家蠶（Bombyx mori）是一種具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的鱗翅目模式昆蟲。引起家蠶致病的病原有很多種,家蠶核型多角體病毒（Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV）是其中危害較為嚴(yán)重的一種。蠶業(yè)生產(chǎn)中,使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒的傳統(tǒng)方法預(yù)防蠶病具有很大的局限性,培育抗性品種成為了防治蠶病的一種有效方法。近年來許多研究人員對(duì)家蠶抗性品種的培育開展了很多的研究,但是培育抗性品種的常規(guī)方法存在周期長、效率低等缺點(diǎn)。RNAi是生物體中普遍存在的一種現(xiàn)象,并且在昆蟲防治中已經(jīng)得到廣泛的應(yīng)用,利用RNAi結(jié)合轉(zhuǎn)基因技術(shù)有望提高家蠶對(duì)BmNPV的抗性。研究表明ie1、gp64和ie0基因在BmNPV增殖復(fù)制的過程中起著重要的作用,本研究將ie1基因的1-545 bp、gp64基因的1-507 bp和ie0基因的1-525 bp區(qū)域以反向串聯(lián)的方式連接,構(gòu)建能夠在細(xì)胞體內(nèi)穩(wěn)定轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生ds RNA的轉(zhuǎn)移載體pF-A3-die1-IM、pF-A3-dgp64-IM、pU-A3-die0-IG和pF-A3-die1-dgp64-IM,利用Invasin介導(dǎo)的DAP營養(yǎng)缺陷型E.c... 

【文章來源】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

核型多角體病毒示意圖(Wikipediaetal，2008)

通過抗性篩選和藍(lán)白斑篩選得到陽性克隆。提取陽性克隆中的重組Bacmid，利用脂質(zhì)體或磷酸鈣法轉(zhuǎn)染進(jìn)昆蟲細(xì)胞，構(gòu)建出重組桿狀病毒。Bac-to-Bac 系統(tǒng)相較于以往的重組桿狀病毒的構(gòu)建方法，不僅陽性率得到了提高，還縮短了重組桿狀病毒的構(gòu)建時(shí)間，使得 Bac-to-Bac 系統(tǒng)得到了廣泛的應(yīng)用。

利用Invasin介導(dǎo)的DAP營養(yǎng)缺陷型Sw106菌株生產(chǎn)重組桿狀病毒示意圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3618848