斑翅果蠅（Drosophila suzukii）為害草莓、藍(lán)莓、櫻桃、葡萄等軟皮水果,對(duì)水果產(chǎn)業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。與黑腹果蠅（Drosophila melanogaster）不同的是,斑翅果蠅雌蟲(chóng)喜歡將卵產(chǎn)于新鮮、即將成熟的水果中,其嗅覺(jué)感受行為發(fā)生了改變;順-11-十八碳烯酸乙酯（11-cis-vaccenyl acetate,c VA）是果蠅屬昆蟲(chóng)普遍存在的信息素,促進(jìn)黑腹果蠅雌蟲(chóng)交配,但在斑翅果蠅中缺失,且抑制斑翅果蠅雌蟲(chóng)交配。前人研究表明,黑腹果蠅氣味結(jié)合蛋白（odorant binding proteins,OBPs）Dm OBP56h、Dm OBP69a和Dm OBP76a參與信息素行為調(diào)控,但目前關(guān)于斑翅果蠅的嗅覺(jué)分子機(jī)制尚不清楚。鑒于此,本文以斑翅果蠅為研究對(duì)象,篩選差異表達(dá)DsOBPs,原核表達(dá)純化蛋白,檢測(cè)蛋白與c VA的結(jié)合能力,利用同源建模和分子對(duì)接技術(shù)計(jì)算關(guān)鍵的結(jié)合位點(diǎn),用虛擬突變分析變化的氨基酸位點(diǎn),通過(guò)熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合篩選潛在配體,為深入理解斑翅果蠅的嗅覺(jué)分子機(jī)制提供依據(jù)。主要結(jié)果如下:1.斑翅果蠅信息素結(jié)合蛋白篩選為探究斑翅果蠅中識(shí)別信息素的DsOBPs... 

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 斑翅果蠅的研究概況
        1.1.1 斑翅果蠅的發(fā)生與為害
        1.1.2 斑翅果蠅的化學(xué)生態(tài)學(xué)
        1.1.3 斑翅果蠅的防治
    1.2 果蠅信息素
        1.2.1 黑腹果蠅信息素
        1.2.2 斑翅果蠅信息素
    1.3 昆蟲(chóng)氣味結(jié)合蛋白
        1.3.1 黑腹果蠅氣味結(jié)合蛋白
        1.3.2 斑翅果蠅氣味結(jié)合蛋白
    1.4 研究目的與意義
    1.5 創(chuàng)新點(diǎn)
技術(shù)路線
第二章 斑翅果蠅信息素結(jié)合蛋白篩選
    2.1 材料與方法
        2.1.1 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)獲取
        2.1.2 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 轉(zhuǎn)錄組基因表達(dá)量
        2.2.2 DsOBPs表達(dá)量
    2.3 討論
第三章 斑翅果蠅DsOBPs基因克隆、蛋白表達(dá)與純化
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 斑翅果蠅總RNA提取
        3.1.3 第一鏈cDNA的合成
        3.1.4 引物設(shè)計(jì)
        3.1.5 斑翅果蠅DsOBPs基因克隆
        3.1.6 斑翅果蠅DsOBPs序列分析
        3.1.7 斑翅果蠅DsOBPs的原核表達(dá)
        3.1.8 斑翅果蠅DsOBPs的純化
        3.1.9 蛋白濃度測(cè)定
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 斑翅果蠅DsOBPs克隆與序列分析
        3.2.2 蛋白表達(dá)與純化
    3.3 討論
第四章 斑翅果蠅DsOBP76a與 cVA的結(jié)合機(jī)制
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 熒光猝滅
        4.1.3 同源建模
        4.1.4 分子對(duì)接
        4.1.5 虛擬突變
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 熒光猝滅
        4.2.2 同源建模
        4.2.3 分子對(duì)接
        4.2.4 虛擬突變
    4.3 討論
第五章 斑翅果蠅DsOBPs的結(jié)合特性分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.2 熒光探針適合性的檢測(cè)
        5.1.3 熒光競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 斑翅果蠅DsOBPs與熒光探針的適合性檢測(cè)
        5.2.2 斑翅果蠅DsOBPs的熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合
    5.3 討論
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]水果害蟲(chóng)鈴木氏果蠅的入侵及其防控研究進(jìn)展[J]. 任路明,秦勝楠,丁心婷,萬(wàn)方浩,褚棟.  生物安全學(xué)報(bào). 2014(03)
[2]斑翅果蠅（Drosophila suzukii）研究現(xiàn)狀[J]. 張開(kāi)春,閆國(guó)華,郭曉軍,王晶,張曉明,周宇.  果樹(shù)學(xué)報(bào). 2014(04)



本文編號(hào)：3690559