真菌細(xì)胞內(nèi)存在著種類諸多的病毒或病毒類復(fù)制因子,統(tǒng)稱為真菌病毒。少部分真菌病毒能夠抑制寄主真菌的致病能力,引起病原菌致病力衰退。由于真菌病毒具有弱毒的特性,是一種重要的生防菌資源,因而受到了國(guó)內(nèi)外植�？茖W(xué)研究者的廣泛關(guān)注。自然界中真菌病毒的傳播途徑主要通過(guò)真菌菌絲融合進(jìn)行水平傳播,或者通過(guò)分生孢子進(jìn)行垂直傳播。然而,病原真菌常發(fā)生營(yíng)養(yǎng)體不親和反應(yīng),營(yíng)養(yǎng)體不親和性菌株在菌絲接觸時(shí)會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生程序性死亡,阻礙真菌病毒在不同菌株中擴(kuò)散,進(jìn)而影響了真菌病毒的生防效果。為明確真菌病毒是否可以感染植物細(xì)胞,以植物為介體在真菌和植物間跨界傳播。本研究利用真菌-植物-病毒互作研究體系得出以下結(jié)論:1.分別篩選了4種真菌病毒,包括減毒病毒屬（Hypoviridae）的兩個(gè)病毒:板栗疫病菌減毒病毒1（Cryphonectria hypovirus 1,CHV1）和鏈格孢菌減毒病毒1（Alternalia atanata hypovirus 1,Aa HV1）,及葡萄座腔菌病毒1（Botryosphaeria dothidea virus 1,Bd V1）和ds RNA線粒體真菌病毒立枯絲核菌線粒體病毒3... 

