大豆菌核病生防放線菌的篩選及Micromonospora parathelypteridis新種的鑒定
發(fā)布時(shí)間:2022-02-17 19:30
大豆菌核病是由土傳性病原真菌核盤菌引起的,該菌株的寄主范圍較廣泛,可以侵染400多種植株,廣泛分布于全球各地。由于其可以產(chǎn)生一種休眠體組織菌核,可以長(zhǎng)時(shí)間存留在土壤中,因此難以得到有效控制。大豆是我們國(guó)家的重要農(nóng)作物,深受菌核病的危害導(dǎo)致每年產(chǎn)量大幅度降低。目前對(duì)于該疾病的防治主要以化學(xué)制劑為主,但由于化學(xué)試劑的使用導(dǎo)致成本的不斷提高且對(duì)環(huán)境的嚴(yán)重危害,使得其無(wú)法在實(shí)踐中更好的得以利用。相比而言,生物防治具有安全可靠、低毒無(wú)害等優(yōu)點(diǎn),因此采用生物防治的方法來(lái)控制大豆菌核病具有十分重要的意義。本研究選取了5種高效的篩選培養(yǎng)基對(duì)大豆健康植株和感染菌核病的病態(tài)植株的根部?jī)?nèi)生菌進(jìn)行了分離,將獲得的菌株通過(guò)培養(yǎng)特征、形態(tài)特征的觀察后去重,對(duì)各樣品分離獲得的菌落數(shù)、菌株數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析比較。然后利用大豆菌核病的病原真菌作為供試菌株,將分離得到的大豆根部?jī)?nèi)生放線菌分別進(jìn)行體外平板抑菌活性以及發(fā)酵液抑菌活性的測(cè)定,結(jié)合大豆苗期試驗(yàn),對(duì)獲得的拮抗菌株的抗病、促生、定殖能力進(jìn)行評(píng)估。然后對(duì)拮抗菌進(jìn)行分子生物學(xué)、形態(tài)培養(yǎng)特征、生理生化特性的描述,為今后大豆菌核病的生物防治提供新資源。此外,本實(shí)驗(yàn)還對(duì)一株小單孢...
【文章來(lái)源】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:87 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
英文摘要
1 前言
1.1 大豆菌核病的研究進(jìn)展
1.1.1 大豆菌核病病原真菌簡(jiǎn)介
1.1.2 大豆菌核病病原真菌的生物學(xué)特征
1.1.3 大豆菌核病病原真菌致病機(jī)理
1.1.4 大豆菌核病的病癥及分布
1.2 大豆菌核病的防治
1.2.1 大豆菌核病的農(nóng)業(yè)防治
1.2.2 大豆菌核病的化學(xué)防治
1.2.3 大豆菌核病的生物防治
1.3 植物內(nèi)生放線菌的生物學(xué)功能
1.3.1 植物內(nèi)生放線菌
1.3.2 植物內(nèi)生放線菌抗病害作用
1.3.3 植物內(nèi)生放線菌促進(jìn)植物生長(zhǎng)作用
1.4 研究目的意義及內(nèi)容
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 分離樣品及供試大豆品種
2.1.2 供試菌株
2.2 試劑與儀器
2.2.1 試劑
2.2.2 主要儀器
2.3 主要培養(yǎng)基及制備方法
2.4 大豆樣品根部?jī)?nèi)生放線菌的分離純化
2.4.1 取樣及樣品預(yù)處理
2.4.2 放線菌的分離培養(yǎng)
2.4.3 菌種的保藏方法
2.5 放線菌抑菌活性檢測(cè)
2.5.1 篩選菌株的發(fā)酵液培養(yǎng)
2.5.2 抑制細(xì)菌活性檢測(cè)
2.5.3 抑制真菌活性檢測(cè)
2.6 放線菌的抗病促生能力評(píng)估
2.6.1 放線菌的防效檢測(cè)
2.6.2 放線菌的促生能力
2.6.3 放線菌在大豆根部的定殖能力
2.7 Micromonospora parathelypteridis的多相分類學(xué)鑒定
2.7.1 形態(tài)和培養(yǎng)特征鑒定
2.7.2 生理生化特性鑒定
2.7.3 化學(xué)分類學(xué)鑒定
2.7.4 分子水平鑒定
3 結(jié)果與分析
3.1 放線菌的分離結(jié)果與分析
3.2 抑菌活性的測(cè)定
3.2.1 抑制真菌活性檢測(cè)
3.2.2 抑制細(xì)菌活性檢測(cè)
3.3 拮抗菌的抗病促生能力評(píng)估
3.3.1 拮抗菌的抗病能力
3.3.2 拮抗菌的促生能力
3.3.3 拮抗菌在大豆根部定殖能力
3.4 拮抗菌的性質(zhì)描述
3.4.1 16S rRNA序列測(cè)定與系統(tǒng)發(fā)育分析
3.4.2 形態(tài)及培養(yǎng)特征
3.4.3 生理生化特性
3.5 Micromonospora parathelypteridis的多相分類學(xué)鑒定
3.5.1 16S rRNA和gyrB基因的測(cè)序及系統(tǒng)進(jìn)化分析
3.5.2 形態(tài)、培養(yǎng)特征及抑菌活性
3.5.3 生理生化特征
3.5.4 化學(xué)分類特征
3.5.5(G+C)mol%的測(cè)定
3.5.6 DNA同源性分析
4 討論
4.1 發(fā)病植株對(duì)活性微生物的招募作用
4.2 菌株定殖能力與抗病作用的關(guān)系
4.3 ZBDPA 2-2 生物潛能分析
4.4 小單孢菌屬(Micromonospora)的新種鑒定
