灰毛豆（Tephrosia purpurea）是魚(yú)藤酮類(lèi)的資源植物。本實(shí)驗(yàn)室前期從灰毛豆中分離出一批內(nèi)生真菌,通過(guò)初篩,發(fā)現(xiàn)其中一種菌株TPL04有潛在的研究?jī)r(jià)值。因此,本文以菌株TPL04為研究對(duì)象,大量發(fā)酵收集其次生代謝產(chǎn)物,并利用多種分離手段,以期獲得活性單體化合物。研究結(jié)果如下:（1）菌株TPL04源于灰毛豆葉片,通過(guò)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)手段鑒定其為淡紫擬青霉菌（Purpureocillium lilacinum）。菌株TPL04大量發(fā)酵后,收集菌絲甲醇提取物、發(fā)酵液的乙酸乙酯和正丁醇的萃取物共48.4 g。（2）以馬鈴薯腐爛莖線蟲(chóng)（Ditylenchus destructor）為對(duì)象進(jìn)行毒殺活性測(cè)定,在粗提物濃度為18.0 mg/mL,24 h的校正死亡率達(dá)94.59%,其毒力回歸方程為Y=0.3147+4.9354X（X²=1.8963）,LC₅₀值為8.90 mg/mL。（3）從該菌株代謝產(chǎn)物中共分離鑒定8個(gè)化合物:5-羥基己酸-4-內(nèi)酯（1）、（R）-4-芐基-2-噁唑烷酮（2）、2’-脫氧胸苷（3）、對(duì)羥基苯甲酸甲酯（4）、光... 

【文章來(lái)源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

多糖EP-1結(jié)構(gòu)圖

測(cè)試法。紙片，直徑 6.0 mm，滅菌備用；L04粗提物溶于甲醇中，加入10 uL吐溫80助溶，制成下，用鑷子夾取濾紙片，浸入藥液中，待溶劑揮發(fā)個(gè)皿放 3 片，呈三角形擺放；取植物病原菌菌餅(直徑 7 mm)放入 3 片濾紙片中心復(fù)。析4 生物形態(tài)及同源性比對(duì) 在恒溫培養(yǎng)箱中 27℃黑暗培養(yǎng) 5 d，取出觀察。圖 2A 上的生長(zhǎng)情況以及在電子顯微鏡下的生物形態(tài)。

圖 2-2 菌株 TPL04 在電子顯微鏡下的生物形態(tài)g.2-2 Biological morphology of strain TPL04 under Electron ，通過(guò)肉眼可觀察到，菌株 TPL04 在 PDA 平板上白色，呈輪紋狀；在電鏡照片中，分生孢子梗呈指菌絲有隔且表面粗糙。將觀察到的形態(tài)特征與相關(guān)可確定灰毛豆葉片中分離得到的菌株 TPL04 為絲ycetales)叢梗孢科(Monilaceae)、淡紫擬青霉屬(Pureocillium lilacinum)[1]。序返回的序列結(jié)果全長(zhǎng) 595 bp，將此序列提交到 GeneBank 中淡紫擬青霉菌(Purpureocillium lilacin上選取 6 個(gè)已知的同屬菌株進(jìn)行同源性分析，利用果顯示(圖 2-3)菌株 TPL04 與淡紫擬青霉菌屬于同察菌株 TPL04 菌落特征及顯微鏡形態(tài)，判定菌株llium lilacinum)，目前保存于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[3]淡紫擬青霉對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)侵染機(jī)制的研究[D]. 劉曉莉.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]根結(jié)線蟲(chóng)寄生真菌資源與淡紫擬青霉PL89的研究[D]. 肖順.福建農(nóng)林大學(xué) 2006

碩士論文
[1]淡紫擬青霉液體發(fā)酵工藝及其制劑的研究[D]. 郭志斌.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]淡紫擬青霉518的抗菌活性及其次生代謝產(chǎn)物研究[D]. 李小龍.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]淡紫擬青霉的發(fā)酵條件研究及其與線蟲(chóng)互作機(jī)理研究方法的初探[D]. 梁照文.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[4]淡紫擬青霉E7菌株生物學(xué)特性及其防治植物根結(jié)線蟲(chóng)的應(yīng)用研究[D]. 鄧國(guó)平.華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3628210