解淀粉芽孢桿菌FZB42抗菌脂肽bacillomycinD對禾谷鐮孢菌拮抗機(jī)制的研究
發(fā)布時(shí)間:2022-02-10 14:54
芽胞桿菌屬生防菌(Bacillus)是植物根圍促生細(xì)菌(plant growth promoting rhizobacteria,PGPR)的典型代表,該類生防菌能產(chǎn)生豐富的抗菌物質(zhì),還能形成適應(yīng)性和抗逆性強(qiáng)的芽孢,是最具應(yīng)用價(jià)值的生防菌。絲狀真菌禾谷鐮孢菌(Fusarium graminearum)可引起小麥、大麥等作物的赤霉病,玉米莖、莖基部和根部的腐爛病,小麥以及玉米幼苗的枯萎病等,嚴(yán)重影響作物的產(chǎn)量,造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。該病原菌還能產(chǎn)生對人畜健康造成嚴(yán)重威脅的真菌毒素,如DON等。防治禾谷鐮孢菌引起的病害一直以化學(xué)防治為主,但化學(xué)農(nóng)藥的長期使用也導(dǎo)致了嚴(yán)重的農(nóng)藥殘留以及抗藥性問題。因此,急需開發(fā)安全、有效的防治藥劑和措施。而芽胞桿菌類生防制劑是可供研究的途徑之一。本研究前期發(fā)現(xiàn)解淀粉芽胞桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)FZB42對禾谷鐮孢菌具有較強(qiáng)的抑制活性。在本研究中,我們對FZB42菌株抑制禾谷鐮孢菌的活性物質(zhì)進(jìn)行了鑒定,并研究了其拮抗機(jī)理。研究發(fā)現(xiàn),解淀粉芽胞桿菌FZB42活菌及其粗提物對禾谷鐮孢菌都具有較強(qiáng)的抑制作用。為了鑒定抑菌活性物質(zhì),我們...
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省211工程院校教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:93 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
緒論
上篇 文獻(xiàn)綜述
第一章 植物根圍促生細(xì)菌的防病促生機(jī)理概述
1 植物病害生防細(xì)菌的研發(fā)概況
2 生防細(xì)菌對植物根圍微生態(tài)的影響
3 生防芽胞桿菌與植物互作機(jī)理研究進(jìn)展
4 生防芽胞桿菌誘導(dǎo)植物抗病性的產(chǎn)生
5 根際拮抗芽胞桿菌的促生機(jī)理
第二章 非核糖體肽類抗生素的結(jié)構(gòu)、功能與調(diào)控
1 脂肽類抗生素的結(jié)構(gòu)、功能與調(diào)控
1.1 脂肽類化合物簡介
1.2 表面活性素(Surfactin)
1.3 泛革素(Fengycin)
1.4 伊枯草菌素(Iturin)
2 聚酮類抗生素的結(jié)構(gòu)、功能與調(diào)控
3 非核糖體肽類抗生素的生物合成
下篇 研究內(nèi)容
第一章 解淀粉芽胞桿菌FZB42抑菌物質(zhì)的鑒定
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 酶和引物合成
1.3 AK1S突變體的構(gòu)建
1.4 解淀粉芽胞桿菌FZB42對禾谷鐮孢菌抑菌物質(zhì)的鑒定
2 結(jié)果與分析
2.1 AK1S突變體的構(gòu)建
2.2 解淀粉芽胞桿菌FZB42對禾谷鐮孢菌抑菌物質(zhì)的鑒定
3 討論
第二章 脂肽化合物BACILLOMYCIN D的純化
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 Bacillomycin D粗提取的制備
1.3 硅膠柱層析初步純化Bacillomycin D
1.4 制備型液相色譜純化bacillomycin D
2 結(jié)果與分析
2.1 硅膠柱層析初步純化bacillomycin D
2.2 制備型液相色譜純化bacillomycin D
3 討論
第三章 BACILLOMYCIN D對FUSARIUM GRAMINEARUM形態(tài)生理、新陳代謝,基因表達(dá)的影響與防效
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 Bacillomycin D EC50的測定
