禾谷鐮刀菌（F.graminearum）產(chǎn)生的單端孢霉烯族毒素會(huì)污染小麥籽粒,給人類及家畜健康帶來(lái)嚴(yán)重威脅。 Tri8基因編碼一種分泌型乙酰轉(zhuǎn)移酶,催化毒素前體雙乙酰DON（3,15-diAcDON）脫去一個(gè)乙酰基,形成3-乙酰DON（3-AcDON）或15-乙酰DON（15-AcDON）。本研究利用重疊PCR及無(wú)縫克隆技術(shù)構(gòu)建了 Tri8基因敲除載體pOSCAR-△ Tri8,通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法篩選獲得 Tri8基因敲除菌株P(guān)H-1-△ Tri8,最后利用液質(zhì)聯(lián)用儀對(duì)原始菌株和PH-1-△ Tri8菌株中的毒素類型進(jìn)行分析。結(jié)果表明,對(duì)照菌株毒素以DON為主,未檢測(cè)到3,15-diAcDON,而突變菌種毒素以3-AcDON和15-AcDON為主,并出現(xiàn)一定數(shù)量的3,15-diAcDON。本研究為后續(xù)3,15-diAcDON標(biāo)準(zhǔn)品的制備及利用,以及Tri8蛋白結(jié)構(gòu)和體外功能研究奠定了基礎(chǔ)。 

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 供試材料
    1.2 方 法
        1.2.1 基因敲除載體構(gòu)建
        1.2.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化
        1.2.3 基因敲除菌株與原始菌株的產(chǎn)毒類性 分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 基因敲除載體pOSCAR-△ Tri8的構(gòu)建
    2.2 基因敲除株系的篩選與鑒定結(jié)果
    2.3 基因敲除株系的產(chǎn)毒類型檢測(cè)結(jié)果
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]沿淮晚播小麥赤霉病發(fā)生特點(diǎn)及綠色防控技術(shù)[J]. 費(fèi)明振.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2019(08)
[2]小麥赤霉菌毒素合成機(jī)制及檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 范三紅,胡小平.  麥類作物學(xué)報(bào). 2018(03)
[3]利用Tri8基因區(qū)分中國(guó)小麥赤霉病菌的毒素化學(xué)型[J]. 劉楊楊,孫海燕,李偉,鄧淵鈺,張愛(ài)香,陳懷谷.  植物病理學(xué)報(bào). 2018(01)



本文編號(hào)：3679801