中紅側(cè)溝繭蜂Microplitis mediator是棉鈴蟲Helicoverpa armigera等鱗翅目害蟲的重要寄生性天敵昆蟲,利用中紅側(cè)溝繭蜂進(jìn)行生物防治既能有效控制害蟲,又符合有害生物綠色防控的宗旨。在田間,中紅側(cè)溝繭蜂主要通過敏銳的嗅覺系統(tǒng)來識(shí)別外界的信息化學(xué)物并定位寄主,而嗅覺系統(tǒng)中的氣味運(yùn)載蛋白參與了初級(jí)階段的氣味識(shí)別,因此氣味運(yùn)載蛋白在昆蟲嗅覺識(shí)別行為中扮演著重要角色。Niemann–Pick type C2（NPC2）蛋白是一種小分子可溶性蛋白,在脊椎動(dòng)物中主要參與脂質(zhì)代謝。最近有研究表明,NPC2蛋白也參與節(jié)肢動(dòng)物的化學(xué)通訊,具有與氣味結(jié)合蛋白相似的功能。本文以中紅側(cè)溝繭蜂NPC2蛋白為研究對(duì)象,從RNA水平、蛋白水平和電生理水平系統(tǒng)解析了中紅側(cè)溝繭蜂NPC2蛋白的潛在功能。本試驗(yàn)主要研究結(jié)果如下:1.基于前期中紅側(cè)溝繭蜂轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果,利用cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)技術(shù)獲得了兩個(gè)NPC2基因序列全長(zhǎng),分別命名為MmedNPC2a和MmedNPC2b,其編碼的氨基酸個(gè)數(shù)分別為148和158,兩者氨基酸序列一致性為26.09%。系統(tǒng)發(fā)育分析表明,MmedNPC2a和M... 

【文章來源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫表
第一章 引言
    1.1 信息化學(xué)物質(zhì)研究現(xiàn)狀
        1.1.1 植物揮發(fā)物
        1.1.2 蟲害誘導(dǎo)植物揮發(fā)物
        1.1.3 植食性昆蟲揮發(fā)物
        1.1.4 信息化學(xué)物質(zhì)對(duì)天敵的引誘作用
    1.2 昆蟲的嗅覺感受系統(tǒng)
        1.2.1 昆蟲識(shí)別揮發(fā)物的嗅覺機(jī)制
        1.2.2 昆蟲識(shí)別揮發(fā)物的觸角感器
        1.2.3 與昆蟲識(shí)別揮發(fā)物相關(guān)的可溶性蛋白
        1.2.4 昆蟲中新發(fā)現(xiàn)的識(shí)別氣味揮發(fā)物的可溶蛋白
    1.3 研究思路
        1.3.1 研究背景
        1.3.2 研究意義
        1.3.3 研究?jī)?nèi)容
第二章 中紅側(cè)溝繭蜂NPC2基因克隆和序列分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試?yán)ハx和試劑
        2.1.2 中紅側(cè)溝繭蜂總RNA的提取
        2.1.3 中紅側(cè)溝繭蜂cDNA模板的合成
        2.1.4 中紅側(cè)溝繭蜂MmedNPC2a基因全長(zhǎng)的獲取和序列驗(yàn)證
        2.1.5 序列比對(duì)和進(jìn)化樹構(gòu)建
        2.1.6 組織表達(dá)譜
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 中紅側(cè)溝繭蜂觸角RNA的提取
        2.2.2 MmedNPC2a和MmedNPC2b序列分析
        2.2.3 MmedNPC2a和MmedNPC2b組織表達(dá)譜分析
    2.3 本章討論
第三章 中紅側(cè)溝繭蜂NPC2蛋白的重組表達(dá)及免疫定位
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試?yán)ハx和試劑
        3.1.2 克隆以及表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.1.3 表達(dá)與純化
        3.1.4 蛋白抗體的制備
        3.1.5 蛋白質(zhì)印跡分析
        3.1.6 膠體金免疫定位
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 原核表達(dá)結(jié)果
        3.2.2 蛋白印跡分析
        3.2.3 免疫定位結(jié)果
    3.3 本章討論
第四章 中紅側(cè)溝繭蜂MmedNPC2a的結(jié)合特性分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試?yán)ハx和試劑
        4.1.2 中紅側(cè)溝繭蜂MmedNPC2a蛋白的熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試驗(yàn)
        4.1.3 中紅側(cè)溝繭蜂MmedNPC2a蛋白的三維結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試驗(yàn)
        4.2.2 MmedNPC2a蛋白的三維結(jié)構(gòu)分析
    4.3 本章討論
第五章 中紅側(cè)溝繭蜂觸角對(duì)7種候選配體化合物EAG反應(yīng)
    5.1 材料與方法
        5.1.1 供試?yán)ハx和試劑
        5.1.2 觸角電位試驗(yàn)
        5.1.3 數(shù)據(jù)分析
    5.2 結(jié)果與分析
    5.3 本章討論
第六章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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