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]解淀粉芽孢桿菌BA-16-8所產(chǎn)脂肽豐原素對(duì)擴(kuò)展青霉呼吸及營(yíng)養(yǎng)利用的影響研究[J]. 付瑞敏,陳五嶺. 食品科技. 2016(11)
[2]雷帕霉素對(duì)4種植物病原真菌的抑菌活性[J]. 王彥,徐曦,張立欽,王勇軍. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào). 2016(03)
[3]水稻內(nèi)生放線菌OsiRt-1的分離鑒定及對(duì)稻瘟病的防治作用[J]. 王真真,徐婷,袁珊珊,廖紅東,楊遠(yuǎn)柱,曾夏冬,李燕,胡小淳,柳倩,曾嘉銳,朱詠華,劉選明. 微生物學(xué)通報(bào). 2016(05)
[4]大豆菌核病發(fā)病原因與防治對(duì)策[J]. 冷國(guó)鳳. 農(nóng)民致富之友. 2016(07)
[5]大豆菌核病發(fā)病特點(diǎn)與防治[J]. 于雙城. 農(nóng)民致富之友. 2016(02)
[6]曲張鏈菌素產(chǎn)生菌壯觀鏈霉菌NRRL2494菌株遺傳操作體系的建立[J]. 宋姣姣,康前進(jìn),張連茹,吳瑩瑩,白林泉. 廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(01)
[7]冬青衛(wèi)矛內(nèi)生放線菌Streptomyces flavofuscus G1發(fā)酵液中抑菌活性成分研究[J]. 曹艷,魏少鵬,姬志勤. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào). 2015(05)
[8]卡伍爾鏈霉菌TJ430的分離鑒定及抗菌活性研究[J]. 楊少彬,黃永春,陳志永,梁軍鋒. 中國(guó)抗生素雜志. 2015(07)
[9]新型殺菌劑苯噻菌酯的抑菌活性及生物學(xué)特性[J]. 徐從英,侯毅平,王建新,陳長(zhǎng)軍,周明國(guó). 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào). 2014(06)
[10]油菜菌核病菌拮抗放線菌HPS02的分離、鑒定及其代謝產(chǎn)物性質(zhì)研究[J]. 何超,周鑫鈺,黃軍,劉雙清,朱宏建. 植物保護(hù). 2014(04)
博士論文
[1]四種農(nóng)業(yè)生境昆蟲(chóng)內(nèi)生放線菌的篩選、鑒定及抗菌活性研究[D]. 房保柱.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]大豆根部?jī)?nèi)生放線菌的篩選、鑒定及其活性代謝產(chǎn)物研究[D]. 劉重喜.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]連作甜瓜蔓根真菌病害發(fā)生與放線菌生物防治研究[D]. 趙娟.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[4]攀西地區(qū)藥用植物內(nèi)生及根際放線菌的多樣性與抗菌活性研究[D]. 趙珂.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[5]黑龍江省大豆核盤菌生物學(xué)特性和生物防治的研究[D]. 張軍政.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2009
[6]辣椒和番茄青枯病等土傳病害的生物防治研究[D]. 李師默.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[7]哈茨木霉生物防治相關(guān)蛋白酶的基因克隆及功能研究[D]. 劉燕.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2008
[8]哈茨木霉Chit37基因與Thi4基因的克隆與表達(dá)[D]. 黃彩紅.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]生防菌NEAU-Da4對(duì)大豆內(nèi)生放線菌的影響及特異放線菌鑒定[D]. 關(guān)雪嬌.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]重樓根部放線菌的分離、活性研究及Catellatospora paridis新種的鑒定[D]. 郭思妤.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]日本弓背蟻共生放線菌的多樣性分析及抑菌活性研究[D]. 郭麗楓.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]一株抗黃萎病的番茄內(nèi)生放線菌的分離、篩選和鑒定[D]. 曹鵬.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[5]白花前胡根際和內(nèi)生放線菌的分離、活性及兩個(gè)新種鑒定[D]. 周樹(shù)宇.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[6]三株稀有放線菌的新種鑒定及分離菌株的活性初探[D]. 王書(shū)睿.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]Actinoplanes lutulentus和Micromonospora jinlongensis的分類學(xué)鑒定及分離菌株活性的初步研究[D]. 高瑞霞.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[8]大豆菌核病生防放線菌的分離與鑒定[D]. 王娜.吉林大學(xué) 2013
