小麥藍(lán)矮植原體效應(yīng)蛋白SWP1與轉(zhuǎn)錄因子TCP12的互作研究
發(fā)布時(shí)間:2022-10-05 23:58
由植原體侵染引起的小麥藍(lán)矮。╳heat blue dwarf disease,WBD)是威脅小麥生產(chǎn)的一種重要病害,主要發(fā)生在我國(guó)的西北地區(qū),給農(nóng)業(yè)造成了巨大的損失。前期研究發(fā)現(xiàn),WBD植原體可以編碼多個(gè)分泌蛋白(SWP),其中SWP1可以引起本氏煙和擬南芥?zhèn)戎υ龆?是一個(gè)關(guān)鍵的致病效應(yīng)蛋白。為了深入了解SWP1效應(yīng)蛋白引起側(cè)枝增多的分子機(jī)理,我們對(duì)SWP1與植物因子的互作進(jìn)行了研究。TCP家族轉(zhuǎn)錄因子中的classⅡ亞類對(duì)植物葉片形態(tài)建成、分枝發(fā)育等過(guò)程具有重要的調(diào)控作用,其中的一些成員能與SWP1的同源蛋白——翠菊黃化植原體側(cè)枝增多株系編碼的SAP11蛋白以及蘋果叢生植原體編碼SAP11-like蛋白發(fā)生互作。為此,本文首先采用酵母雙雜技術(shù)探究了SWP1效應(yīng)蛋白與擬南芥ClassⅡTCP家族所有成員的互作關(guān)系,并圍繞其中一個(gè)與分枝調(diào)控相關(guān)的互作靶標(biāo)AtTCP12,展開其與SWP1的互作機(jī)理研究。主要研究結(jié)果如下:1.克隆了擬南芥ClassⅡTCPs家族的11個(gè)轉(zhuǎn)錄因子,并成功構(gòu)建到酵母雙雜誘餌載體pGADT7上。將11個(gè)誘餌質(zhì)粒pGADT7-TCPs分別與獵物質(zhì)粒pGBKT7-S...
【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 文章綜述
1.1 植原體病害
1.1.1 植原體及其病害
1.1.2 植原體基因組研究
1.1.3 植原體分泌蛋白進(jìn)展
1.2 小麥藍(lán)矮病
1.2.1 小麥藍(lán)矮病及其癥狀
1.2.2 小麥藍(lán)矮植原體基因組
1.2.3 小麥藍(lán)矮植原體分泌蛋白
1.3 TCP家族轉(zhuǎn)錄因子
1.3.1 TCP轉(zhuǎn)錄因子家族特點(diǎn)
1.3.2 TCP轉(zhuǎn)錄因子的分類
1.3.3 CYC/TB1-TCPs轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能
1.3.4 CIN-TCPs轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能
第二章 SWP1與擬南芥ClassⅡTCPs轉(zhuǎn)錄因子的互作探究
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌株和質(zhì)粒
2.1.3 試劑及配制
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 擬南芥ClassⅡTCPs家族轉(zhuǎn)錄因子的克隆
2.2.2 酵母雙雜載體的構(gòu)建
2.2.3 酵母轉(zhuǎn)化
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 酵母雙雜載體的構(gòu)建
2.3.2 酵母雙雜驗(yàn)證
2.4 討論
第三章 SWP1與AtTCP12的互作驗(yàn)證
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 雙分子熒光互補(bǔ)(BiFC)
3.2.2 共定位實(shí)驗(yàn)
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 BiFC驗(yàn)證SWP1與AtTCP12的互作
3.3.2 SWP1與AtTCP12的共定位
3.4 討論
第四章 SWP1與AtTCP12互作結(jié)構(gòu)域的鑒定
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 SWP1缺失突變體與AtTCP12的互作驗(yàn)證
4.2.2 AtTCP12缺失突變體與SWP1的互作驗(yàn)證
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)是SWP1與AtTCP12互作的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域
4.3.2 TCP結(jié)構(gòu)域是AtTCP12與SWP1互作的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域
4.4 討論
第五章 SWP1與AtTCP12互作機(jī)理的研究
5.1 實(shí)驗(yàn)材料
5.2 實(shí)驗(yàn)方法
5.2.1 SWP1轉(zhuǎn)基因?qū)tTCP12轉(zhuǎn)錄水平的影響研究
5.2.2 SWP1對(duì)AtTCP12蛋白水平的影響研究
