與討論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝



本文編號：3702256