1.3 普通顯微鏡,掃描電鏡,透射電鏡對禾谷鐮孢菌的孢子以及菌絲進(jìn)行觀察
1.4 熒光染色測定禾谷鐮孢菌G細(xì)胞活性
1.5 熒光染色測定禾谷鐮孢菌細(xì)胞內(nèi)ROS的含量
1.6 bacillomycin D對禾谷鐮孢菌防效的檢測
1.7 Western blot
1.8 禾谷鐮孢菌DON毒素含量測定
1.9 禾谷鐮孢菌RNA的提取以及qRT-PCR分析
2 結(jié)果與分析
2.1 Bacillomycin D EC50的測定以及普通顯微鏡下分析bacillomycin D對禾谷鐮孢菌的影響
2.2 掃描電鏡與透射電鏡下分析bacillomycin D對禾谷鐮孢菌的影響
2.3 bacillomycin D對禾谷鐮孢菌ROS累積以及細(xì)胞活性的影響
2.4 Bacillomycin D對禾谷鐮孢菌產(chǎn)孢率和孢子萌發(fā)率的影響
2.5 Bacillomycin D對禾谷鐮孢菌防效的檢測
2.6 bacillomycin D對禾谷鐮孢菌DON毒素的影響
2.7 Western檢測bacillomycin D對禾谷鐮孢菌FgHog1和FgMgv1磷酸化水平的影響
3 討論
參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
致謝
附錄
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Bacillus cereus CH2對茄子黃萎病的田間防治效果研究以及對根圍微生態(tài)群落結(jié)構(gòu)的影響[J]. 楊威,蔣志強(qiáng),郭亞輝,郭堅(jiān)華. 微生物學(xué)通報(bào). 2011(05)
[2]油菜菌核病生防芽孢桿菌的分離鑒定及其脂肽化合物分析[J]. 薛鵬琦,劉芳,喬俊卿,伍輝軍,馮致科,高學(xué)文. 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2011(02)
[3]生防菌Pseudomonas fluorescens 2P24對甜瓜根圍土壤微生物的影響[J]. 朱偉杰,王楠,郁雪平,王偉. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(07)
[4]拮抗細(xì)菌B-916培養(yǎng)液對水稻紋枯病菌的抗生活性及其抗菌物質(zhì)的研究[J]. 陳志誼,許志剛,陸凡,劉永鋒,陳毓苓. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2000(03)
[5]菜豐寧B1濃縮菌粉的防病機(jī)理、生產(chǎn)工藝及應(yīng)用技術(shù)研究[J]. 丁中,劉躍,徐志榮,王金生,張學(xué)君. 農(nóng)藥. 2000(08)
[6]增產(chǎn)菌的應(yīng)用與研究[J]. 陳延熙,陳璧,潘貞德,王淑芝. 生物防治通報(bào). 1985(02)
本文編號:3619046
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省211工程院校教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:93 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
緒論
上篇 文獻(xiàn)綜述
第一章 植物根圍促生細(xì)菌的防病促生機(jī)理概述
1 植物病害生防細(xì)菌的研發(fā)概況
2 生防細(xì)菌對植物根圍微生態(tài)的影響
3 生防芽胞桿菌與植物互作機(jī)理研究進(jìn)展
4 生防芽胞桿菌誘導(dǎo)植物抗病性的產(chǎn)生
5 根際拮抗芽胞桿菌的促生機(jī)理
第二章 非核糖體肽類抗生素的結(jié)構(gòu)、功能與調(diào)控
1 脂肽類抗生素的結(jié)構(gòu)、功能與調(diào)控
1.1 脂肽類化合物簡介
1.2 表面活性素(Surfactin)
1.3 泛革素(Fengycin)
1.4 伊枯草菌素(Iturin)
2 聚酮類抗生素的結(jié)構(gòu)、功能與調(diào)控
3 非核糖體肽類抗生素的生物合成
下篇 研究內(nèi)容
第一章 解淀粉芽胞桿菌FZB42抑菌物質(zhì)的鑒定
