桔小實蠅Bactrocera dorsalis（Hendel）是一種重要的世界性農(nóng)業(yè)害蟲,隸屬于雙翅目Diptera,實蠅科Trypetidae,果實蠅屬Bactrocera Macquart。桔小實蠅可危害包括柑橘、番荔枝、楊桃、芒果以及枇杷等在內(nèi)的多種重要果蔬,其成蟲繁殖力高,適應(yīng)能力強,造成的經(jīng)濟損失嚴(yán)重,已被多個國家和地區(qū)列為檢疫性害蟲。交配是昆蟲選擇最佳配偶以及產(chǎn)生后代最基本的行為方式。雄蟲在交配過程中將精液轉(zhuǎn)移至雌蟲體內(nèi),以完成世代延續(xù)。精液中除用于授精的精子外,其它主要成分為雄性附腺合成并分泌的附腺液,雄性附腺蛋白（male accessory gland proteins,Acps）是附腺液中主要的功能活性分子,與其它因子如保幼激素（Juvenile hormone,JH）等共同影響雌雄蟲的交配過程。本課題組前期利用轉(zhuǎn)錄組—蛋白質(zhì)組關(guān)聯(lián)分析的方法在桔小實蠅雄性附腺中鑒定到1個新的功能未知的Acp,根據(jù)功能保守性預(yù)測其具有典型的JHBP結(jié)構(gòu)域,故命名為BdJHBP-like。本學(xué)位論文運用RT-PCR技術(shù)克隆獲得BdJHBP-like開放閱讀框（open reading ... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 桔小實蠅的重要性
    2 昆蟲雄性附腺蛋白
    3 昆蟲保幼激素結(jié)合蛋白的研究概述
    4 本研究的目的和意義
第二章 桔小實蠅BdJHBP-like克隆及表達(dá)模式分析
    1.材料與方法
        1.1 供試蟲源
        1.2 試驗主要儀器和試劑
        1.3 樣品收集及總RNA提取
        1.4 基因組DNA去除及c DNA合成
        1.5 引物設(shè)計和合成
        1.6 目的片段克隆
        1.7 序列分析及進(jìn)化樹構(gòu)建
        1.8 實時定量PCR
    2 結(jié)果與分析
        2.1 BdJHBP-like生物信息學(xué)分析
        2.2 BdJHBP-like系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.3 BdJHBP-like的時空表達(dá)模式分析
    3 討論與小結(jié)
第三章 不同誘導(dǎo)條件對BdJHBP-like表達(dá)的影響
    1 材料和方法
        1.1 供試?yán)ハx
        1.2 實驗試劑以及儀器
        1.3 生物節(jié)律
        1.4 JH類似物烯蟲脂及20E處理
        1.5 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 BdJHBP-like響應(yīng)生物節(jié)律的表達(dá)模式
        2.2 保幼激素類似物烯蟲酯對BdJHBP-like表達(dá)量的影響
        2.3 外源激素20E對 BdJHBP-like表達(dá)量的影響
    3 討論與小結(jié)
第四章 BdJHBP-like參與雄成蟲生殖行為的生理功能
    1 材料和方法
        1.1 供試?yán)ハx
        1.2 主要試劑以及儀器
        1.3 dsRNA合成
        1.4 RNAi測定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 桔小實蠅BdJHBP-like沉默效率檢測
        2.2 桔小實蠅雄成蟲RNAi
    3 討論與小結(jié)
第五章 利用CRISPR/Cas9 系統(tǒng)敲除桔小實蠅BdJHBP-like
    1 材料和方法
        1.1 試驗材料
        1.2 主要試劑以及儀器
        1.3 試驗方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 靶標(biāo)位點選擇及sgRNA的合成
        2.2 胚胎注射及突變檢測
        2.3 遺傳篩選
    3 討論與小結(jié)
第六章 主要結(jié)論以及研究展望
    1 主要結(jié)論
    2 研究展望
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]桔小實蠅綜合防控措施[J]. 黎東生.  福建農(nóng)業(yè)科技. 2014(02)
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[4]灰飛虱保幼激素結(jié)合蛋白基因的克隆及表達(dá)動態(tài)[J]. 賀秀婷,張亞楠,李飛,李國清,董雙林.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2012(02)
[5]沙蟋飛行肌中保幼激素滴度的晝夜節(jié)律[J]. 張保常,蔣成吉,張青文,趙章武.  昆蟲學(xué)報. 2011(07)
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[7]桔小實蠅研究進(jìn)展[J]. 張彬,劉映紅,趙嵐嵐,周旭.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2008(11)
[8]保幼激素和蛻皮激素對德國小蠊聚集信息素生物合成的影響[J]. 楊惠,張金桐,鄧兵,李宏.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 2008(01)
[9]桔小實蠅生物學(xué)特點及其防治研究概述[J]. 謝琦,張潤杰.  生態(tài)科學(xué). 2005(01)
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本文編號：3627440