由稻瘟菌（Magnaporthe oryzae）引起的稻瘟病是水稻的重要病害之一,給水稻生產(chǎn)造成了嚴重威脅。附著胞是稻瘟菌侵染水稻的關鍵結構,其形成是稻瘟菌侵染水稻的必要條件之一。分泌蛋白作為一類重要的致病因子,在植物病原真菌的致病過程中起著重要作用。但目前關于稻瘟菌分泌蛋白,尤其是附著胞發(fā)育過程中分泌蛋白的組成等均缺乏整體的了解。因此,開展稻瘟菌附著胞分泌蛋白質組的研究將豐富稻瘟菌的致病分子機理。本研究采用體外模擬稻瘟菌與水稻互作的研究策略,應用高通量的Shotgun技術,對稻瘟菌附著胞的分泌蛋白進行了高通量鑒定。應用Label-free技術和生物信息學技術,開展稻瘟菌附著胞發(fā)育不同階段的分泌蛋白質組研究,并對其分泌蛋白的差異表達進行了分析。取得的結果如下:1、以PVDF膜為介質,對稻瘟菌分生孢子的萌發(fā)情況進行了研究;結果表明分生孢子在PVDF膜上可以正常萌發(fā)產(chǎn)生芽管和形成附著胞。采用超濾法,制備了高質量的稻瘟菌附著胞分泌蛋白;表明以PVDF膜作為介質可以模擬開展稻瘟菌早期侵染階段的分泌蛋白質組研究。2、以附著胞形態(tài)建成過程中附著胞發(fā)育期（8 h）和附著胞成熟期（24 h）為時間點,... 

【文章來源】：華南農(nóng)業(yè)大學廣東省

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

稻瘟菌侵染循環(huán)（引自Ribotetal.，2008）

圖 3 稻瘟菌信號通路示意圖（引自 Rebollar et al.，2013）促分裂素原活化蛋白激酶（MAPK）信號途徑分裂素原活化蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinase，MAPK）對植物病應外界刺激有著關鍵作用，外界信號分子通過膜受體轉換為膜內(nèi)信號后，啟 級聯(lián)反應，引起靶蛋白和轉錄因子的磷酸化，實現(xiàn)對細胞的調(diào)控（Boudsocq。MK1 是稻瘟菌首次克隆到的 MAPK 基因，該基因敲除突變體附著胞和孢子的，但孢子的萌發(fā)不受影響（Nishidaetal.，1993）。MoMSB2 和 MoSHO1 調(diào)控 PM，MoMSB2 敲除突變體=附著胞形成明顯受阻，對水稻致病性減弱；這兩個敲除突變體在人工模擬的疏水表面幾乎不能形成附著胞，PMK1 磷酸化水平低（Liuetal.，2011）。研究發(fā)現(xiàn)，MST50、MST11 和 MST7 都是 PMK1-MA的重要組分，參與了稻瘟菌附著胞的形成（Jin et al.，2013）。MPS1 作為稻

用軟件 WoLF PSORT（https://wolfpsort.hgc.jp/）和 TargetP 1.cbs.dtu.dk/services/TargetP/）對稻瘟菌中含有 N-端信號肽的蛋白析（Horton et al.，2007）。用軟件 TMHMM Server v2.0（http://www.cbs.dtu.dk/services/TM有 N-端信號肽且定位于胞外的蛋白質進行跨膜結構預測，排除（Kroghet al.，2001）。用軟件 big-PIPredictor（http://mendel.imp.ac.at/sat/gpi/gpi_se et al.，2004）對稻瘟菌中含有 N-端信號肽、定位于胞外、且不質進行 GPI 錨定位點分析，保留不含有錨定位點的蛋白，最終蛋白。

【參考文獻】：
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本文編號：3607933