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 SWP1轉(zhuǎn)基因擬南芥中AtTCP12的轉(zhuǎn)錄水平下調(diào)
5.3.2 SWP1下調(diào)AtTCP12的轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平
5.4 討論
第六章 全文結(jié)論與展望
6.1 主要結(jié)論
6.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
作者簡(jiǎn)介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]小麥藍(lán)矮植原體染色體DNA的分離[J]. 陳旺,李艷,吳云鋒. 微生物學(xué)通報(bào). 2013(04)
[2]桑樹萎縮病的研究進(jìn)展[J]. 張和禹,汪泰初,鮑先巡. 中國(guó)蠶業(yè). 2010(01)
[3]棗瘋病研究進(jìn)展[J]. 樊新萍,喬永勝,田建保. 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(S2)
[4]小麥藍(lán)矮病植原體的寄主范圍研究[J]. 吳云鋒,顧沛雯,安鳳秋,相建業(yè),羅朝鵬,楊英. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2005(S1)
[5]小麥藍(lán)矮病植原體16S rDNA基因片段的比較分析[J]. 顧沛雯,安鳳秋,吳云鋒,楊棟,羅朝鵬,相建業(yè),楊英. 植物病理學(xué)報(bào). 2005(05)
[6]泡桐叢枝病研究新進(jìn)展[J]. 田國(guó)忠,張錫津. 世界林業(yè)研究. 1996(02)
[7]類菌原體引起的小麥藍(lán)矮病[J]. 張秦風(fēng),張榮,任芝英,馬遠(yuǎn)莉,朱象三. 微生物學(xué)報(bào). 1993(05)
[8]小麥蘭矮病病原物——類菌原體的初報(bào)[J]. 安德榮,魏寧生,張秦風(fēng),張榮,朱象三. 植物病理學(xué)報(bào). 1991(04)
[9]小麥蘭矮病的研究[J]. 朱象三,張鵬林,任芝英,張守雷,劉輝. 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 1984(01)
[10]甘肅省冬小麥紅矮病(紅病)研究簡(jiǎn)報(bào)[J]. 甘肅省農(nóng)業(yè)試驗(yàn)總場(chǎng)、甘肅省平?jīng)鲛r(nóng)業(yè)試驗(yàn)站、甘肅省甘谷農(nóng)業(yè)試驗(yàn)站、西北農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所冬小麥紅矮病硏究工作組,劉漢文. 西北農(nóng)業(yè)科學(xué). 1958(02)
博士論文
[1]小麥藍(lán)矮植原體基因組序列測(cè)定及其分泌蛋白功能研究[D]. 陳旺.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
碩士論文
[1]小麥藍(lán)矮植原體效應(yīng)蛋白SWP1功能域的鑒定分析[D]. 劉文婷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
本文編號(hào):3686746
【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 文章綜述
1.1 植原體病害
1.1.1 植原體及其病害
1.1.2 植原體基因組研究
1.1.3 植原體分泌蛋白進(jìn)展
1.2 小麥藍(lán)矮病
1.2.1 小麥藍(lán)矮病及其癥狀
1.2.2 小麥藍(lán)矮植原體基因組
1.2.3 小麥藍(lán)矮植原體分泌蛋白
1.3 TCP家族轉(zhuǎn)錄因子
1.3.1 TCP轉(zhuǎn)錄因子家族特點(diǎn)
1.3.2 TCP轉(zhuǎn)錄因子的分類
1.3.3 CYC/TB1-TCPs轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能
1.3.4 CIN-TCPs轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能
第二章 SWP1與擬南芥ClassⅡTCPs轉(zhuǎn)錄因子的互作探究
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌株和質(zhì)粒
2.1.3 試劑及配制
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 擬南芥ClassⅡTCPs家族轉(zhuǎn)錄因子的克隆
2.2.2 酵母雙雜載體的構(gòu)建
2.2.3 酵母轉(zhuǎn)化
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 酵母雙雜載體的構(gòu)建
2.3.2 酵母雙雜驗(yàn)證
2.4 討論
第三章 SWP1與AtTCP12的互作驗(yàn)證