[9]幾種農(nóng)作物內(nèi)生放線菌的分離及新種鑒定[D]. 趙軍偉.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[10]農(nóng)作物內(nèi)生放線菌的篩選及新屬鑒定[D]. 賈飛宇.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
本文編號(hào):3629980
【文章來(lái)源】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:87 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
英文摘要
1 前言
1.1 大豆菌核病的研究進(jìn)展
1.1.1 大豆菌核病病原真菌簡(jiǎn)介
1.1.2 大豆菌核病病原真菌的生物學(xué)特征
1.1.3 大豆菌核病病原真菌致病機(jī)理
1.1.4 大豆菌核病的病癥及分布
1.2 大豆菌核病的防治
1.2.1 大豆菌核病的農(nóng)業(yè)防治
1.2.2 大豆菌核病的化學(xué)防治
1.2.3 大豆菌核病的生物防治
1.3 植物內(nèi)生放線菌的生物學(xué)功能
1.3.1 植物內(nèi)生放線菌
1.3.2 植物內(nèi)生放線菌抗病害作用
1.3.3 植物內(nèi)生放線菌促進(jìn)植物生長(zhǎng)作用
1.4 研究目的意義及內(nèi)容
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)材料
2.1.1 分離樣品及供試大豆品種
2.1.2 供試菌株
2.2 試劑與儀器
2.2.1 試劑
2.2.2 主要儀器
2.3 主要培養(yǎng)基及制備方法
2.4 大豆樣品根部?jī)?nèi)生放線菌的分離純化
2.4.1 取樣及樣品預(yù)處理
2.4.2 放線菌的分離培養(yǎng)
2.4.3 菌種的保藏方法
2.5 放線菌抑菌活性檢測(cè)
2.5.1 篩選菌株的發(fā)酵液培養(yǎng)
2.5.2 抑制細(xì)菌活性檢測(cè)
2.5.3 抑制真菌活性檢測(cè)
2.6 放線菌的抗病促生能力評(píng)估
2.6.1 放線菌的防效檢測(cè)
2.6.2 放線菌的促生能力
2.6.3 放線菌在大豆根部的定殖能力
2.7 Micromonospora parathelypteridis的多相分類學(xué)鑒定
2.7.1 形態(tài)和培養(yǎng)特征鑒定
2.7.2 生理生化特性鑒定
2.7.3 化學(xué)分類學(xué)鑒定
2.7.4 分子水平鑒定
3 結(jié)果與分析
3.1 放線菌的分離結(jié)果與分析
3.2 抑菌活性的測(cè)定
3.2.1 抑制真菌活性檢測(cè)
3.2.2 抑制細(xì)菌活性檢測(cè)
3.3 拮抗菌的抗病促生能力評(píng)估
3.3.1 拮抗菌的抗病能力
3.3.2 拮抗菌的促生能力
3.3.3 拮抗菌在大豆根部定殖能力
3.4 拮抗菌的性質(zhì)描述
3.4.1 16S rRNA序列測(cè)定與系統(tǒng)發(fā)育分析
3.4.2 形態(tài)及培養(yǎng)特征
3.4.3 生理生化特性
3.5 Micromonospora parathelypteridis的多相分類學(xué)鑒定
3.5.1 16S rRNA和gyrB基因的測(cè)序及系統(tǒng)進(jìn)化分析
3.5.2 形態(tài)、培養(yǎng)特征及抑菌活性
3.5.3 生理生化特征
3.5.4 化學(xué)分類特征
3.5.5(G+C)mol%的測(cè)定
3.5.6 DNA同源性分析
4 討論
4.1 發(fā)病植株對(duì)活性微生物的招募作用
4.2 菌株定殖能力與抗病作用的關(guān)系
4.3 ZBDPA 2-2 生物潛能分析
4.4 小單孢菌屬(Micromonospora)的新種鑒定
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]解淀粉芽孢桿菌BA-16-8所產(chǎn)脂肽豐原素對(duì)擴(kuò)展青霉呼吸及營(yíng)養(yǎng)利用的影響研究[J]. 付瑞敏,陳五嶺. 食品科技. 2016(11)
[2]雷帕霉素對(duì)4種植物病原真菌的抑菌活性[J]. 王彥,徐曦,張立欽,王勇軍. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào). 2016(03)
[3]水稻內(nèi)生放線菌OsiRt-1的分離鑒定及對(duì)稻瘟病的防治作用[J]. 王真真,徐婷,袁珊珊,廖紅東,楊遠(yuǎn)柱,曾夏冬,李燕,胡小淳,柳倩,曾嘉銳,朱詠華,劉選明. 微生物學(xué)通報(bào). 2016(05)
[4]大豆菌核病發(fā)病原因與防治對(duì)策[J]. 冷國(guó)鳳. 農(nóng)民致富之友. 2016(07)
