發(fā)布時間：2022-09-17 19:22

　　禾谷鐮刀菌（F.graminearum）產(chǎn)生的單端孢霉烯族毒素會污染小麥籽粒,給人類及家畜健康帶來嚴重威脅。 Tri8基因編碼一種分泌型乙酰轉(zhuǎn)移酶,催化毒素前體雙乙酰DON（3,15-diAcDON）脫去一個乙�；�,形成3-乙酰DON（3-AcDON）或15-乙酰DON（15-AcDON）。本研究利用重疊PCR及無縫克隆技術(shù)構(gòu)建了 Tri8基因敲除載體pOSCAR-△ Tri8,通過農(nóng)桿菌介導的遺傳轉(zhuǎn)化方法篩選獲得 Tri8基因敲除菌株PH-1-△ Tri8,最后利用液質(zhì)聯(lián)用儀對原始菌株和PH-1-△ Tri8菌株中的毒素類型進行分析。結(jié)果表明,對照菌株毒素以DON為主,未檢測到3,15-diAcDON,而突變菌種毒素以3-AcDON和15-AcDON為主,并出現(xiàn)一定數(shù)量的3,15-diAcDON。本研究為后續(xù)3,15-diAcDON標準品的制備及利用,以及Tri8蛋白結(jié)構(gòu)和體外功能研究奠定了基礎。 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 供試材料
    1.2 方 法
        1.2.1 基因敲除載體構(gòu)建
        1.2.2 農(nóng)桿菌介導的轉(zhuǎn)化
        1.2.3 基因敲除菌株與原始菌株的產(chǎn)毒類性 分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 基因敲除載體pOSCAR-△ Tri8的構(gòu)建
    2.2 基因敲除株系的篩選與鑒定結(jié)果
    2.3 基因敲除株系的產(chǎn)毒類型檢測結(jié)果
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]沿淮晚播小麥赤霉病發(fā)生特點及綠色防控技術(shù)[J]. 費明振.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2019(08)
[2]小麥赤霉菌毒素合成機制及檢測技術(shù)研究進展[J]. 范三紅,胡小平.  麥類作物學報. 2018(03)
[3]利用Tri8基因區(qū)分中國小麥赤霉病菌的毒素化學型[J]. 劉楊楊,孫海燕,李偉,鄧淵鈺,張愛香,陳懷谷.  植物病理學報. 2018(01)



本文編號：3679801