白屈菜為罌粟科白屈菜屬植物,是一種有著很高開發(fā)前景的新型藥用植物。白屈菜中的主要活性成分為白屈菜紅堿,白屈菜紅堿是一種苯并菲啶型生物堿,具有抗炎、抗真菌等生物學(xué)活性。本文研究的是白屈菜紅堿的抑菌活性及抑菌機(jī)理。分離篩選三種真菌,經(jīng)18SrDNA鑒定分別為稻黑孢菌屬、赤霉菌屬和球毛殼菌屬。將白屈菜紅堿加入PDA培養(yǎng)基中制成濃度分別為5 X 10-3 mg/mL,1.0×10-2mg/mL,1.5×10-2mg/mL,2.0×10-2mg/mL的帶藥培養(yǎng)基,利用分離得到的稻黑孢菌和赤霉菌進(jìn)行白屈菜紅堿抑菌活性實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示隨著白屈菜紅堿濃度增加,其抑菌效果越明顯,抑菌率越高,其中當(dāng)濃度為2.0×10-2mg/mL,白屈菜紅堿對(duì)稻黑孢菌的抑菌率高達(dá)95%,對(duì)赤霉菌的抑菌率為92%。本文從以下三個(gè)方面研究白屈菜紅堿的抑菌機(jī)理:（1）白屈菜紅堿對(duì)真菌細(xì)胞壁細(xì)胞膜的影響。（2）白屈菜紅堿對(duì)孢子內(nèi)ROS含量的影響。（3）白屈菜紅堿對(duì)DNA的影響。根據(jù)光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡的結(jié)果顯示白屈菜紅堿可以使稻黑孢菌菌絲產(chǎn)生褶皺,在透射電鏡下可以觀察到菌絲被白屈菜紅堿破壞產(chǎn)生的孔洞;測(cè)試水稻黑孢菌細(xì)胞壁的通透性,... 

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 白屈菜紅堿的介紹
        1.1.1 白屈菜的簡(jiǎn)介
        1.1.2 白屈菜紅堿的簡(jiǎn)介
    1.2 水稻黑孢菌和赤霉菌簡(jiǎn)介
        1.2.1 水稻黑孢菌簡(jiǎn)介
        1.2.2 赤霉菌簡(jiǎn)介
    1.3 白屈菜紅堿的提取方法
        1.3.1 微芯片電泳分離法
        1.3.2 微波輔助萃取法
        1.3.3 大孔樹脂吸附分離純化
    1.4 白屈菜紅堿的生物學(xué)活性
        1.4.1 抗炎作用
        1.4.2 抗菌作用
        1.4.3 抗癌作用
        1.4.4 對(duì)胃潰瘍的保護(hù)作用
        1.4.5 生物防治
    1.5 白屈菜紅堿的抑菌機(jī)理研究
        1.5.1 白屈菜紅堿對(duì)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的作用
        1.5.2 ROS在細(xì)胞體內(nèi)的積累及其檢測(cè)
        1.5.3 白屈菜紅堿對(duì)DNA的作用
    1.6 研究的內(nèi)容與意義
2 菌種的分離篩選與鑒定
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 水稻葉片
        2.1.2 試劑與儀器
        2.1.3 溶液的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 菌株的分離篩選與純化
        2.2.2 真菌的初步分類
        2.2.3 CTAB法提取真菌DNA
        2.2.4 真菌基因組ITS區(qū)段的獲得
        2.2.5 PCR產(chǎn)物的測(cè)序及序列分析
        2.2.6 真菌包子的產(chǎn)生與收集
        2.2.7 孢子計(jì)數(shù)
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 真菌的分離純化
        2.3.2 真菌的分子生物學(xué)鑒定
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
3 白屈菜紅堿抑菌活性研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 菌種
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 白屈菜紅堿抑菌活性檢測(cè)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 白屈菜紅堿對(duì)兩種真菌的抑菌活性檢測(cè)
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
4 白屈菜紅堿抑菌機(jī)理研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 供試菌株
        4.1.2 試劑與儀器
        4.1.3 培養(yǎng)基
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 白屈菜紅堿對(duì)菌絲形態(tài)的影響
        4.2.2 白屈菜紅堿對(duì)孢子萌發(fā)率的影響
        4.2.3 白屈菜紅堿對(duì)真菌細(xì)胞壁細(xì)胞膜通透性的影響
        4.2.4 白屈菜紅堿作用后孢子內(nèi)ROS檢測(cè)
        4.2.5 DNA片段化分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 白屈菜紅堿對(duì)水稻黑孢菌菌絲及孢子形態(tài)影響
        4.3.2 白屈菜紅堿對(duì)真菌細(xì)胞壁細(xì)胞膜通透性影響
        4.3.3 白屈菜紅堿對(duì)孢子萌發(fā)率的影響
        4.3.4 白屈菜紅堿作用后孢子內(nèi)ROS檢測(cè)
        4.3.5 DNA片段化分析
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]飛龍掌血抑菌成分作用機(jī)制研究[D]. 王培卿.河南大學(xué) 2014
[3]殼寡糖誘導(dǎo)的灰霉孢子胞內(nèi)活性氧動(dòng)態(tài)及蛋白質(zhì)差異表達(dá)研究[D]. 馬增新.中國(guó)海洋大學(xué) 2013
[4]血根堿和白屈菜紅堿及其衍生物的抑菌和殺螨活性[D]. 鄭峰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011
[5]白屈菜紅堿對(duì)變形鏈球菌形態(tài)學(xué)影響的電鏡觀察[D]. 徐冬雪.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2010
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