[5]大豆菌核病發(fā)病特點(diǎn)與防治[J]. 于雙城. 農(nóng)民致富之友. 2016(02)
[6]曲張鏈菌素產(chǎn)生菌壯觀鏈霉菌NRRL2494菌株遺傳操作體系的建立[J]. 宋姣姣,康前進(jìn),張連茹,吳瑩瑩,白林泉. 廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(01)
[7]冬青衛(wèi)矛內(nèi)生放線菌Streptomyces flavofuscus G1發(fā)酵液中抑菌活性成分研究[J]. 曹艷,魏少鵬,姬志勤. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào). 2015(05)
[8]卡伍爾鏈霉菌TJ430的分離鑒定及抗菌活性研究[J]. 楊少彬,黃永春,陳志永,梁軍鋒. 中國(guó)抗生素雜志. 2015(07)
[9]新型殺菌劑苯噻菌酯的抑菌活性及生物學(xué)特性[J]. 徐從英,侯毅平,王建新,陳長(zhǎng)軍,周明國(guó). 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào). 2014(06)
[10]油菜菌核病菌拮抗放線菌HPS02的分離、鑒定及其代謝產(chǎn)物性質(zhì)研究[J]. 何超,周鑫鈺,黃軍,劉雙清,朱宏建. 植物保護(hù). 2014(04)
博士論文
[1]四種農(nóng)業(yè)生境昆蟲(chóng)內(nèi)生放線菌的篩選、鑒定及抗菌活性研究[D]. 房保柱.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]大豆根部?jī)?nèi)生放線菌的篩選、鑒定及其活性代謝產(chǎn)物研究[D]. 劉重喜.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]連作甜瓜蔓根真菌病害發(fā)生與放線菌生物防治研究[D]. 趙娟.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[4]攀西地區(qū)藥用植物內(nèi)生及根際放線菌的多樣性與抗菌活性研究[D]. 趙珂.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[5]黑龍江省大豆核盤菌生物學(xué)特性和生物防治的研究[D]. 張軍政.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2009
[6]辣椒和番茄青枯病等土傳病害的生物防治研究[D]. 李師默.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[7]哈茨木霉生物防治相關(guān)蛋白酶的基因克隆及功能研究[D]. 劉燕.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2008
[8]哈茨木霉Chit37基因與Thi4基因的克隆與表達(dá)[D]. 黃彩紅.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]生防菌NEAU-Da4對(duì)大豆內(nèi)生放線菌的影響及特異放線菌鑒定[D]. 關(guān)雪嬌.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]重樓根部放線菌的分離、活性研究及Catellatospora paridis新種的鑒定[D]. 郭思妤.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]日本弓背蟻共生放線菌的多樣性分析及抑菌活性研究[D]. 郭麗楓.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]一株抗黃萎病的番茄內(nèi)生放線菌的分離、篩選和鑒定[D]. 曹鵬.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[5]白花前胡根際和內(nèi)生放線菌的分離、活性及兩個(gè)新種鑒定[D]. 周樹(shù)宇.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[6]三株稀有放線菌的新種鑒定及分離菌株的活性初探[D]. 王書(shū)睿.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]Actinoplanes lutulentus和Micromonospora jinlongensis的分類學(xué)鑒定及分離菌株活性的初步研究[D]. 高瑞霞.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[8]大豆菌核病生防放線菌的分離與鑒定[D]. 王娜.吉林大學(xué) 2013
[9]幾種農(nóng)作物內(nèi)生放線菌的分離及新種鑒定[D]. 趙軍偉.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[10]農(nóng)作物內(nèi)生放線菌的篩選及新屬鑒定[D]. 賈飛宇.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
本文編號(hào):3629980
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