鱗翅目害蟲二化螟Chilo suppressalis（Walker）是危害我國水稻生產(chǎn)最嚴(yán)重的害蟲之一。蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis,Bt）產(chǎn)生的殺蟲蛋白（Cry）已經(jīng)成功地轉(zhuǎn)入到水稻中用于防治二化螟等害蟲。研究昆蟲對Cry蛋白的防御機(jī)制有利于更好地應(yīng)用轉(zhuǎn)基因抗蟲作物。昆蟲對Cry蛋白的細(xì)胞防御反應(yīng)主要受絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）路徑調(diào)控,而MAPK只是應(yīng)急信號通路之一,并不直接參與對抗成孔殺蟲蛋白,其下游基因才起真正的防御作用。實驗室前期研究發(fā)現(xiàn),p38 MAPK參與了二化螟對Cry1Ca的防御過程,但對Cry1Ca起防御作用的p38 MAPK下游基因并不清楚。MAPK下游基因的激活可能受p38MAPK通路磷酸化進(jìn)行調(diào)控的。因此,本研究首先利用差異磷酸化蛋白質(zhì)組篩選受Cry1Ca誘導(dǎo)的差異磷酸化蛋白、再通過RNA干擾技術(shù)鑒定候選蛋白與Cry蛋白毒力之間的關(guān)系、最后利用q PCR等技術(shù)分析目的基因的表達(dá)模式及其與p38 MAPK的上下游關(guān)系。研究結(jié)果對明確昆蟲對Cry蛋白的防御機(jī)制具有... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 文獻(xiàn)綜述
        1.1.1 Cry蛋白
        1.1.2 MAPK信號通路
        1.1.3 磷酸化蛋白質(zhì)組
        1.1.4 小熱激蛋白(sHsp)
        1.1.5 二化螟
    1.2 論文設(shè)計
        1.2.1 技術(shù)路線
        1.2.2 目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 供試?yán)ハx及飼養(yǎng)方法
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 實驗儀器及設(shè)備
    2.2 實驗方法與步驟
        2.2.1 磷酸化蛋白組的分析
        2.2.2 候選基因的多序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析
        2.2.3 候選基因序列片段克隆及篩選結(jié)果分析
        2.2.4 Elf2基因的時空表達(dá)及與p38基因調(diào)控關(guān)系的驗證
3 結(jié)果與分析
    3.1 磷酸化蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)分析
    3.2 候選基因的多序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.2.1 Up101基因多序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.2.2 Up105基因多序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.2.3 Gph基因多序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.2.4 Arp基因多序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.2.5 Elf2基因多序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.2.6 Sac基因多序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.2.7 Trtp基因多序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析
    3.3 候選基因的序列克隆及篩選分析
        3.3.1 二化螟中腸總RNA的提取
        3.3.2 qPCR引物特異性分析
        3.3.3 候選基因沉默效果分析
        3.3.4 候選基因在應(yīng)對Cry蛋白防御反應(yīng)的分析
    3.4 Elf2基因的時空表達(dá)及與p38基因調(diào)控關(guān)系的驗證結(jié)果分析
        3.4.1 Elf2基因時空表達(dá)模式分析
        3.4.2 Elf2與p38調(diào)控關(guān)系的分析
4 結(jié)論與討論
    4.1 主要結(jié)論與討論
    4.2 創(chuàng)新點
參考文獻(xiàn)
附錄 碩士期間發(fā)表論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2020年全國農(nóng)作物重大病蟲害發(fā)生趨勢預(yù)報[J]. 姜玉英,劉萬才,黃沖,陸明紅,劉杰,次仁卓嘎.  中國植保導(dǎo)刊. 2020(02)
[2]Activation and signaling of the p38 MAP kinase pathway[J]. Tyler ZARUBIN.  Cell Research. 2005(01)
[3]二化螟抗藥性監(jiān)測和對三唑磷抗性的遺傳分析[J]. 曹明章,沈晉良,張金振,呂梅,劉曉宇,周威君.  中國水稻科學(xué). 2004(01)
[4]二化螟對殺蟲單等4種殺蟲劑的抗藥性[J]. 李秀峰,韓召軍,陳長琨,李國清,王蔭長.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2001(01)



本文編號：3637941