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 雙分子熒光互補(bǔ)(BiFC)
3.2.2 共定位實(shí)驗(yàn)
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 BiFC驗(yàn)證SWP1與AtTCP12的互作
3.3.2 SWP1與AtTCP12的共定位
3.4 討論
第四章 SWP1與AtTCP12互作結(jié)構(gòu)域的鑒定
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 SWP1缺失突變體與AtTCP12的互作驗(yàn)證
4.2.2 AtTCP12缺失突變體與SWP1的互作驗(yàn)證
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)是SWP1與AtTCP12互作的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域
4.3.2 TCP結(jié)構(gòu)域是AtTCP12與SWP1互作的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域
4.4 討論
第五章 SWP1與AtTCP12互作機(jī)理的研究
5.1 實(shí)驗(yàn)材料
5.2 實(shí)驗(yàn)方法
5.2.1 SWP1轉(zhuǎn)基因?qū)tTCP12轉(zhuǎn)錄水平的影響研究
5.2.2 SWP1對(duì)AtTCP12蛋白水平的影響研究
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 SWP1轉(zhuǎn)基因擬南芥中AtTCP12的轉(zhuǎn)錄水平下調(diào)
5.3.2 SWP1下調(diào)AtTCP12的轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平
5.4 討論
第六章 全文結(jié)論與展望
6.1 主要結(jié)論
6.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
作者簡(jiǎn)介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]小麥藍(lán)矮植原體染色體DNA的分離[J]. 陳旺,李艷,吳云鋒. 微生物學(xué)通報(bào). 2013(04)
[2]桑樹萎縮病的研究進(jìn)展[J]. 張和禹,汪泰初,鮑先巡. 中國(guó)蠶業(yè). 2010(01)
[3]棗瘋病研究進(jìn)展[J]. 樊新萍,喬永勝,田建保. 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(S2)
[4]小麥藍(lán)矮病植原體的寄主范圍研究[J]. 吳云鋒,顧沛雯,安鳳秋,相建業(yè),羅朝鵬,楊英. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2005(S1)
[5]小麥藍(lán)矮病植原體16S rDNA基因片段的比較分析[J]. 顧沛雯,安鳳秋,吳云鋒,楊棟,羅朝鵬,相建業(yè),楊英. 植物病理學(xué)報(bào). 2005(05)
[6]泡桐叢枝病研究新進(jìn)展[J]. 田國(guó)忠,張錫津. 世界林業(yè)研究. 1996(02)
[7]類菌原體引起的小麥藍(lán)矮病[J]. 張秦風(fēng),張榮,任芝英,馬遠(yuǎn)莉,朱象三. 微生物學(xué)報(bào). 1993(05)
[8]小麥蘭矮病病原物——類菌原體的初報(bào)[J]. 安德榮,魏寧生,張秦風(fēng),張榮,朱象三. 植物病理學(xué)報(bào). 1991(04)
[9]小麥蘭矮病的研究[J]. 朱象三,張鵬林,任芝英,張守雷,劉輝. 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 1984(01)
[10]甘肅省冬小麥紅矮病(紅病)研究簡(jiǎn)報(bào)[J]. 甘肅省農(nóng)業(yè)試驗(yàn)總場(chǎng)、甘肅省平?jīng)鲛r(nóng)業(yè)試驗(yàn)站、甘肅省甘谷農(nóng)業(yè)試驗(yàn)站、西北農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所冬小麥紅矮病硏究工作組,劉漢文. 西北農(nóng)業(yè)科學(xué). 1958(02)
博士論文
[1]小麥藍(lán)矮植原體基因組序列測(cè)定及其分泌蛋白功能研究[D]. 陳旺.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
碩士論文
[1]小麥藍(lán)矮植原體效應(yīng)蛋白SWP1功能域的鑒定分析[D]. 劉文婷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
本文編號(hào):3686746
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