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煙蚜傳毒方式與以菌治蚜的研究

發(fā)布時間:2022-11-03 21:48
  本研究以煙蚜為研究對象,在對皖南煙區(qū)采集的毒源進(jìn)行鑒定的基礎(chǔ)上,運用熒光定量PCR(qRT-PCR)技術(shù)對煙蚜口針、頭部和腹部CMV的相對表達(dá)量進(jìn)行了檢測,測定了煙蚜的持毒時間、傳毒效率,明確蚜蟲傳播CMV亞組ⅠB的方式。同時測定了10株昆蟲病原真菌對煙蚜若蟲的毒力,篩選出了2株對煙蚜具有高致病力的菌株。主要研究成果如下:1.毒源的鑒定:從安徽皖南煙區(qū)(宣城市黃渡村、施田村)采集了疑似侵染黃瓜花葉病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)煙葉,鑒定出3株只有CMV單一侵染,有3株是TMV、CMV復(fù)合侵染,通過測序比對CMV CP序列,6個CMV樣品均為CMV亞組ⅠB。2.煙蚜各部位CMV的檢測:運用熒光定量PCR(qRT-PCR)技術(shù)檢測煙蚜口針、頭部以及腹部的帶毒情況,在煙蚜的口針、頭部以及腹部均檢測到CMV,其中煙蚜口針CMV帶毒率最高為100%,其次是頭部帶毒率88.89%,腹部帶毒率為50%。3.煙蚜持毒時間及其傳毒效率的測定:煙蚜取食感染CMV的煙草植株后饑餓處理,煙蚜體內(nèi)的帶毒率隨時間的延長逐漸降低,最初2 h時帶毒率為62.5%,10 h時煙蚜帶毒率為25... 

【文章頁數(shù)】:46 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 煙蚜簡介
        1.1.1 煙蚜的形態(tài)特征
        1.1.2 煙蚜的發(fā)生及危害
    1.2 黃瓜花葉病毒研究進(jìn)展
        1.2.1 黃瓜花葉病毒的發(fā)生與危害
        1.2.2 黃瓜花葉病毒的傳播方式
    1.3 蚜蟲傳毒機理的研究進(jìn)展
        1.3.1 蚜蟲傳毒方式
        1.3.2 昆蟲與植物病毒結(jié)合相關(guān)的蛋白
    1.4 煙蚜的綜合防治
        1.4.1 農(nóng)業(yè)防治
        1.4.2 化學(xué)防治
        1.4.3 物理防治
        1.4.4 生物防治
2 引言
3 材料與方法
    3.1 實驗材料
        3.1.1 供試蚜蟲
        3.1.2 供試毒源
        3.1.3 供試煙草
        3.1.4 供試菌株
    3.2 煙蚜各部位的CMV檢測
        3.2.1 供試毒源的獲得與鑒定
        3.2.2 煙草RNA的提取
        3.2.3 反轉(zhuǎn)錄獲取cDNA
        3.2.4 PCR擴增檢測CMV
        3.2.5 煙蚜處理
        3.2.6 煙蚜總RNA的提取
        3.2.7 反轉(zhuǎn)錄獲取cDNA
        3.2.8 運用qRT-PCR技術(shù)檢測煙蚜各部位CMV的相對表達(dá)量
        3.2.9 煙蚜持毒時間的測定
        3.2.10 煙蚜傳毒效率的測定
    3.3 煙蚜高毒力病原真菌的篩選
        3.3.1 煙蚜處理
        3.3.2 真菌孢子懸浮液的制備
        3.3.3 室內(nèi)毒力測定
        3.3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
4 結(jié)果與分析
    4.1 CMV毒源鑒定
    4.2 煙蚜口針中CMV檢測結(jié)果
    4.3 煙蚜頭部CMV檢測結(jié)果
    4.4 煙蚜腹部CMV檢測結(jié)果
    4.5 煙蚜持毒時間的測定
    4.6 煙蚜傳毒效率的測定
    4.7 不同昆蟲病原真菌菌株對煙蚜若蟲的毒力測定結(jié)果
    4.8 昆蟲病原真菌對煙蚜的致死中濃度和致死中時間
5 討論
    5.1 不同傳播方式的病毒在蚜蟲體內(nèi)停留的位置
    5.2 不同傳播方式的病毒在蚜蟲體內(nèi)保留的時間
    5.3 煙蚜生物防治技術(shù)的研究
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
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[2]古丈縣煙蚜發(fā)生規(guī)律與防治技術(shù)研究[D]. 羅小紅.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]黃瓜花葉病毒與番茄不孕病毒RNA重組機制的初步探討[D]. 高瑜澤.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]柑橘衰退病毒在褐色橘蚜體內(nèi)分布的初步研究[D]. 李文財.西南大學(xué) 2011
[5]煙蚜與寄主、煙草花葉病毒相互作用的研究[D]. 馬麗娜.西南大學(xué) 2006
[6]西瓜花葉病宿州分離物的鑒定[D]. 范衛(wèi)紅.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005



本文編號:3700684

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