【文章頁(yè)數(shù)】：99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
主要符號(hào)對(duì)照表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 真菌病毒
        1.1.1 真菌病毒簡(jiǎn)介
        1.1.2 真菌病毒起源與進(jìn)化
    1.2 減毒真菌病毒CHV1
        1.2.1 減毒真菌病毒的發(fā)現(xiàn)
        1.2.2 減毒病毒CHV1基因組特征
    1.3 真菌病毒的生物防治
    1.4 真菌病毒的傳播方式
        1.4.1 真菌病毒的垂直傳播
        1.4.2 真菌病毒的水平傳播
        1.4.3 真菌病毒的胞外傳播
    1.5 病毒跨界侵染現(xiàn)象
    1.6 本研究的目的和意義
第二章 減毒病毒CHV1在植物細(xì)胞中復(fù)制
    2.1 材料、試劑和儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料和處理
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及培養(yǎng)基
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 真菌病毒總RNA的提取
        2.2.2 減毒病毒CHV1正義鏈體外轉(zhuǎn)錄物的制備
        2.2.3 真菌病毒摩擦接種普通煙
        2.2.4 植物單鏈RNA的提取
        2.2.5 真菌病毒侵染普通煙RT-PCR檢測(cè)
        2.2.6 檢測(cè)CHV1在普通煙接種葉中的復(fù)制情況
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 篩選能夠侵染普通煙的真菌病毒
        2.3.2 減毒病毒CHV1體外轉(zhuǎn)錄物侵染普通煙
        2.3.3 分析減毒病毒CHV1的寄主范圍
        2.3.4 真菌來(lái)源的減毒病毒CHV1在普通煙細(xì)胞中復(fù)制
        2.3.5 減毒病毒CHV1不能自發(fā)地系統(tǒng)性侵染普通煙
    2.4 討論與分析
第三章 外源運(yùn)動(dòng)蛋白協(xié)助減毒病毒CHV1系統(tǒng)性侵染植物
    3.1 材料、試劑和儀器
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料和處理
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及培養(yǎng)基
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 減毒病毒CHV1與植物病毒復(fù)合侵染普通煙
        3.2.2 減毒病毒CHV1與TMV復(fù)合侵染普通煙繼代實(shí)驗(yàn)
        3.2.3 減毒病毒CHV1侵染普通煙-30K
        3.2.4 減毒病毒CHV1-GFP及 CHV1 缺失突變體侵染性克隆結(jié)構(gòu)
        3.2.5 減毒病毒CHV1-GFP侵染普通煙-30K
        3.2.6 減毒病毒CHV1野生型及缺失突變體侵染普通煙-30K
        3.2.7 減毒病毒AaHV1摩擦接種普通煙-30K
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 減毒病毒CHV1與植物病毒復(fù)合侵染普通煙
        3.3.2 植物病毒與CHV1復(fù)合侵染不影響自身復(fù)制
        3.3.3 減毒病毒CHV1與植物病毒復(fù)合侵染普通煙繼代實(shí)驗(yàn)
        3.3.4 減毒病毒CHV1系統(tǒng)性侵染普通煙-30K
        3.3.5 減毒病毒CHV1在植物細(xì)胞中的分布
        3.3.6 減毒病毒AaHV1侵染普通煙-30K
        3.3.7 減毒病毒CHV1在普通煙-30K全植株中分布
        3.3.8 減毒病毒CHV1缺失突變體侵染普通煙-30K
        3.3.9 減毒病毒CHV1野生型及缺失突變體在普通煙-30K中積累量比較
        3.3.10 植物病毒TMV增加CHV1 及缺失突變體在植物細(xì)胞中的積累量
    3.4 討論與分析
第四章 減毒病毒CHV1 與植物病毒TMV在禾谷鐮刀菌Fusarium graminearum中復(fù)制
    4.1 材料、試劑和儀器
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料和處理
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 植物病毒TMV病毒粒子粗提
        4.2.2 禾谷鐮刀菌PH-1原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
        4.2.3 轉(zhuǎn)化子的初篩和鑒定
        4.2.4 真菌雙鏈RNA的提取
        4.2.5 真菌單鏈RNA的提取
        4.2.6 分析CHV1及缺失突變體在PH-1野生型中的積累量
        4.2.7 減毒病毒CHV1 及缺失突變體與TMV復(fù)合侵染PH-1 野生型
        4.2.8 蛋白水平檢測(cè)TMV在禾谷鐮刀菌中的表達(dá)情況
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1減毒病毒CHV1及其缺失突變體侵染禾谷鐮刀菌PH-1
        4.3.2 減毒病毒CHV1及缺失突變體在PH-1野生型中積累量比較
        4.3.3 植物病毒TMV侵染禾谷鐮刀菌PH-1野生型
        4.3.4 減毒病毒CHV1 增加TMV在 PH-1 中的積累
        4.3.5 真菌RNA沉默機(jī)制抑制TMV在禾谷鐮刀菌中的積累
    4.4 討論與分析
第五章 TMV幫助CHV1 在植物和真菌間跨界傳播
    5.1 材料、試劑和儀器
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料和處理
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        5.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 檢測(cè)CHV1從真菌細(xì)胞傳播到植物細(xì)胞中
        5.2.2 擬輪枝鐮孢菌與禾谷鐮刀菌營(yíng)養(yǎng)親和型分析
        5.2.3 禾谷鐮刀菌野生型與擬輪枝鐮孢菌接種普通煙
        5.2.4 菌株的分離培養(yǎng)和檢測(cè)
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.3.1 植物病毒幫助減毒病毒CHV1從真菌向植物傳播
        5.3.2 減毒病毒CHV1不能在營(yíng)養(yǎng)不親和型菌株間水平傳播
        5.3.3 植物病毒TMV幫助CHV1 借助植物在營(yíng)養(yǎng)不親和菌株間傳播
        5.3.4 減毒病毒CHV1幫助真菌從植物獲得植物病毒
    5.4 討論與分析
全文總結(jié)與討論
參考文獻(xiàn)
附錄 A
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]宏基因組學(xué):熱帶冬季瓜菜病害生物防治新策略[J]. 趙志祥,陳圓,肖敏,陳綿才.  分子植物育種. 2015(05)
[2]安徽省油菜菌核病菌對(duì)多菌靈的抗藥性監(jiān)測(cè)[J]. 齊永霞,陳方新,蘇賢巖,丁克堅(jiān),于杰,江茂盛.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2006(09)
[3]油菜菌核病菌對(duì)多菌靈的抗藥性監(jiān)測(cè)[J]. 石志琦,周明國(guó),葉鐘音,史建榮,陳懷谷,王裕中.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2000(04)

博士論文
[1]核盤菌兩個(gè)新型RNA病毒基因組的分子生物學(xué)特性研究[D]. 劉榮.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015

碩士論文
[1]侵染馬鈴薯立枯絲核菌病毒的篩選、鑒定及生物學(xué)性狀分析[D]. 楊柳.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2019



本文編號(hào)：3681864