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 酶和引物合成
1.3 AK1S突變體的構(gòu)建
1.4 解淀粉芽胞桿菌FZB42對禾谷鐮孢菌抑菌物質(zhì)的鑒定
2 結(jié)果與分析
2.1 AK1S突變體的構(gòu)建
2.2 解淀粉芽胞桿菌FZB42對禾谷鐮孢菌抑菌物質(zhì)的鑒定
3 討論
第二章 脂肽化合物BACILLOMYCIN D的純化
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 Bacillomycin D粗提取的制備
1.3 硅膠柱層析初步純化Bacillomycin D
1.4 制備型液相色譜純化bacillomycin D
2 結(jié)果與分析
2.1 硅膠柱層析初步純化bacillomycin D
2.2 制備型液相色譜純化bacillomycin D
3 討論
第三章 BACILLOMYCIN D對FUSARIUM GRAMINEARUM形態(tài)生理、新陳代謝,基因表達(dá)的影響與防效
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 Bacillomycin D EC50的測定
1.3 普通顯微鏡,掃描電鏡,透射電鏡對禾谷鐮孢菌的孢子以及菌絲進(jìn)行觀察
1.4 熒光染色測定禾谷鐮孢菌G細(xì)胞活性
1.5 熒光染色測定禾谷鐮孢菌細(xì)胞內(nèi)ROS的含量
1.6 bacillomycin D對禾谷鐮孢菌防效的檢測
1.7 Western blot
1.8 禾谷鐮孢菌DON毒素含量測定
1.9 禾谷鐮孢菌RNA的提取以及qRT-PCR分析
2 結(jié)果與分析
2.1 Bacillomycin D EC50的測定以及普通顯微鏡下分析bacillomycin D對禾谷鐮孢菌的影響
2.2 掃描電鏡與透射電鏡下分析bacillomycin D對禾谷鐮孢菌的影響
2.3 bacillomycin D對禾谷鐮孢菌ROS累積以及細(xì)胞活性的影響
2.4 Bacillomycin D對禾谷鐮孢菌產(chǎn)孢率和孢子萌發(fā)率的影響
2.5 Bacillomycin D對禾谷鐮孢菌防效的檢測
2.6 bacillomycin D對禾谷鐮孢菌DON毒素的影響
2.7 Western檢測bacillomycin D對禾谷鐮孢菌FgHog1和FgMgv1磷酸化水平的影響
3 討論
參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
致謝
附錄
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Bacillus cereus CH2對茄子黃萎病的田間防治效果研究以及對根圍微生態(tài)群落結(jié)構(gòu)的影響[J]. 楊威,蔣志強(qiáng),郭亞輝,郭堅(jiān)華. 微生物學(xué)通報(bào). 2011(05)
[2]油菜菌核病生防芽孢桿菌的分離鑒定及其脂肽化合物分析[J]. 薛鵬琦,劉芳,喬俊卿,伍輝軍,馮致科,高學(xué)文. 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2011(02)
[3]生防菌Pseudomonas fluorescens 2P24對甜瓜根圍土壤微生物的影響[J]. 朱偉杰,王楠,郁雪平,王偉. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(07)
[4]拮抗細(xì)菌B-916培養(yǎng)液對水稻紋枯病菌的抗生活性及其抗菌物質(zhì)的研究[J]. 陳志誼,許志剛,陸凡,劉永鋒,陳毓苓. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2000(03)
[5]菜豐寧B1濃縮菌粉的防病機(jī)理、生產(chǎn)工藝及應(yīng)用技術(shù)研究[J]. 丁中,劉躍,徐志榮,王金生,張學(xué)君. 農(nóng)藥. 2000(08)
[6]增產(chǎn)菌的應(yīng)用與研究[J]. 陳延熙,陳璧,潘貞德,王淑芝. 生物防治通報(bào). 1985(02)
本文編號:3619046
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