班氏跳小蜂（Aenasius bambawalei Hayat）是入侵性害蟲扶桑綿粉蚧的重要寄生性天敵,對扶桑綿粉蚧有較好的防治潛能,但該寄生蜂的寄主定位機(jī)制尚不清楚。一般認(rèn)為,昆蟲氣味結(jié)合蛋白（Odorant binding proteins,OBPs）對運(yùn)輸氣味分子具有重要作用。如果能夠明確班氏跳小蜂OBPs與相關(guān)氣味分子的結(jié)合特性,將對解析該蜂的寄主定位機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。本研究以班氏跳小蜂為研究對象,在已獲得的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上,對AbamOBP17和Abam OBP28基因進(jìn)行克隆和表達(dá)量測定;進(jìn)一步對AbamOBP17和Abam OBP28進(jìn)行體外純化并獲得重組純蛋白;在此基礎(chǔ)上進(jìn)行AbamOBP17和Abam OBP28與27種棉花揮發(fā)物的熒光競爭性結(jié)合實(shí)驗(yàn);然后進(jìn)行AbamOBP17和Abam OBP28與8種揮發(fā)物的圓二色譜分析;最后通過Y型嗅覺儀和RNA干擾技術(shù),篩選獲得了對該蜂具有行為活性的物質(zhì)。研究結(jié)果為探索Abam OBPs的功能提供了理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.班氏跳小蜂Abam OBPs基因克隆和表達(dá)量測定利用RT-PCR技術(shù)成功克隆AbamOBP17和... 

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 扶桑綿粉蚧及其天敵班氏跳小蜂
        1.1.1 扶桑綿粉蚧
        1.1.2 班氏跳小蜂
        1.1.3 班氏跳小蜂對扶桑綿粉蚧的控制作用
    1.2 昆蟲的嗅覺
        1.2.1 昆蟲的嗅覺感受系統(tǒng)
        1.2.2 昆蟲嗅覺蛋白
    1.3 氣味結(jié)合蛋白
        1.3.1 氣味結(jié)合蛋白的特征
        1.3.2 氣味結(jié)合蛋白的功能
        1.3.3 氣味結(jié)合蛋白與配基的結(jié)合與釋放
    1.4 氣味結(jié)合蛋白與配基相互作用的研究
        1.4.1 蛋白與物質(zhì)結(jié)合能力的測定
        1.4.2 蛋白結(jié)合過程構(gòu)象變化的研究
    1.5 研究目的與意義
    技術(shù)路線
第二章 班氏跳小蜂AbamOBPs基因克隆和表達(dá)量測定
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 班氏跳小蜂總RNA的提取
        2.1.3 班氏跳小蜂cDNA的合成
        2.1.4 班氏跳小蜂AbamOBPs基因的克隆
        2.1.5 班氏跳小蜂AbamOBPs基因表達(dá)量測定
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 班氏跳小蜂AbamOBPs基因的克隆
        2.2.2 班氏跳小蜂AbamOBPs基因表達(dá)量測定
    2.3 討論
第三章 班氏跳小蜂AbamOBPs的表達(dá)純化和結(jié)合特性分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 AbamOBP17和AbamOBP28 的原核表達(dá)及純化
        3.1.3 AbamOBPs與配基結(jié)合特性分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 重組表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.2.2 目的蛋白的原核表達(dá)及純化
        3.2.3 AbamOBPs與配基結(jié)合特性分析
    3.3 討論
第四章 行為活性物質(zhì)的篩選及AbamOBP17 功能驗(yàn)證
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 dsRNA的合成
        4.1.3 dsRNA注射
        4.1.4 qPCR檢測和分析
        4.1.5 干擾前和干擾后Y型嗅覺儀實(shí)驗(yàn)
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 干擾前班氏跳小蜂雌雄蜂的行為反應(yīng)
        4.2.2 干擾后AbamOBP17 基因的特異性表達(dá)
        4.2.3 RNA干擾后對活性物質(zhì)的行為反應(yīng)
    4.3 討論
第五章 結(jié)果,討論與展望
    5.1 結(jié)果與討論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]扶桑綿粉蚧在廣西的發(fā)生為害情況調(diào)查[J]. 孟醒,李金峰,黃立飛,姜建軍,楊朗,周忠實(shí),桂富榮,陳斌,陳紅松.  南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2019(05)
[2]云南扶桑綿粉蚧的發(fā)生及防治[J]. 孟醒,桂富榮,陳斌.  生物安全學(xué)報(bào). 2018(04)
[3]扶桑綿粉蚧對河北省棉花的入侵風(fēng)險(xiǎn)及預(yù)防建議[J]. 葛朝紅,劉彥霞,周永萍,鄧素花,師樹新.  天津農(nóng)林科技. 2018(04)
[4]美洲斑潛蠅氣味結(jié)合蛋白OBP13的鑒定與功能[J]. 陳東凱,張林雅,邢振龍,雷仲仁.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(05)
[5]不同生殖方式對班氏跳小蜂寄生率和子代性比的影響[J]. 張娟,黃俊,呂要斌.  環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2016(04)
[6]扶桑綿粉蚧取食為害對棉花萜類化合物釋放的影響[J]. 黃俊,張娟,呂要斌.  環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2016(04)
[7]家蠶化學(xué)感受蛋白CSP16的表達(dá)及結(jié)合特性分析[J]. 郭興國,陳瑩,邢秋婷,邢萬靜,闞云超,喬惠麗.  昆蟲學(xué)報(bào). 2016(06)
[8]暗黑鰓金龜氣味結(jié)合蛋白HparOBP15a基因的克隆及功能分析[J]. 房遲琴,張鑫鑫,劉丹丹,李克斌,張帥,曹雅忠,樊東,尹姣.  昆蟲學(xué)報(bào). 2016(03)
[9]紫薯花色苷-蛋白復(fù)合物的制備及結(jié)構(gòu)表征[J]. 郭瑩,江甜,李書藝,祝振洲,何靜仁.  食品科學(xué). 2016(21)
[10]班氏跳小蜂對扶桑綿粉蚧的寄生效能[J]. 高原,黃建,王竹紅,溫玉琪,鐘順.  武夷科學(xué). 2014(00)

碩士論文
[1]班氏跳小蜂氣味結(jié)合蛋白OBPs的結(jié)合特性分析[D]. 李秋玲.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]班氏跳小蜂寄主定位的嗅覺機(jī)制[D]. 聶曉培.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]溫度和寄主對扶桑綿粉蚧個體生長發(fā)育的影響[D]. 宋偉.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]不同棉花品種對棉蚜繭蜂的趨性行為反應(yīng)及機(jī)理研究[D]. 伏紅偉.揚(yáng)州大學(xué) 2012



本文編號：3699223