染色體由遺傳物質DNA與組蛋白組成,其中核心組蛋白包括H2A,H2B,H3和H4。這4種核心組蛋白的N末端氨基酸殘基可以進行一系列的翻譯后修飾進而參與不同的生物學功能,這些修飾包括磷酸化、泛素化、甲基化、乙酰化和SUMO化等。這些修飾可以改變組蛋白氨基酸末端的電荷基本性質,從而影響組蛋白與DNA以及非組蛋白之間的相互作用。染色質凝縮是正確執(zhí)行各種細胞活動所必需的過程。在有絲分裂過程中,諸多因子共同參與調控染色質的凝縮,而染色質的松弛是DNA復制、修復、重組和基因轉錄所必需的。有絲分裂是動植物細胞進行增殖的主要方式。染色體也隨著有絲分裂周期的進行發(fā)生動態(tài)變化:從間期高度無序的染色質絲狀態(tài)到中期高度凝縮的在顯微鏡下清晰可見的染色體狀態(tài)再到后期染色體解凝縮重新變成染色質絲的狀態(tài),許多基因參與該過程中染色質凝縮的調控。組蛋白H3 N末端存在諸多可以發(fā)生磷酸化的位點,例如Thr3、Ser10、Thr11和Ser28等。有趣的是,H3在Ser10、Thr11和Ser28位點磷酸化的現(xiàn)象已經(jīng)在轉錄活性基因的基因組區(qū)域被觀察到。在哺乳動物細胞有絲分裂中的研究表明,組蛋白H3 Ser10磷酸化的信號在晚... 

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 組蛋白密碼
    1.2 有絲分裂周期調控機制
        1.2.1 染色單體分離的機制
        1.2.2 紡錘體組裝檢驗點
    1.3.組蛋白H3 Ser10磷酸化與有絲分裂
    1.4 組蛋白H3 Thr3磷酸化與有絲分裂
    1.5 昆蟲細胞有絲分裂研究進展
第二章 材料與方法
    2.1 主要實驗材料
    2.2 主要實驗儀器
    2.3 主要實驗試劑及溶液的配制
        2.3.1 主要實驗試劑
        2.3.2 主要實驗溶液的配制
    2.4 主要實驗方法
        2.4.1 細胞的培養(yǎng)及裂解
        2.4.2 總蛋白的提取
        2.4.3 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳步驟
        2.4.4 Western blot檢測組蛋白H3 Ser10 以及H3 Thr3磷酸化抗體的特異性
        2.4.5 ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗對抗體效價的檢測
        2.4.6 ZEISS激光共聚焦顯微鏡觀察熒光信號
        2.4.7 DAPI染色
        2.4.8 Sf9細胞的免疫熒光標記
        2.4.9 Dot-Blot分析實驗
第三章 結果與分析
    3.1 組蛋白H3 Ser10磷酸化抗體的效價檢測及特異性分析
    3.2 組蛋白H3 Ser10磷酸化抗體的特異性分析
    3.3 組蛋白H3 Ser10磷酸化在Sf9細胞有絲分裂中的動態(tài)分布
    3.4 組蛋白H3 Thr3磷酸化抗體的效價檢測
    3.5 組蛋白H3 Thr3磷酸化抗體的特異性分析
    3.6 組蛋白H3 Thr3磷酸化在Sf9細胞有絲分裂中的動態(tài)分布
第四章 結論與討論
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的研究成果
致謝



本文編號：3702256